異甘草酸鎂治療慢性乙型肝炎重度患者外周血TregTh17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子水平變化*

詹愛琴，陳春麗，朱慶峰，李冰潔，左維澤，盧麗君

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是臨床治療中常見的慢性傳染性疾病，系因感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)所引發(fā)的疾病[1]。研究表明[2]，HBV感染會(huì)刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)激活，導(dǎo)致肝臟炎癥損傷，而免疫功能紊亂則進(jìn)一步促進(jìn)HBV復(fù)制。CHB患者體內(nèi)存在的腸源性內(nèi)毒素血癥可引起調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞和輔助性T淋巴細(xì)胞Th17(Treg/Th17)失衡，進(jìn)一步加重病情，增加臨床治療的難度。抗病毒和護(hù)肝是臨床治療CHB的主要方案，但部分患者接受抗病毒治療后病情并未得到控制，抑制炎癥反應(yīng)對(duì)治療慢性乙型肝炎有積極的作用[3]。隨著研究的不斷深入，有學(xué)者指出異甘草酸鎂具有較好的抗炎、保護(hù)肝細(xì)胞和改善肝功能作用[4]。本研究觀察了異甘草酸鎂治療慢性乙型肝炎患者外周血Treg/Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子水平的變化，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017年10月～2018年9月我院診治的慢性乙型肝炎患者80例，男44例，女36例；年齡為35～65歲，平均年齡為(49.2±4.89)歲。符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)會(huì)和感染病學(xué)會(huì)于2015年修訂的《慢性乙型肝炎防防治指南》[5]的標(biāo)準(zhǔn)，納入患者血清HBsAg陽性大于6個(gè)月，近半年內(nèi)未接受過免疫調(diào)節(jié)劑治療，未合并其他嚴(yán)重的疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他病毒性肝炎、肝衰竭、肝硬化或肝癌、合并自身免疫性疾病或近3個(gè)月內(nèi)接受過核苷(酸)類藥物治療、合并其他惡性腫瘤或免疫功能障礙或?qū)Ρ狙芯克幬镞^敏者。將患者分成兩組，兩組一般資料比較，無顯著性差異(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)同意，患者簽署知情同意書。

1.2 治療方法 給予對(duì)照組還原型谷胱甘肽(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20101021)1.2加入5%葡萄糖溶液500 ml中靜脈滴注，1次/d，恩替卡韋(江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20100313)0.5 mg口服，1次/d；觀察組在此基礎(chǔ)上聯(lián)合異甘草酸鎂(天晴甘美，江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20051942)150 mg加入5%葡萄糖溶液250 ml中靜脈滴注，1次/d。兩組均治療30 d。

1.3 觀察指標(biāo) 常規(guī)檢測(cè)血生化和病毒指標(biāo)；采用ELISA法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、IL-10和IL-2(上海科華生物技術(shù)公司)；使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血T細(xì)胞亞群、Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞百分比及Treg/Th17比值(德國(guó)Partec公司)。

2 結(jié)果

2.1 兩組肝功能指標(biāo)比較 治療前，兩組肝功能指標(biāo)無顯著性差異(P>0.05)；在治療30天末，觀察組血清ALT、AST和TBIL水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表1)。

表1 兩組肝功能指標(biāo)比較

2.2 兩組血清細(xì)胞因子水平比較 治療前，兩組血清細(xì)胞因子水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，觀察組血清TNF-α、IL-4和IL-10水平顯著低于，而血清IL-2水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表2)。

表2 兩組血清細(xì)胞因子水平比較

2.3 兩組外周血Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞百分比及Treg/Th17比值比較 治療前，兩組外周血Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞百分比及Treg/Th17比值比較，無顯著差異(P>0.05)；治療后，兩組Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞百分比及Treng/Th17比值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表3)。

表3 兩組外周血Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞百分比及Treg/Th17比值比較

2.4 兩組外周血T細(xì)胞亞群比較 治療前，兩組外周血T細(xì)胞亞群比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；治療后，兩組外周血淋巴細(xì)胞亞群變化比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表4)。

表4 兩組外周血T細(xì)胞亞群比較

2.5 疾病轉(zhuǎn)歸 在治療30天末，觀察組有45例(90.0%)患者病情好轉(zhuǎn)，顯著高于對(duì)照組的21例(70.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

