采用顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法檢測大血小板計(jì)數(shù)診斷心腦血管疾病的臨床價值

肖冬梅

【摘要】 目的 探討顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法檢測大血小板計(jì)數(shù)診斷心腦血管疾病的臨床價值。方法 選取40例心腦血管疾病患者作為試驗(yàn)組， 選取同期40例健康志愿者作為對照組， 對兩組受試者均采用顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法對大血小板計(jì)數(shù)檢測。比較試驗(yàn)組患者兩種檢測血小板數(shù)量、糾正后血小板數(shù)量以及兩組1、3周大血小板計(jì)數(shù)。結(jié)果 顯微鏡目視計(jì)數(shù)法檢測血小板數(shù)量（32.75±5.23）×109/L、糾正后血小板數(shù)量（36.12±1.20）×109/L均高于外周血涂片法檢測的（29.39±8.23）×109/L、（34.98±2.31）×109/L， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。試驗(yàn)組患者1周大血小板計(jì)數(shù)（33.28±3.21）×109/L、3周大血小板計(jì)數(shù)（35.18±3.59）×109/L均高于對照組受試者的（29.22±3.22）×109/L、（30.59±2.91）×109/L， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 對心腦血管疾病患者來說， 應(yīng)采取微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法聯(lián)合檢測心腦血管疾病患者大血小板計(jì)數(shù)， 減少臨床誤差， 并且大血小板計(jì)數(shù)增多者患有心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)加大， 臨床可以采取大血小板計(jì)數(shù)的檢測來確定患者是否有心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)。

【關(guān)鍵詞】 心腦血管疾病;微鏡目視計(jì)數(shù)法;外周血涂片法;檢測;大血小板計(jì)數(shù)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.25.014

心腦血管疾病在我國的中老年人群中是一種常見和多發(fā)病， 并且心腦血管疾病容易對患者生存以及生活質(zhì)量造成很大影響。臨床對血常規(guī)檢測的準(zhǔn)確性已經(jīng)隨著我國醫(yī)療診斷技術(shù)的加強(qiáng)變得越來越高[1]。其中大血小板計(jì)數(shù)是臨床指導(dǎo)心腦血管疾病診斷的一個重要指標(biāo)， 也是血常規(guī)檢測不可缺少的參數(shù)。但顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法檢測到的血小板數(shù)量存在人工差異現(xiàn)象且臨床檢測人員難以辨別， 且容易造成血小板檢測失準(zhǔn)。作者以顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法為基礎(chǔ)來對血小板<110×109/L血液樣品進(jìn)行復(fù)驗(yàn)， 探討通過不同檢測方法的結(jié)合來提高血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性， 并對中心醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測的心腦血管疾病患者和健康志愿者作為對比， 研究大血小板計(jì)數(shù)與心腦血管疾病的臨床價值， 選取2019年1月～2020年1月在遼寧省沈陽市鐵西區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測的心腦血管疾病患者作為研究對象， 研究微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法對大血小板計(jì)數(shù)的對比與心腦血管疾病的臨床價值， 研究如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2019年1月～2020年1月在遼寧省沈陽市鐵西區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測的40例心腦血管疾病患者作為試驗(yàn)組， 男20例， 女20例;年齡45～70歲， 平均年齡（60.0±5.3）歲。選取同期40例健康志愿者作為對照組， 男21例， 女19例;年齡45～69歲，?平均年齡（60.0±5.2）歲。兩組一般資料比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合心血管學(xué)會1998年制定的心腦血管疾病分類診斷標(biāo)準(zhǔn)。心血管患者對血液檢測指標(biāo)均知情。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除有其他的主要疾病， 如有嚴(yán)重腎功能衰竭的患者;年齡>80歲者;有精神疾病的不能配合實(shí)驗(yàn)者;有嚴(yán)重的腫瘤者， 以及不同意該實(shí)驗(yàn)者。

