HSP70 TNF-α IL-4 與妊娠期高血壓患者體液免疫的關系研究

王 影， 洪海漫， 孟 斐

(沈陽醫學院附屬中心醫院產科, 遼寧 沈陽 110024)

妊娠期高血壓是指妊娠期出現的高血壓，主要表現為蛋白尿、水腫以及多器官損傷，且多數患者可在分娩后血壓恢復正常，該病存在一定的地區差異，國外報道發生率為7～10%，而我國內陸地區為9%，高原地區為20%[1]。該病對母嬰健康安全造成了較大的影響，是造成孕產婦和圍產兒死亡的重要原因[2]。據WHO調查指出，妊娠期高血壓在孕產婦死亡中的比重為15%。目前臨床仍未明確該病的發生機制，但是多數學者認為遺傳因素、免疫反應、氧化應激反應以及胰島素抵抗在該病的發生中起到了重要的作用[3]。熱休克蛋白70(HSP70)是熱休克蛋白家族中含量最多且表達水平最高的應激蛋白，當機體出現感染、損傷以及缺血缺氧等情況時都可引起HSP70表達水平的升高。腫瘤壞死因子(TNF)是一種能夠殺傷腫瘤細胞且對正常細胞無影響的細胞因子，是目前臨床醫學中發現腫瘤殺傷效果最強的生物活性因子之一，最常見的為TNF-α和TNF-β這兩種類型[4]。TNF-α主要是由巨噬細胞分泌，起到調節免疫細胞的效果，可引起細胞凋亡，阻礙腫瘤生長和病毒復制[5]。白細胞介素-4(IL-4)是由活化T細胞產生的細胞因子，對于B細胞、T細胞、肥大細胞、巨噬細胞具有免疫調節的作用。本研究選取2016年12月至2019年6月108例醫院收治妊娠期高血壓患者和108例正常妊娠孕婦，分析HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的關系，報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料:選取2016年12月至2019年6月108例醫院收治妊娠期高血壓患者作為觀察組。納入標準：①均符合《婦產科學》中關于妊娠期高血壓的診斷標準；②均知情同意；③既往無糖尿病、高血壓病史；④年齡均>20歲；⑤溝通、交流能力正常；⑥意思清醒，可配合研究。排除標準：①高血壓家族遺傳史；②嚴重肝腎功能異常；③合并心血管疾病；④合并自身免疫性疾病；⑤合并惡性腫瘤；⑥一般狀況較差者。觀察組患者年齡為22～35歲，平均為(28.6±3.5)歲；孕周為20～36周，平均為(32.6±2.6)周。另外選取同時期108例正常妊娠孕婦作為對照組，年齡為21～34歲，平均為(28.3±4.1)歲；孕周為21～37周，平均為(33.1±2.4)周，本組所有孕婦經產檢身體各項指標均正常且無家族遺傳病史。本次研究經醫院倫理委員會批準。兩組在一般資料方面的比較差異無統計學意義，具有可比性。

1.2方法:體液免疫指標檢查方法:兩組均空腹采集3mL肘靜脈血于真空采血管，分離血清后3h內使用免疫比濁法進行檢測，采用全自動生化分析儀以及配套試劑盒進行檢測，均嚴格按照儀器及試劑盒說明書進行操作。HSP、TNF-α、IL-4檢測方法:清晨空腹采集3mL靜脈血，1000r/min速率離心5min，放置-80℃冰庫保存。然后采用PCR法和ELISA法測量，使用多功能酶標儀、全自動生化分析儀以及配套試劑盒進行檢測，均嚴格按照儀器及試劑盒說明書進行操作。

1.3觀察指標:觀察兩組患者體液免疫指標以及血清HSP70、TNF-α、IL-4差異，并分析HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關性。

2 結 果

2.1兩組體液免疫指標差異:觀察組C3、C4、IgA、IgG、IgM均明顯低于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組體液免疫指標差異

2.2兩組患者血清HSP70、TNF-α、IL-4水平差異:觀察組患者血清HSP70、TNF-α明顯高于對照組(P<0.05)，且IL-4水平均明顯低于對照組(P<0.05)，見表2。

2.3HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關性分析：分析發現，HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫存在正相關性(P<0.05)，見表3。

