蜂蜜作為藥用輔料應用及質量控制的研究概述

郝博，曹歡，鹿擴建，筆雪艷,*，張清波

(1.國家藥典委員會，北京 100061；2.黑龍江省藥品檢驗研究中心，黑龍江 哈爾濱 150088；3.黑龍江中醫藥大學， 黑龍江 哈爾濱 150040；4.黑龍江省藥品評價和風險監測中心，黑龍江 哈爾濱 150001)

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜或蜜露釀蜜而成的天然甜性物質，蜂蜜作為藥用在我國第一部本草著作《神農本草經》中就有記載，列為上品[1-2]。2015年版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱“《中國藥典》”)把蜂蜜作為一味中藥單列于一部中，其功能與主治[3]記載為：“補中，潤燥，止痛，解毒；外用生肌斂瘡。用于脘腹虛痛，肺燥干咳，腸燥便秘，解烏頭類藥毒；外治瘡瘍不斂，水火燙傷。”現代藥理學研究也表明，蜂蜜具有潤腸通便[4]、促進創面愈合[5]、抗炎[6]、抑菌殺菌[7]、抗氧化[8-9]、抗潰瘍[10]、抗腫瘤[11-13]等多種生物醫藥功效。因此，由于具有極佳的營養保健和藥用價值，蜂蜜無論是在食品領域，還是在醫藥領域都得到了廣泛的應用，既是老幼皆宜的營養滋補品與飲食調味品，又是醫家的良藥和中藥制劑、炮制中重要的藥用輔料[14]。近年來，國內外學者對蜂蜜的研究多專注于蜂蜜的藥理作用、臨床應用及在食品行業的應用等方面，但是蜂蜜作為藥用輔料及其在中藥炮制中的作用研究較少。本文從蜂蜜的化學成分、作為藥用輔料在炮制和制劑中的應用及其質量控制檢測方法等方面進行較詳細的論述，以期為蜂蜜更深入的研究和其藥用質量的標準化規范化提供參考。

1 蜂蜜的化學成分

蜂蜜中含有豐富的化學成分，現已明確的成分種類有20余種。其中糖類成分在蜂蜜中占了75%，水分含量在16%～25%，蛋白質含量平均為0.16%，其他種類成分還包括酶類、維生素、有機酸、多酚類物質、色素、生物堿、激素、礦物質和微量元素等[15-18]。

1.1 糖類成分

蜂蜜中的糖類成分以還原糖為主，主要為花蜜中的蔗糖，占蜂蜜總成分的65%以上。糖類成分還有果糖、葡萄糖、麥芽糖、曲二糖、松三糖、綿子糖、黑曲霉糖、海藻糖等[19]。糖類賦予蜂蜜甜味、吸濕性和觸變性等特性，這為蜂蜜發揮多種藥效作用奠定了重要的基礎。

1.2 酶類成分

蜂蜜中含有多種對人體有益的酶類，其中所含的淀粉酶和蔗糖酶利于機體對糖類成分的吸收，葡萄糖轉化酶可以直接參與機體的物質代謝、能量轉化，過氧化氫酶具有抗氧化作用，可以延緩機體衰老、防止癌變[20]。

1.3 維生素、酸類成分

蜂蜜中含有維生素B1、維生素B2、維生素B6等B族維生素、維生素C、葉酸和煙酸等多種人體所必需的維生素。蜂蜜中的酸類成分包括有機酸、無機酸和氨基酸，有機酸主要以檸檬酸和葡萄糖酸為主；無機酸包括磷酸、碳酸、硼酸等；氨基酸主要包含精氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、組氨酸等蛋白質類氨基酸和鳥氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸等非蛋白質類氨基酸[1,21]。

