乙型肝炎肝硬化患者腸道菌群與血清炎癥因子及肝功能水平的關系分析

黃漢麟 鄭鎮森 黃凱濤

廣東省汕頭市潮陽區大峰醫院消化內科 515154

肝硬化是慢性肝病發展的終末階段，以肝細胞廣泛壞死、肝小葉結構破壞、結節性再生、假小葉形成等為主要病理組織學改變。乙型肝炎肝硬化由長期乙肝病毒感染和復制破壞肝臟細胞所引起，患者早期無明顯癥狀體征，以后隨著肝臟代償功能下降，會出現明顯肝功能損害與門脈高壓表現，并累及多系統，不易或不可逆轉，是導致患者死亡的重要原因[1]。有研究指出，乙肝會引起復雜的免疫反應，VHC失代償可導致全身炎性癥狀，會釋放大量炎癥因子，參與肝細胞損傷機制，加速病情惡化，抑制炎癥因子釋放對控制患者病程進展、改善預后具有積極作用[2]。現代研究發現，腸道菌群在人體營養吸收、新陳代謝、免疫功能等方面發揮著重要作用，一旦菌群穩態遭到破壞，可引起多種健康問題，也是研究認為的導致VHC發生與進展的“幫兇”[3]。本文對腸道菌群同VHC患者炎癥因子與肝功能的關系進行研究，以期為本病臨床治療提供方向和思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2019年10月我院收治的VHC患者80例為研究對象。納入標準：慢性乙型肝炎所致VHC，診斷符合中華醫學會《肝硬化診治指南》(2019)相關標準；年齡>18歲；對本研究知情同意。排除標準：合并其他肝臟疾病；合并感染性疾病或存在感染傾向；合并其他明確可以引起腸道菌群紊亂的疾病；近3個月內服用過影響腸道菌群的制劑。依據肝功能Child-Pugh改良分級結果不同分為三組。試驗1組(A級，24例)：男13例，女11例，年齡39～75歲，平均年齡(56.2±10.9)歲。試驗2組(B級，31例)：男17例，女14例，年齡35～78歲，平均年齡(55.8±12.1)歲。試驗3組(C級，25例)：男14例，女11例；年齡38～76歲，平均年齡(56.0±11.4)歲。另根據一般資料相近原則，選取同期30例成年健康體檢志愿者為對照組，排除標準同試驗組。其中男18例，女12例；年齡36～77歲，平均年齡(55.9±11.3)歲。各組基線資料兩兩比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 采集兩組晨起糞便樣本(干便)，常規送檢試驗室，取0.5g新鮮樣本，加入4.5ml生理鹽水中(換算勻漿比例10%)充分混勻，并以10倍連續稀釋法繼續稀釋至10-9，分別取1ml稀釋后的樣本接種在培養基上，對具有代表性的乳桿菌、腸桿菌、梭菌、雙歧桿菌、腸球菌進行培養和測定。腸桿菌和腸球菌為需氧菌，35℃孵育24h，乳桿菌、梭菌、雙歧桿菌為厭氧菌，抽氣換氣培養法培養48h，采用全自動微生物鑒定系統鑒定細菌和計算細菌總量。另采集兩組清晨空腹靜脈血樣，常規送檢試驗室，提取血清，以全自動生化分析及配套試劑測定炎癥因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、轉化生長因子-β(TGF-β)以及肝功能指標血清總膽紅素(TBil)與白蛋白(ALB)。基于測定的TBil、ALB水平，綜合患者臨床癥狀，依據Child-Pugh改良分級標準，將患者肝功能分為A、B、C三級(C級患者肝臟儲備功能最差，A級最好)，分別納入試驗1、2、3組，結合對照組，比較觀察各組指標差異，分析指標相關性。

1.3 統計學方法 以SPSS21.0軟件統計分析所得數據，計量資料以均數±標準差表示，組間總體比較方差分析，多組間兩兩比較SNK-q檢驗，相關性采用Spearman秩相關分析檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 腸道菌群指標 各試驗組乳桿菌、雙歧桿菌水平均低于對照組；各試驗組腸桿菌、梭菌、腸球菌水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。且乳桿菌、雙歧桿菌水平隨肝功能的下降呈遞減趨勢，腸桿菌、梭菌、腸球菌隨肝功能的下降呈遞增趨勢，組間兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組腸道菌群指標比較

