肉制品中瘦肉精的檢測技術研究

陳明星 李靜

摘 要：瘦肉精是一類能夠促進瘦肉生長、抑制肥肉生長的動物用藥。不法分子為了促進家畜生長和提高瘦肉率將瘦肉精添加于飼料中，食用了含瘦肉精的動物組織會產(chǎn)生嚴重的毒副作用。作者綜述了瘦肉精的危害以及肉制品中瘦肉精檢測方法研究的進展。

關鍵詞：瘦肉精;檢測;氣相色譜;免疫

瘦肉精，學名鹽酸克倫特羅（Clenbuterol，簡稱CL），其化學結構和理化性質(zhì)與腎上腺素相似，是一種β-興奮劑。臨床上用于治療支氣管哮喘和痙攣等，養(yǎng)殖業(yè)上主要用于提高動物的胴體瘦肉率，國外也用于減肥。但是CL具有很高的殘留性，可引起急性中毒和慢性中毒。世界各國嚴禁CL用于禽畜的養(yǎng)殖，但因利潤驅(qū)使，仍存在非法使用情況，嚴重威脅人類的健康。

由于瘦肉精主要殘留于動物內(nèi)臟中，而西方國家一般不消費動物內(nèi)臟，在合理控制添加量的前提下，其殘留量及其對人體的影響有限，故而在美國、加拿大、新西蘭及我國香港等地區(qū)，瘦肉精這類物質(zhì)的使用是合法的。在我國大陸地區(qū)，從國民的飲食習慣和我國具體國情出發(fā)，中國農(nóng)業(yè)部早在 1997 年 3 月就發(fā)布了農(nóng)牧發(fā) [1997] 3 號令嚴禁 β- 腎上腺素能激動劑在動物生產(chǎn)中的應用，而香港地區(qū)對克倫特羅的最大殘留量規(guī)定為小于10 μg/kg（2001.146號法律公告）

1 瘦肉精的檢測方法

1.1 高效液相色譜法

Fredy Morales-Trejo采用高效液相色譜法（HPLC）對牛肝臟中的鹽酸克倫特羅進行測定，檢出限為 0.42 ng/g，相對偏差<4.74%，該法快速、準確、重復性高，可操作性強，可用于動物肝臟中克倫特羅殘留的測定。Pilar Gonzalez Gigosos采用高效液相色譜法對動物視網(wǎng)膜中的鹽酸克倫特羅進行了檢測，檢出限為0.5 ng/g，該法準確、快速。

1.2 氣相色譜法

吳銀良等用有機混合溶劑來提取動物肝組織樣品，條件是堿性環(huán)境，提取液先濃縮，然后用乙酸乙酯溶解，再用稀HCl反萃取，達到除去脂肪的目的，調(diào)節(jié)pH值之后用SCX固相萃取柱來凈化，洗脫液先用氮氣吹干，再用雙三甲基硅基三氟乙酰氨衍生，采用外標法來定量，選擇離子模式進行測定。鹽酸克倫特羅的檢出限是0.30g/kg，添加濃度1.0～5.0ng/kg，回收率77.4%～88.3%，相對標準偏差3.1%～5.1%，衍生物的峰面積與被測物的濃度在 0.003～1.00mg/L 范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系，線性回歸系數(shù)大于0.999。

1.3 膠體金免疫法

姜艷彬等以膠體金標記鹽酸克倫特羅單克隆抗體競爭性膜層析技術制成了豬尿液中鹽酸克倫特羅殘留檢測的快速檢測試紙，它能快速、簡便地檢測出豬尿中的鹽酸克倫特羅，如待測尿樣中無鹽酸克倫特羅，金標抗體便能與固相載體結合，形成紅色帶，如待測尿樣中含鹽酸克倫特羅，它與金標抗體一樣可以和固相載體結合，占去了金標抗體和固相載體結合的可能性，導致金標抗體和固相載體結合量大大減少，形成不了紅色帶;經(jīng)試驗制成了可檢測出豬尿樣中鹽酸克倫特羅濃度為2ng/mL的試紙條，可在8min內(nèi)完成測試，肉眼便可判斷，試紙條使用不需任何的儀器設備，能在現(xiàn)場快速檢測和篩選，靈敏度滿足臨床使用要求。