1.4 其他類有益成分

蜂蜜中還含有一定量的鉀(K)、鈣(Ca)、銅(Cu)、鎂(Mg)、磷(P)等礦物質元素，且含量與人體血液中同類礦物質含量相似，利于其吸收，具有很好的保健功能，比如蜂蜜中的鉀(K)元素被機體吸收后置換鈉(Na)的功能，可以維持體液的電解質平衡，這對高血壓病人起到很好的保健作用[22,14]。此外，蜂蜜中還含有抗氧化劑、黃酮類、類胡蘿卜素衍生物、一氧化氮代謝物、多酚類物質、蛋白質、花粉、色素、蠟質、揮發性成分、抗菌物質等生物活性物質，在蜂蜜的功效中發揮著重要的作用[23-24]。

1.5 有害成分

蜂蜜中除了含有眾多對人體有益的成分外，還可能因為蜜蜂采食有毒蜜源植物的花蜜或蜜露而引入對人體有毒有害的次生代謝產物，這類植物源性毒性成分主要是生物堿類和萜類化合物，如吡咯里西啶類生物堿、吲哚類生物堿、異喹啉類生物堿等和雙環倍半萜內酯類化合物、二萜類成分等。植物源性毒性成分的存在，對蜂蜜的質量品質與人體的健康安全構成了潛在的威脅。目前，國內外對蜂蜜中該類成分的研究報道還不是很多，因此應該加大對該類植物源性毒性成分的研究，探索和發展其有效的檢測和控制方法，以期制定出該類成分有效控制的標準，使蜂蜜的生產和使用更加安全可控[25]。

另外，蜂蜜在貯存和加工過程中，其中的還原糖還可能經加熱脫水產生一種具有難聞氣味的黑色物質5-羥甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural，5-HMF)。人體大量吸入5-HMF會導致橫紋肌麻痹、內臟損傷，并有潛在的致癌作用[26]。因此，2015年版《中國藥典》對蜂蜜中的5-羥甲基糠醛的含量進行限定，規定不得超過0.004%[3]。

2 蜂蜜作為藥用輔料在炮制及制劑中的應用

蜂蜜除了是老幼皆宜的滋補營養品、飲食調味品和中藥中的一味補益藥外，還是中藥制劑、中藥炮制中應用廣泛的藥用輔料。蜜制，是中藥炮制中涉及品種和方法較多的液體輔料制法之一。中藥蜂蜜的質量規范化研究，對保證蜂蜜的藥用和中藥制劑、炮制的質量具有重要意義。蜂蜜在中藥炮制及制劑中主要有以下幾個方面的應用。

2.1 中藥炮制工藝中的應用

蜜炙法是以蜂蜜(多為煉蜜)為輔料的傳統中藥炮制技術之一，南北朝時期的《雷公炮炙論》中首次提出了蜂蜜的煉制程度，經后人不斷傳承創新，去糟存精才保留了現代的蜜炙法。其炮制目的是使蜂蜜滲入藥材或飲片組織內部，以改變藥性，增強療效、減緩藥性或減少毒副作用等。如蜜炙黃芪，可增加黃芪補中益氣的功效；蜜炙百部、款冬花可增強其潤肺止咳作用；麻黃若生用，其發汗作用峻猛，蜜炙后則可緩其發汗力，增強止咳平喘功效，還能矯味避免嘔吐[27-30]。此外，蜂蜜中的糖類可以增加苷元的溶解度而有利于其吸收，其中的還原糖還能抑制藥材中有效成分的氧化，進一步保證藥材的質量。總之，蜂蜜能和百藥、養脾氣、消心煩、去膈上痰，蜜炙作用基于蜜藥配伍思想，以以證用蜜、定量用蜜為基本特點[14]。

2.2 中藥口服制劑中的應用

由于中藥成分及性味復雜，通常顯苦澀味，病患直接服用不易接受，依從性差。蜂蜜的甜度與同重量的蔗糖大致相同，但口感及穩定性相對提高。蜂蜜中的還原糖，不僅具抗氧劑的作用，而且相對密度大，對液體劑型來說既有懸浮作用，又可提高澄明度，減少沉淀，并可調和諸藥，故常作矯味劑用于中藥口服液的制劑，以改善口服制劑口感，提高患者的治療依從性。此外在藥食同源類具有功能性中藥口服制劑中，蜂蜜不僅具有矯味作用，也具有一定營養藥效價值[31]。