1. 3 方法 根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第3版）》的要求， 制備了2%草酸銨血小板稀釋劑和貝索雷特復(fù)合染料。參與全血細(xì)胞室內(nèi)和室間質(zhì)量控制的檢測結(jié)果均可靠。對兩組受試者均采用顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法對大血小板計(jì)數(shù)檢測。外周血涂片法：先將血小板<110×109/L的樣品置于36.5℃恒溫箱中25 min， 再用全血復(fù)驗(yàn)來消除冷凝集造成的血小板假減。然后做血液涂片來檢查9個視野。鏡檢時重點(diǎn)觀察血涂片尾部出現(xiàn)單抗體引起血小板聚集情況。假血小板減少樣本在排除上述原因造成的血小板復(fù)查結(jié)果后仍<110×109/L， 對這些臨床心腦血管疾病患者進(jìn)行臨床檢查來確認(rèn)臨床資料檢驗(yàn)結(jié)果是否相符。顯微鏡目視計(jì)數(shù)法：血小板鏡下計(jì)數(shù)按國際血液學(xué)復(fù)測規(guī)則進(jìn)行評價并結(jié)合外周血涂片顯微鏡下觀察血小板情況， 需要顯微鏡目測計(jì)數(shù)的方法， 采集患者外周血并丟棄第一滴血， 取第二滴血15 μl， 混于2%草酸銨血小板稀釋液360 μl中， 待紅細(xì)胞完全溶解， 3～8 min后， 再充分混合后注入細(xì)胞計(jì)數(shù)池中8 min， 使血小板完全下沉， 必須在30 min內(nèi)完成血小板計(jì)數(shù)后放置樣品和保存時間， 在患者血常規(guī)檢測過程中樣品的保存會對血小板產(chǎn)生一定干擾， 主要為臨床檢測過程中樣品放置時間和樣品保存容器的清潔度。對于檢測儀器應(yīng)根據(jù)粒徑進(jìn)行有效的鑒別， 但對于血小板特性來說則不行， 如果容器的清潔度不好會摻雜相關(guān)雜質(zhì)， 而導(dǎo)致在檢測過程中進(jìn)行血小板檢測， 雜質(zhì)也都參與檢測， 對最終檢測結(jié)果產(chǎn)生影響而出現(xiàn)虛假增加的現(xiàn)象。如果樣品在保存過程中時間過長， 則在血常規(guī)檢測過程中巨血小板的數(shù)量會有一定程度的增加， 而對抗凝劑選擇和比例會產(chǎn)生一定程度的影響。當(dāng)選擇同一抗凝劑進(jìn)行臨床試驗(yàn)的最終抗凝劑與患者相同， 兩種血液的混合比例會對最終檢測質(zhì)量產(chǎn)生一定程度的陰影。患者表現(xiàn)出高血比的抗凝劑相對不足， 會導(dǎo)致患者血漿中血塊增多并導(dǎo)致最終測量節(jié)點(diǎn)出現(xiàn)假還原現(xiàn)象。會導(dǎo)致血比太小的抗凝血劑濃度增加到一定程度， 患者血小板會出現(xiàn)崩解腫脹并導(dǎo)致與正常血小板大小相同的碎片， 并最終導(dǎo)致患者的血液小板試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假增加現(xiàn)象。

1. 4 觀察指標(biāo) 比較試驗(yàn)組患者兩種方法檢測血小板數(shù)量、糾正后血小板數(shù)量以及兩組1、3周大血小板計(jì)數(shù)。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 試驗(yàn)組患者兩種方法檢測結(jié)果對比 顯微鏡目視計(jì)數(shù)法檢測血小板數(shù)量、糾正后血小板數(shù)量均高于外周血涂片法檢測， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 兩組1、3周大血小板計(jì)數(shù)比較 試驗(yàn)組患者

1周大血小板計(jì)數(shù)、3周大血小板計(jì)數(shù)均高于對照組受試者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