1.4 酶聯(lián)免疫法

ELISA法檢測“瘦肉精”是目前國內(nèi)普遍使用的檢測方法之一。其原理是利用抗原抗體反應：加入特定的“瘦肉精”抗體之后，它會與捕獲抗體結合，如果樣品中有 -興奮劑，將與特定“瘦肉精”的酶連接物相互競爭捕獲抗體的連接位點，在洗板過程中，沒有連接的酶連接物會被除去，加入標準品、樣品溶液、酶連接物之后，經(jīng)過孵育、洗板，將底物（發(fā)色劑）轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色的產(chǎn)物，加入終止液后，顏色從藍色變?yōu)辄S色。顯示的顏色越淺，“瘦肉精”含量越高，測量在450nm 處進行，樣品中-興奮劑的濃度與吸光度成反比。

1.5 綜合化學法

根據(jù)“瘦肉精”的化學結構與性質(zhì)進行綜合鑒別主要是參照國家藥典標準方法。由于“瘦肉精”溶于水、乙醇，可以用水對其進行提取。“瘦肉精”可以顯示芳香第一胺類、氯化物的鑒別反應，用分光光度計檢測，最大吸收波長244～295nm。綜合分析能定性確定肉制品中是否存在“瘦肉精”類物質(zhì)，它不需要昂貴的試劑、儀器，操作簡單，沒有復雜處理過程，是基層動物檢疫工作者初查“瘦肉精”類物質(zhì)殘留的有效方法，但靈敏度和最低檢測限不是很理想。

2 展望

當前，造成鹽酸克倫特羅屢禁不止的原因之一就是國內(nèi)外檢測方法、手段還不完善，還沒有建立宰前（毛、尿液）監(jiān)測體系和準確、迅速、方便、精確的檢測方法，從成本現(xiàn)場檢測設備簡便基層同步篩選法檢測（試紙條法、試劑盒法）優(yōu)點是操作簡單、時間短、成本低，適合在現(xiàn)場進行大量樣品的快速篩查，但結果受環(huán)境、溫度等因素影響大，容易出現(xiàn)“假陽性”，因此試紙條法和試劑盒法檢測結果不能直接作為執(zhí)法依據(jù)。確證法檢測采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等大型高精尖儀器設備，優(yōu)點是靈敏度高、準確性好，結果可作為執(zhí)法依據(jù)，但此類儀器設備非常昂貴，環(huán)境要求極高，檢測周期較長，不適用于基層和現(xiàn)場檢測。因此，國內(nèi)外檢測鹽酸克倫特羅等“瘦肉精”藥物通行做法是“先篩選后確證”，以確證法的結果作為監(jiān)管執(zhí)法的依據(jù)，這樣既節(jié)約了成本，又不會誤判。

參考文獻

[1] 史建國，邵秀芝.競爭酶聯(lián)免疫吸附法測定豬肉中的鹽酸克倫特羅的研究[J].肉類工業(yè)，2005，25（8）：20-22.

[2] 農(nóng)業(yè)部.動物性食品中獸藥最高殘留限量[Z].農(nóng)牧發(fā)[1997]7 號.北京：農(nóng)業(yè)部，1997-09-04.

[3] 農(nóng)業(yè)部. 中華人民共和國動物及動物源食品中殘留物質(zhì)監(jiān)控計劃[Z].農(nóng)牧發(fā)[1998]8 號.北京：農(nóng)業(yè)部，1998-05-11.

作者簡介：陳明星，男，漢族，副教授，碩士學位，研究方向：食品科學。