2.3 中藥丸劑中的應用

蜂蜜中含有大量的糖類，不僅味甜，而且粘性較強，因而具有粘合、助丸成型的作用。尤其是蜂蜜加熱煉制后，與藥粉混合制丸，操作簡便，丸粒光潔、滋潤、崩解緩慢、作用持久，是一種良好的粘合劑，如用于消食健脾的大山楂丸中就有蜂蜜作輔料的應用等。水丸用蜂蜜包衣，取蜂蜜止痛、解毒、調和諸藥以及矯味、抗氧化等作用[32-33]。不同類型的丸劑對于煉蜜的程度要求不同，嫩蜜適于粘性較強的藥材制丸，老蜜則適于粘性差的礦物質或纖維質藥材制丸[34]。由于煉蜜需要加熱，容易破壞蜂蜜中的維生素、酶等活性物質，且蜜丸用蜜量較大，吸潮性強，易霉變及受到工藝設備污染。因此，蜜丸的質量控制應該得到重視，作為輔料的蜂蜜的質量控制更應該得到重視[35-37]。

2.4 中藥片劑中的應用

中藥片劑常見的粘合劑有淀粉、糖漿、糊精等，雖在使用時各起到一定的作用，但總體效果不是很理想。若在片劑中加入適量蜂蜜，既可保留淀粉、糖漿的優點，還能改善糊精粘性差的缺點，可以說蜂蜜作為片劑的粘合劑是集百家之長。蜂蜜在片劑制備過程中起到了粘合、潤濕、崩解、潤滑的綜合作用，從而可作為中藥片劑生產中的一種良好的粘合劑[38]。

2.5 其它制劑中的應用

蜂蜜因其天然的抗菌、消炎作用，輔助成方在中藥外用制劑中也有廣泛的應用，多用于治療因外傷或內源性病變等引起的皮膚創面的愈合、外感熱邪，虛火內生所致的口腔潰瘍，臨床常將蜂蜜混于中藥膏中，起到消炎止痛、滋潤、防腐、保護創面等輔助治療作用[39]。此外，蜂蜜中的微量鋅元素可以延緩角膜潰瘍穿孔，增強體液和細胞免疫功能，廣泛應用于角膜炎、干眼癥及其它眼科疾病的輔助治療，眼科臨床上輔以蜂蜜的治療效果明顯優于單用眼用制劑[40-41]。

蜂蜜作為藥用輔料在2015年版《中國藥典》中的應用情況見表1，從表1可以看出，在《中國藥典》中蜂蜜作為藥用輔料得到了廣泛的應用，因此，蜂蜜作為藥用輔料的應用及其質量標準和控制方面的研究應該得到重視。

表1 蜂蜜在2015年版《中國藥典》中作為藥用輔料的應用情況

3 蜂蜜質量控制常用的檢測分析方法

蜂蜜的化學成分復雜多樣，其中糖類為其主要成分，因此糖類化合物的相對含量也就成為了評價蜂蜜質量好壞、對蜂蜜質量控制的主要考察指標，我國首個蜂蜜國家強制性標準GB 18796-2005于2006年正式實施，蜂蜜中果糖、葡萄糖總糖量應達到 60% 以上[42]，后期在標準中相繼出現蜂蜜的蜜源、感官特征、污染物、農獸藥殘留等的標準規定[43]。2015年版《中國藥典》中采用HPLC法測定蜂蜜中果糖和葡萄糖的總量，規定不得少于60.0%，且規定果糖與葡萄糖含量比值不得小于1.0 ；并規定了5-羥甲基糠醛、蔗糖和麥芽糖的含量限度[3]。與國外蜂蜜標準相比較，我國蜂蜜標準中許多檢測指標的限量限定的標準均高于國外標準；并且與國際上相比，我國增加了蜂蜜在生產、流通、包裝和銷售過程中的相關法律法規，這大大保證了我國蜂蜜的品質與質量[44-45]。

