不同九制方法對景寧多花黃精藥典指標成分變化影響

陳孟廣，陳莉娟，余麗慧，俞信光，王忠華，江建銘

(1.景寧畬族自治縣林業總場，浙江 景寧 323500；2.浙江萬里學院，浙江 寧波315100； 3.浙江省中藥研究所有限公司，浙江 杭州 310023)

1 引言

黃精，又稱千年運、雞頭參、老虎姜、九蒸姜、野山姜等，為我國傳統滋補中藥材之一，具有補氣養陰，健脾，潤肺，益腎等功效。多花黃精(PolygonatumcyrtonemaHua)為《中國藥典》收載的黃精藥材3個基原植物之一[1]。黃精作為我國傳統藥食兩用滋補中藥材，具有悠久的藥用歷史和確切的臨床療效，其經“九蒸九曬”的九制黃精被廣泛應用于保健養生。

景寧縣的黃精生產具有獨特的區位優勢，主要呈現在野生資源量大質優、生產應用歷史悠久、民族文化底蘊深厚、政府部門高度重視、產業發展初具規模等，一批產業基地和實體企業快速發展，但加工技術粗放、產品結構單一也極大阻礙了產業高質量發展前景[2]。本研究以景寧野生多花黃精為材料，利用現代儀器分析對不同加工工藝(蒸制容器)對總灰分、浸出物、黃精多糖等藥典指標成分的影響，探討黃精九蒸九制過程中的藥典(炮規)指標成分變化規律，為進一步優化和確定適宜的炮制加工工藝和控制參數，規范產品精深加工炮制流程提供科學依據，同時也為黃精系列產品研發、促進產業高質量發展提供技術支撐。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

取采自景寧縣境內生長年限和大小基本一致的野生多花黃精新鮮根莖，洗凈泥沙、除去須根后備用。

2.2 試驗方法

2.2.1 試驗設計

以農家蒸籠和燃氣蒸飯柜為蒸制容器，分別制備樣品，并對應稱之為農家九制樣品和現代九制樣品(表1)。

表1 景寧野生多花黃精九制加工設計與處理

2.2.2 樣品制作

2.2.2.1 農家九制樣品制備

以農家柴火灶及蒸籠為加工器具，按下述方法分步進行，制成9份檢測樣品。

(1)將重量約40 kg的清潔鮮根莖均勻分成9份，分別裝入9個容器中，置蒸籠中蒸制60～100 min，至中央發虛為度，待水溫自然降到30 ℃左右，取出根莖，并收集汁液另存放。

(2)將根莖曬或烘(50～70 ℃)至外皮微干后，放入(1)收集的汁液中，悶潤至汁液吸盡，再按商品制作要求曬或烘(50～70 ℃)至成品，此為第一蒸樣品。

(3)其余8份再行第二次蒸制，按上述(1)、(2)方法制備第二份樣本，蒸制時間為120 min，如此反復蒸制、干燥、悶潤、干燥，分別制成第二蒸、第三蒸等其余8份樣品。

2.2.2.2 現代九制樣品制備

以燃氣蒸飯柜(BST-01ZFG)為加工器具，按下述方法分步進行，制成9份檢測樣品。

(1)將重量約40 kg的清潔鮮根莖均勻分成9份，分別裝入9個容器中，置蒸飯柜中蒸制60～100 min，至中央發虛為度，待水溫降到40 ℃，取出根莖，并收集汁液另存放。

(2)將根莖曬或烘(50～70 ℃)至外皮微干后，放入(1)收集的汁液中，悶潤至汁液吸盡，再按商品制作要求曬或烘(50～70 ℃)至成品，此為第一蒸樣品。

(3)其余8份再行第二次蒸制，按上述(1)、(2)方法制備第二份樣本，蒸制時間為120 min，如此反復蒸制、干燥、悶潤、干燥，分別制成第二蒸、第三蒸等其余8份樣品。

2.2.3 指標檢測

2.2.3.1 總灰分含量

按灰分測定法標準操作規程(SOP-QC-ZJ-6016)，總灰分測定法測定。

2.2.3.2 酸不溶性灰分含量

取2.2.3.1項所得的灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10 mL，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10 min，表面皿用熱水5 mL沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。

2.2.3.3 醇物含量

按浸出物測定法標準操作規程(SOP-QC-ZJ-6015)項下的熱浸法測定。

2.2.3.4 多糖含量

(1)對照品溶液的制備。取經105 ℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品33 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL中含無水葡萄糖0.33 mg)。

(2)標準曲線的制備。精密量取對照品溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL，分別置10 mL具塞刻度試管中，各加水至2.0 mL，搖勻，在冰水浴中緩緩滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混勻，放冷后置水浴中保溫10 min，取出，立即置冰水浴中冷卻10 min，取出，以相應試劑為空白。照紫外一可見分光光度法，在582 nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

(3)樣品的測定。測定時，取60 ℃干燥至恒重的本品細粉約0.25 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加80%乙醇150 mL，置水浴中加熱回流1 h，趁熱濾過，殘渣用80%熱乙醇洗滌3次，每次10 mL，將殘渣及濾紙置燒瓶中，加水150 mL，置沸水浴中加熱回流1 h，趁熱濾過，殘渣及燒瓶用熱水洗滌4次，每次10 mL，合并濾液與洗液，放冷，轉移至250 rnl量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取1mL，置10 mL具塞干燥試管中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至2 mL”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含無水葡萄糖的重量(mg)，計算，即得。本品按干燥品計算，含黃精多糖以無水葡萄糖(C6H12O6)計。