慢性乙型肝炎為肝臟常見疾病，病程遷延漫長(zhǎng)，感染性強(qiáng)，呈世界流行，全世界大約1/3的人口曾感染過HBV，其中大約4億人為慢性HBV感染，治療難度大[6]。抗病毒、抗炎是治療慢性乙型肝炎的重要手段，旨在抑制HBV復(fù)制，改善肝組織壞死炎癥，促進(jìn)肝臟功能恢復(fù)，避免出現(xiàn)并發(fā)癥[7]。

天晴甘美為第四代甘草酸制劑，是一種純度高達(dá)99%的手性藥物，以靜脈滴注的方式給藥，對(duì)肝臟損傷小，且治療作用大，可快速作用于機(jī)體，發(fā)揮抗炎、抗生物氧化、解毒等多種作用，是一種多功能肝細(xì)胞保護(hù)藥物[8]。研究表明[9]，天晴甘美在治療慢性乙型肝炎過程中效果確切，能夠有效改善患者肝功能，有助于肝細(xì)胞恢復(fù)及再生，抑制肝臟纖維化發(fā)展，加速黃疸消退。Treg與Th17均有CD4+T淋巴細(xì)胞分化而來，兩者的分化途徑具有可逆性，其免疫功能也呈互反的調(diào)節(jié)作用[10]。Treg具有免疫抑制作用，F(xiàn)xops是Treg的特異性免疫標(biāo)志，在調(diào)控其生長(zhǎng)發(fā)育和分化發(fā)揮重要作用。Th17在慢性乙型肝炎患者發(fā)病過程中發(fā)揮促炎作用，并促進(jìn)HBV感染引起肝損傷，導(dǎo)致Treg/Th17比值異常升高[11]。國(guó)外研究表明[12]，Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞參與慢性乙型肝炎患者的病理學(xué)發(fā)病過程，且隨著疾病的發(fā)展，其動(dòng)態(tài)平衡不斷發(fā)生變化。本研究對(duì)比分析了慢性乙型肝炎患者外周血細(xì)胞Treg和Th17細(xì)胞百分比，結(jié)果表明天晴甘美治療后患者Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞百分比及Treg/Th17比值均下降，且明顯低于常規(guī)治療患者，表明天晴甘美可促進(jìn)疾病轉(zhuǎn)歸。

資料表明[13]，天晴甘美具有較高的肝臟靶向性，在肝臟組織內(nèi)能夠快速與5β還原酶競(jìng)爭(zhēng)，從而抑制皮質(zhì)醇的滅活。藥理研究表明[14]，天晴甘美能夠有效阻止動(dòng)物機(jī)體內(nèi)血清轉(zhuǎn)氨酶升高，減輕肝細(xì)胞破壞，對(duì)大鼠四氯化碳所導(dǎo)致的肝損傷具有明顯的保護(hù)作用，促進(jìn)肝細(xì)胞再生。本研究觀察了天晴甘美對(duì)肝功能的影響，結(jié)果表明，治療后患者的肝功能指標(biāo)AST、ALT、TbiL均得到明顯改善，且效果優(yōu)于常規(guī)治療患者，分析原因?yàn)樘烨绺拭揽捎行柰?xì)膽管，促進(jìn)膽汁排泄，增加膽汁流速，促進(jìn)轉(zhuǎn)氨酶的下降，為抑制慢性肝炎疾病進(jìn)展，控制HBV感染引起炎癥進(jìn)一步反應(yīng)是臨床治療的關(guān)鍵所在。TNF-α是調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的促炎細(xì)胞因子，由淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞分泌而來，參與機(jī)體多種炎癥反應(yīng)[15]。IL-10是強(qiáng)免疫抑制因子，具有多向性生物學(xué)活性，對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答發(fā)揮抑制作用，降低機(jī)體HBV能力[16]。IL-2是調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子，借助T細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)分化NK細(xì)胞，保護(hù)機(jī)體免疫功能正常。IL-4具有較強(qiáng)的促炎作用，可加劇機(jī)體炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致Th2/Th1細(xì)胞失衡，發(fā)生病變[17-19]。本結(jié)果證實(shí)，天晴甘美治療后患者TNF-α、IL-10、IL-4、IL-2明顯低于常規(guī)治療患者，表明天晴甘美通過抑制慢性乙型肝炎患者體內(nèi)炎性因子活性，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)發(fā)生。