蜂蜜質量控制常用的檢測方法是多種多樣的，主要有化學法、氣相色譜法、液相色譜示差折光檢測法、離子色譜脈沖安培法等[46,26]。但由于化學法步驟繁多、操作復雜、選擇性差、誤差較大，不利于人們判斷蜂蜜質量的優劣；氣相色譜法則由于糖為非揮發性物質，需要進行衍生處理，操作繁瑣。因此，近年來學者對蜂蜜的成分測定方法較為關注，許多新方法也相繼誕生，給蜂蜜的質量控制帶來了新的方向和手段。現對近年來蜂蜜質量控制檢測的新方法進行簡要介紹。

3.1 半透膜滲析法

膜技術在現代分離方面的應用較廣，由于其具有不破壞樣品成分、簡單易控制的優勢，多用于分離復雜化合物。馮立彬等[17]采用半透膜滲析法將蜂蜜中的糖類進行分離，然后用硫酸-酚法測定總糖的含量，再測定蜂蜜水解前后的旋光度值，通過數學計算分別得到蔗糖、葡萄糖和果糖的含量，為蜂蜜的質量控制研究提供了一種簡單可行的方法。

3.2 紅外光譜法

紅外光譜技術在蜂蜜質量控制中應用較晚，但發展迅速。在20世紀90年代中期，國外研究人員初步將傅里葉變換光譜技術用于蜂蜜的分類和鑒別，以及區分摻假蜂蜜，為蜂蜜質量控制技術提供新的方法和思路[47-49]。紅外光譜分析研究表明，不同品種的純蜂蜜紅外光譜特征基本一致，而摻假蜂蜜的紅外光譜在波數1 200～900 cm-1和波數600～400 cm-1區間特征與純蜂蜜有較大的差異，可以用來鑒別蜂蜜的真偽[50]；而且還表明在波數1 200～900 cm-1間的峰形和峰強度變化與摻入的蔗糖或葡萄糖的含量相關，且具有一定的變化規律，可以用來快速判斷摻假蜂蜜中摻入的蔗糖或葡萄糖的大致含量[51]。由于紅外光譜儀不適用于微量成分分析，反映蜂蜜品種差別的特征性成分含量少，以及不同品種蜂蜜之間所含的主要成分如糖、水分含量差異不明顯，水分中含有氫鍵，對其他成分的紅外吸收影響很大等因素，因此還需進一步改善分析方法和數據處理技術，提高準確度和精密度，協調并驗證該方法是否適用于所有商品蜂蜜種類的鑒定[52]。

3.3 紫外分光光度法

楊文菊等[53]利用濃鹽酸使蜂蜜發生脫水反應，采用紫外分光光度法于286 nm處直接測定蜂蜜中總糖的吸光度，在0～30 mg/L的范圍內總糖的濃度與吸光度呈現良好的線性關系(r=0.999 3，n=5)，平均回收率為103% (RSD%=5.5，n=5)，總糖的含量為41.97%(RSD%=3.16，n=5)，該法使得蜂蜜中的含糖量檢測變得簡便、準確，但是只能適用于蜂蜜中總糖的含量測定，對于單成分的檢測還存在問題。

阿布都拉·艾尼瓦爾[54]等采用紫外分光光度法測定蜂蜜中土霉素和鹽酸金霉素的含量，結果土霉素和鹽酸金霉素分別在364 nm和319 nm波長處有最大吸收，在0.56～6.72 g/mL和1.03～20.60 g/mL濃度范圍內有很好的線性關系，線性方程良好，該方法操作簡單，重現性好，可準確用于蜂蜜樣品中土霉素和鹽酸金霉素含量的測定，結果可靠。還有學者[55]利用紫外分光光度法測定蜂蜜中溶菌酶的含量，所建立的方法簡便、結果準確，可作為蜂蜜的質量評價方法之一。