2.2 炎癥因子水平 各試驗組IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。且IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β隨患者肝功能的下降呈遞增趨勢，組間兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 各組血清炎癥因子水平比較

2.3 肝功能指標 各試驗組TBil均高于對照組，ALB均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。且TBil隨肝功能下降呈遞增趨勢，ALB隨肝功能的下降呈遞減趨勢，組間兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 各組肝功能指標比較

2.4 相關性分析 經Spearman相關分析，乳桿菌、雙歧桿菌與四項炎癥因子指標呈負相關，腸桿菌、梭菌、腸球菌與四項炎癥因子指標呈正相關，差異有統計學意義(P<0.05)。乳桿菌、雙歧桿菌與肝功能指標TBil呈負相關，與ALB呈正相關，腸桿菌、梭菌、腸球菌與肝功能指標TBil呈正相關，與ALB呈負相關，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 VHC患者腸道菌群與血清炎癥因子及肝功能的相關系數(r)

3 討論

腸道菌群與肝臟健康關系密切。有研究指出，腸道吸收的營養成分經由肝臟代謝后合成人體所需物質，在這一過程中，腸道菌群中的益生菌參與肝細胞蛋白質代謝，可以幫助提高肝臟代謝能力，減輕肝臟解毒負荷，對肝臟具有保護作用[4-5]。如果腸道菌群失調，腸內營養物質代謝紊亂，會損傷腸道黏膜，使通透性增加，細菌及代謝物進入循環系統，會加重腎臟負擔和損害，形成惡性循環[6-7]。反之，VHC患者肝功能損傷，肝臟代謝異常，對腸源性有毒物質的分解能力下降，也會引起腸道菌群紊亂。由此可見，肝臟與腸道是相互作用的，腸道菌群穩態、腸道屏障完整是保護肝臟健康的重要途徑。

本次臨床研究結果顯示，乳桿菌、雙歧桿菌與肝功能指標TBil呈負相關，與ALB呈正相關，腸桿菌、梭菌、腸球菌與肝功能指標TBil呈正相關，與ALB呈負相關，提示VHC患者腸道菌群紊亂與肝功能密切相關，紊亂程度越嚴重，肝功能水平越低。有學者在研究中指出[8-9]，腸道菌群紊亂是肝硬化患者肝功能下降的重要促發因素，在常規保肝治療基礎上，予以肝硬化患者三聯活菌治療，積極糾正腸道菌群失衡，結果顯示肝功能指標得到顯著改善，證明了腸道菌群失衡對肝硬化患者肝功能的影響，與本文研究結論相符。

VHC病理進展過程中有著復雜的免疫反應，亦會引起全身炎性癥狀，參與肝細胞損傷機制。現代研究發現，腸道菌群也與慢性炎癥存在密切關聯。目前，已有證據表明，改變腸道菌群能夠增加炎癥標志物[10]。另有研究指出，腸道菌群可能是炎癥反應的驅動力，腸道菌群紊亂，腸屏障功能減弱，會加速毒素進入血液，引發炎癥，而有些益生菌具有物理強化腸屏障的功能，其產生的短鏈脂肪酸也有助于減少促炎細胞因子的生成[11-12]。本研究比較觀察VHC患者腸道菌群與炎癥因子水平，結果顯示菌群紊亂越嚴重，患者的血清炎癥因子水平越高，考慮原因在于腸道菌群紊亂，有益菌遭到抑制，VHC患者炎癥反應增加了胃腸道通透性，大量釋放的炎性因子得以通過腸屏障進入血液，損傷肝臟，促使VHC進展。這使得肝臟的代謝與分泌功能進一步惡化，加劇了炎癥因子釋放與腸道菌群紊亂，最終導致惡性循環。

綜上所述，腸道菌群失調與血清炎癥因子及肝功能密切相關，維持乙型VHC患者腸道菌群平衡，對降低血清炎癥因子水平，改善肝功能具有積極作用，應引起臨床重視。