外周血ICOS/ICOSL對乙肝患者病情的影響探究

河南省信陽市淮濱縣疾病預防控制中心（464400）李和梅

乙型肝炎作為一種病毒感染性疾病，目前全球約3.5億乙型肝炎病毒感染者[1]。我國是乙型肝炎病毒感染大國，長期感染乙肝病毒可逐步發展為肝硬化、肝衰竭和肝癌，有研究顯示世界范圍內每年有100多萬死于HBV感染所導致的疾病[2][3]。HBV病毒本身并不能損傷肝細胞，乙肝病毒利用肝細胞攝取的養料賴以生存并在肝細胞內復制。病毒復制的乙肝表面抗原、乙肝e抗原和乙肝核心抗原釋放在肝細胞膜上，激發人體的免疫系統來辨認，并發生反應從而造成肝細胞的損傷和破壞[4]。HBV特異性T細胞免疫及其產生的細胞因子具有參與免疫應答、清除病毒的作用，但其發生發展的免疫機制尚不清楚。ICOS及ICOSL作為T淋巴細胞活化、增殖及分化的免疫正性共刺激分子，在免疫傳染性疾病及腫瘤方面發揮著重要作用，但在HBV感染中的作用尚不明確。本研究選取了86例乙肝患者為研究對象，通過檢測ICOS及ICOSL水平，分析其對乙肝患者病情的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年9月～2018年1月86例在我院接受治療的乙肝患者為實驗組，男性47例，女性39例，年齡23～68歲，平均年齡（43.27±3.31）歲，病程6～17月，平均病程（11.35±2.17）月，輕度40例，中度29例，重度17例。納入標準：①研究對象乙型肝炎病毒表面抗原陽性且符合《慢性乙型肝炎防治指南》的診斷標準；②病程超過6個月；③患者均未進行免疫調節及抗病毒治療。排除標準：①患有肝硬化、肝癌或其他病毒性肝炎的患者；②存在自身免疫性疾病，孕婦、酗酒的患者；③患有精神疾病、認知功能障礙、惡性腫瘤或重要臟器病變疾病的患者。選取同期86例健康體檢者作為對照組，男性45例，女性41例，年齡20～70歲，平均年齡（45.02±3.41）歲。對照組乙型肝炎標志物測定為陰性，排除標準與實驗組相同。本研究已經院倫理委員會審核同意，患者及家屬均簽署知情協議書。

1.2 方法

1.2.1 HBV血清標志物檢測 采用電化學發光法檢測HBsAg，使用儀器為羅氏cobase601電化學發光全自動免疫分析系統。陽性參考范圍：HBsAg>0.05IU/mL、HBeAg>1.0S/CO。

1.2.2 ALT檢測 采用Modular DDPP全自動生化分析儀操作說明書進行檢測。

1.2.3 HBV DNA檢測 使用實時熒光定量PCR法檢測HBV DNA定量，試劑又達安基因有限公司提供。

1.2.4 ICOS及ICOSL水平檢測。

1.3 統計學分析 本次研究采用SPSS15.0軟件處理數據。計數資料以頻數表示，比較采用χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，比較采用獨立樣本t檢驗，采用非配對Mann-Whiney rankSumtest檢驗，并且進行相關性驗證P ＜0.05為差異具有統計學意義。

附表1 檢測對象基本情況比較

附表2 各組HBsAg、HBeAg、ALT及HBV-DNA指標比較

附表3 PBMC中共刺激分子的mRNA水平

2 結果

2.1 檢測對象基本情況比較 86例實驗組根據血清標志物HBsAg、HBeAg、ALT及HBV DNA檢測結果分為免疫耐受期組、免疫活躍期組合免疫低復制期組。各組基本情況如附表1所示。

2.2 各組HBsAg、HBeAg、ALT及HBVDNA指標比較 免疫耐受期HBsAg、HBeAg及HBV-DNA水平高于其余兩組，差異具有統計學意義（P ＜0.05），免疫活躍期ALT水平最高，與兩組比較差異具有統計學意義（P＜0.05）。見附表2。

2.3 P

BMC中共刺激分子的mRNA水平 免疫耐受期、免疫活躍期及免疫低復制期的患者ICOS及ICOSL水平均高于對照組，差異具有統計學意義（P ＜0.05），但三組患者比較差異無統計學意義（P>0.05）。見附表3。

3 討論

乙型肝炎病毒逃避免疫系統的監控才能夠存活，因此免疫監視和免疫應答能有效預防和消除疾病。系統刺激信號在機體產生細胞免疫效益的過程中發揮著重要的作用，ICOS及ICOSL結合介導協同刺激信號能有效提高T細胞活性，促進T細胞增殖和細胞因子的分泌。ICOS是由2個亞單位構成的同源二聚體，屬于Ⅰ型跨膜蛋白，相關研究顯示ICOS/ICOSL與炎性反應、自身免疫性疾病相關。ICOS缺陷會導致c-Maf轉錄降低及細胞因子IL-21分泌減少，引發T細胞功能障礙及記憶性T細胞減少，破壞效應T細胞及調節性T細胞的平衡。

濾泡輔助T細胞的主要作用為參與抗體類別的轉換和體液免疫，而ICOS/ICOSL對濾泡輔助T細胞的形成也有影響。ICOS/ICOSL信號通路能促進T細胞CD40配體的表達，CD40配體復合物又能促進B細胞成熟和存活，對B細胞和T細胞的免疫應答都產生影響，從而在體液免疫和細胞免疫中發揮重要的作用。在本研究中，免疫耐受期、免疫活躍期及免疫低復制期的患者ICOS及ICOSL水平均高于對照組，差異具有統計學意義（P ＜0.05），但三組患者比較差異無統計學意義（P>0.05），表明乙肝患者ICOS及ICOSL水平的變化影響機體T細胞及B細胞，改變機體對HBV的免疫反應性。