心腦血管疾病為臨床上的常見疾病， 該病隨著我國人口老齡化， 患病人數(shù)逐年增加， 嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量， 會給社會帶來負(fù)擔(dān)。全血細(xì)胞分析是臨床診斷患者心腦血管疾病的一種常用方法， 血小板是診斷患者心腦血管疾病一個動態(tài)指標(biāo)。血小板減少和增加對患者心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展、預(yù)后與患者是否使用治療藥物、和患者自身因素等密切相關(guān)。臨床準(zhǔn)確記錄血小板有利于心腦血管疾病臨床診斷和治療， 臨床應(yīng)合理用藥， 否則會延誤病情甚至危及生命[2]。因此血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性具有重要臨床意義。患者平均紅細(xì)胞體積<75 fl時血液中含有一些細(xì)小的紅細(xì)胞， 這些細(xì)小的紅細(xì)胞會參與患者后期的血小板計(jì)數(shù)并導(dǎo)致患者血小板出現(xiàn)虛假增加。樣品保存時間和抗凝劑的使用、紅細(xì)胞體積縮小都會對患者的血小板檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。為了使血小板檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性得到顯著提高， 應(yīng)在臨床實(shí)踐中綜合分析和在顯微鏡下對患者進(jìn)行再次計(jì)數(shù)或再次檢測， 有效減少檢測誤差并獲得準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。血樣檢測是對心腦血管疾病患者臨床隨訪治療的準(zhǔn)確依據(jù)， 為顯著提高心腦血管疾病患者臨床治療效果和預(yù)后質(zhì)量提供了依據(jù)， 顯微鏡目視計(jì)數(shù)法需人工復(fù)計(jì)數(shù)及血涂片鏡檢證實(shí)， 并加血小板形態(tài)學(xué)說明。根據(jù)國家臨床試驗(yàn)操作規(guī)程， 2%草酸銨稀釋劑對細(xì)胞有較強(qiáng)的破壞能力， 故草酸銨溶出度計(jì)數(shù)法為血小板計(jì)數(shù)法， 顯微鏡目視計(jì)數(shù)法血小板形態(tài)清晰， 并在顯微鏡下易于鑒別， 且試劑成本低， 是質(zhì)量評價的首選[3]。觀察外周血血小板涂片的數(shù)量、形態(tài)是臨床血液學(xué)研究的常規(guī)項(xiàng)目[4]。因此， 只有結(jié)合不同的檢測方法， 才能有效減少大血小板計(jì)數(shù)的誤差， 為心腦血管疾病的臨床診斷和預(yù)后提供真實(shí)而準(zhǔn)確的血小板數(shù)據(jù)。朱建鋒等[5]在兩種外周血涂片血小板估測方法的評價中發(fā)現(xiàn)， 外周穴涂片估計(jì)血小板計(jì)數(shù)存在誤差， 需要多種方法聯(lián)合使用才能得到有效值。梁巍等[6]在不同檢測方法對大血小板計(jì)數(shù)的對比與心腦血管疾病的臨床價值中發(fā)現(xiàn)采取微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法聯(lián)合使用， 正確率較高。本試驗(yàn)顯示， 顯微鏡目視計(jì)數(shù)法檢測血小板數(shù)量、糾正后血小板數(shù)量均高于外周血涂片法檢測， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。試驗(yàn)組患者1周大血小板計(jì)數(shù)、3周大血小板計(jì)數(shù)均高于對照組受試者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， 對心腦血管疾病患者來說， 應(yīng)采取顯微鏡目視計(jì)數(shù)法和外周血涂片法聯(lián)合檢測心腦血管疾病患者大血小板計(jì)數(shù)， 可以較少誤差， 并且大血小板計(jì)數(shù)增多者患有心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)加大， 臨床可以采取大血小板計(jì)數(shù)的檢測來確定患者是否有心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)。

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[收稿日期：2020-03-23]