2.2.3.5 水分含量

按照《中國藥典》2015年版一部(附錄IX H)水分測定法項下第一法(烘干法)測定, 取不同處理多花黃精約4.0 g，精密稱定，在100～105 ℃干燥5 h，直到連續2次稱重差異不超過5 mg為止。

3 結果與分析

3.1 對總灰分和酸不溶性灰分含量變化的影響

景寧野生多花黃精農家九制和現代九制藥典(炮規)指標成分檢測結果詳見表2。從表2可知，野生多花黃精在九制過程中，其總灰分和酸不溶性灰分含量變化隨蒸制次數增加呈現先緩慢下降，后逐步趨穩的變化過程，鮮根莖含量最高為3.62%，農家九制過程其總灰分和酸不溶性灰分含量分別介于2.34%～3.45%和0.64%～1.32%，而現代九制則分別介于2.26%～3.33%和0.63%～1.15%。從圖1和圖2 可以發現，無論是農家九制還是現代九制，總灰分和酸不溶性灰分含量一制后均呈下降趨勢，四制后基本趨于穩定；農家九制比現代九制相比較高，但差異不明顯。

圖1 2種不同蒸制方法對總灰分含量變化影響

圖2 2種不同蒸制方法對酸不溶性灰分含量變化影響

3.2 對醇浸出物含量變化的影響

圖3為2種不同蒸制方法對醇浸出物含量變化的影響示意圖，從圖3和表2可以看出，野生多花黃精在九制過程中其醇物含量變化隨蒸制次數增加呈現逐步上升的變化過程，鮮根莖含量最低為60.81%，農家九制過程其醇浸出物含量介于61.12%～71.86 %，而現代九制介于61.26%～71.28%，農家九制比現代九制相比略高，但差異不明顯。

圖3 2種不同蒸制方法對醇浸出物含量變化影響

3.3 對黃精多糖含量變化的影響

圖4為2種不同蒸制方法對黃精多糖含量變化的影響示意圖，從圖4和表2可以看出，黃精多糖以新鮮根莖含量最高，達18.01%，隨蒸制次數呈現先快速下降，后下降趨緩，再相對平衡的變化過程，尤其是一制后下降顯著，下降幅度達51.4%和56.4%，其中農家九制下降趨勢較現代九制來得平緩，一般五蒸后多糖含量相對平穩，而現代九制則在四蒸后就趨平穩，含量均保持在5.5%左右。

3.4 對水分含量變化的影響

圖5為2種不同蒸制方法水分含量變化示意圖，從圖5和表2可以看出，水分含量變化在多花黃精九制過程中呈無規律特征，但變化過程2種蒸制方法對比具有一定的同步性，其原因就在于2種方法制備后的樣品在同一烘箱內干燥所致，說明九制過程中水分含量的高低主要其決于樣品制備后的干燥程度，與蒸制次數無關。

表2 多花黃精農家九制加工方法對藥典(炮規)指標成分變化的影響

圖4 2種不同蒸制方法對黃精多糖含量變化影響

4 小結與討論

黃精九蒸九制加工法是傳統技藝，唐《食療本草》[3]首次提出了“九蒸九曬”加工方法，以后各代文獻大多沿用此法，加工產品稱之為九制黃精或制黃精。《中國藥典》(2015版)收載了黃精藥材與酒黃精，其中酒黃精制法為：取凈黃精，按每100 kg黃精，用黃酒20 kg的比例，照酒燉法或酒蒸法燉透或蒸透，稍晾，切厚片，干燥。對燉制和蒸制次數未作規定，但制定了質量檢測指標，總灰分不得過4.0%、醇溶性浸出物不得少于45.0%、黃精多糖不得少于4.0%和水分不得過15.0%。《浙江省中藥炮制規范》(2015版)收載了制黃精[4]和制浙黃精(長梗黃精Polygonatum filipes Merr.)[5]的制法，其制法為：取原藥，除去雜質，洗凈，置適宜容器內，蒸約8 h，燜過夜。如此反復蒸至滋潤黑褐色時，取出，晾至半干，切厚片，干燥；或行切厚片，再蒸至滋潤黑褐色，取出，干燥。對蒸制次數也未作規定，但在制浙黃精下增加了酸不溶性灰分不得過2.0%的檢測指標。

圖5 2種不同蒸制方法對水分含量變化影響

本試驗結果表明，黃精根莖在加工過程中隨著蒸制次數增加，總灰分、酸不溶性灰分和黃精多糖含量呈先下降、后趨穩的變化過程，而醇浸出物則呈現逐步上升的變化過程，其中黃精多糖含量變化與張洪坤、瞿昊宇、楊圣賢[6～8]等報道的一致。農家九制和現代九制相比，各指標成分變化雖然存在一定差異，但總趨勢基本一致，均符合《中國藥典》和《浙江省中藥炮制規范》的質量限值要求。由此可見，多花黃精在蒸制加工過程中，無論采用何種加工器具，其藥典指標成分雖然會呈現或增、或降的不同變化，但其中成分變化主要在前一到四次的蒸制過程，五次后主要成分基本處于穩定。因此從本試驗結果，并結合《中國藥典》和《浙江省中藥炮制規范》的相關規定，多花黃精在加工過程中減少蒸制次數，優化蒸制過程是完全可行，不僅不會對藥典指標成分造成影響，而且有利于提高加工效率，減少能源消耗，促進生態保護，對工藝優化研究意義重大。