3.4 高效液相色譜法

隨著科技的發展進步，高效液相色譜法(HPLC)在蜂蜜中所含成分的定性定量的檢測方面越來越普及。林長欽等[56]對高效液相色譜示差折光檢測法測定蜂蜜中糖類組分的方法進行了研究，結果表明：采用純水對蜂蜜進行溶解，安全快捷，經濟簡便，得到的樣品溶液穩定性高，測試結果的重現性好，加標回收率為98.9%～102.9%，相對偏差為0%～2.42%，方法簡便、安全、快捷、可行。此外，謝強勝和張其安等[57-58]分別采用高效液相色譜法及高效液相色譜-熒光檢測法測定蜂蜜中果糖、葡萄糖、麥芽糖等含量，結果表明兩個檢測方法簡單可行，且顯示不同批次樣品含量存在明顯差異，且有蜂蜜替代現象。孫蘭鳳[59]等建立了HPLC切換波長同時測定蜂蜜典型黃酮類和酚酸類物質的方法，結果方法靈敏度高，重現性好，通過檢測黃酮和酚酸，可以判斷蜂蜜的真假。張小芳[60]等建立了用高效液相色譜同時測定蜂蜜中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜、檸檬黃、日落黃、胭脂紅、莧菜紅和脫氫乙酸等添加劑的方法。

3.5 其他方法

近年來，國內外學者除了對蜂蜜中主要營養成分檢測方法研究以外，還對蜂蜜中摻雜、摻假以及農藥殘留、抗生素殘留、有害元素殘留等檢測方法進行了研究。陳蘭珍等[61]應用 ICP-MS 測定不同種類蜂蜜中的微量元素和重金屬，各種蜂蜜中重金屬的含量較少，As、Pb含量在30 ng·g-1以下，Hg、Cd和Cr含量更低，在10 ng·g-1以下，且品種間差別不大。周星和鄭永權[62-63]采用氣相色譜法分別測定蜂蜜中殺蟲脒和雙甲脒經殘留量，測定結果較好。楊慧元等[64]建立測定蜂蜜中大觀霉素、潮霉素B、鏈霉素、雙氫鏈霉素和阿米卡星等 5 種氨基糖苷類藥物殘留量的液相色譜-串聯質譜法，方法具有準確、高效性。特別指出的是，蜂蜜質量控制的檢測方法正朝著集約化、智能化的方向發展，HPLC-MS、GS-MS、UPLC-MS、UPLC-MS/MS、HPLC-NMR等聯用技術[65-70]正快速發展，使得檢測方法的準確度、精密度、靈敏度更高、選擇性更好、分析速度更快，這對確保蜂蜜的質量安全、品質可靠起到了舉足輕重的作用。

4 討論

蜂蜜作為天然的營養物質和醫家良藥，含有豐富的化學成分和營養物質，具有多種生物學功效和生理調節功能，在食品和醫藥領域具有廣泛的應用。隨著社會的發展進步，人們對蜂蜜的需求量越來越大，對蜂蜜的品質要求越來越高。因此，《中國藥典》中有關蜂蜜的標準也在與時俱進、不斷提高。但現行的2015年版《中國藥典》中蜂蜜的標準對蜂蜜中的農藥殘留、重金屬及有害元素檢查、抗生素殘留、植物源性毒性成分等內容尚未涉及，因此有待于進一步研究、完善和提高；另外，蜂蜜也是中藥炮制及制劑的重要輔料，蜂蜜品質的優劣也成為輔料研究的熱點，但是由于蜂蜜的產地不同、種類差異等會造成蜂蜜所含成分的差異，且蜜炙法中用的煉蜜，目前也沒有統一的煉制工藝，煉蜜成品也無內在質量標準，這些都是目前亟待解決的問題。因此，筆者認為應該加大對蜂蜜的研究力度，創新理念，充分利用現代先進的分離分析技術和檢驗檢測手段，推動蜂蜜的藥用質量標準的全面提升，以全面保證蜂蜜的質量和安全。