表2 兩組患者血清HSP70 TNF-α IL-4水平差異

表3 HSP70 TNF-α IL-4 與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關性分析

3 討 論

妊娠期高血壓是妊娠期常見的并發癥，主要以妊娠期出現高血壓及蛋白尿為主要表現，多數患者分娩后高血壓癥狀自行緩解。但是該病對母嬰健康造成了較大的威脅，可導致胎兒宮內發育遲緩以及孕產婦和圍產兒死亡等不良妊娠結局。因此，引起了婦產科學的關注，近些年來隨著臨床研究的不斷深入，發現遺傳因素、免疫失調、氧化應激反應以及胰島素抵抗與該病的發生有密切的相關性。遺傳因素在妊娠期高血壓發生中具有重要的作用，其具有母系遺傳的特點，有統計學指出，母親存在妊娠期高血壓病史的孕婦其妊娠期高血壓發生風險要明顯高于母親無妊娠期高血壓病史的孕婦[6]。

妊娠是一個特殊的生理過程，從最早的免疫排斥到免疫耐受到最后發展為免疫應答平衡。有研究[7]發現，妊娠期高血壓患者胎盤的蛻膜、絨毛膜、絨毛間質以及血管內皮下存在末端補體復合物異常表達的情況，同時還發現子宮蛻膜淋巴細胞補體表達水平升高的情況，這說明免疫機制在妊娠期高血壓發生中起到了重要的作用。妊娠期高血壓患者的補體系統被激活，從而導致補體裂解產物也產生相應升高趨勢，同時會導致血清補體C3、C5水平下降，這與本次研究結果一致。血清免疫球蛋白以及補體水平反應了人體體液免疫狀況，在健康孕婦中，母體與胎兒處于免疫應答平衡的狀態，而妊娠期高血壓患者可能由于免疫應答失調，從而引發了該病。本次研究中，觀察組C3、C4、IgA、IgG、IgM均明顯低于對照組，這說明妊娠期高血壓患者與健康孕婦相比，體液免疫存在失調的情況，表現為各免疫指標表達水平下降。妊娠期高血壓血清免疫球蛋白復合物增多可引起腎小球功能損傷，因此需要引起臨床醫學的關注。

HSP70是一種具有協同免疫作用的蛋白質，是熱休克蛋白家族中的重要成員，在所有生物應激細胞中均有高度誘導的特征，具有保護機體和細胞的作用。HSP70在正常情況下血清含量較低，當人體出現應激狀態下時出現異常升高趨勢。目前臨床對于熱休克蛋白研究中最多的就是HSP70，正常情況下HSP70主要分布在胞漿中，當熱休克刺激時核內HSP70明顯升高，當細胞處于恢復狀態時，核內HSP70完全消失，但細胞漿內仍存在HSP70。HSP70在細胞中執行的是最基礎的生理功能，例如蛋白質折疊、伸展、運轉、寡聚體形成等，維持細胞的生存和功能，當應激反應發生后，能夠起到提高細胞抵抗力，從而達到應急保護的效果。有研究[8]通過對比輕度妊娠期高血壓患者、中度妊娠期高血壓患者、重度妊娠期高血壓患者的血清HSP70發現，隨著病情嚴重程度的增加，HSP70呈升高趨勢，且與患者的病情程度呈正相關性。本次研究中觀察組患者血清HSP70明顯高于對照組，這說明妊娠期高血壓患者存在高HSP70表達的特征，而健康孕婦血清HSP70水平較低，證實了妊娠期高血壓的形成與應激反應有密切的相關性。由此可見，在妊高癥發生過程中氧化應激反應與起到了重要的作用。

TNF-α作為一種炎性因子，具有介導細胞分化、增殖與凋亡的效果，過度表達將引起疾病的出現。TNF-α與多種免疫性疾病的發生有密切的相關性，例如類風濕性關節炎、惡性腫瘤以及胃炎等[9]。妊娠期高血壓孕婦存在高TNF-α表達的特點，可能是由于基因突變導致患者TNF-α表達水平升高，從而引起了該病的發生，本次研究結果中，在妊娠期高血壓患者胎盤中TNF-α表達水平明顯高于正常孕婦。本次研究中觀察組患者血清TNF-α明顯高于對照組，這說明妊娠期高血壓患者存在TNF-α異常表達的特征。TNF-α主要是由巨噬細胞產生，參與炎癥、細胞凋亡以及血管生成過程，其可根據受體的不同而發揮不同的作用。TNF-α在免疫過程中可導致免疫失衡，引起大量毒性因子表達，從而導致胎盤滋養細胞凋亡，加重胎盤供血不足，并進一步加重TNF-α異常表達，引起血管內皮細胞損傷，導致ET表達水平升高，NO表達水平下降，促使血管收縮，加重了外周血管阻力，從而引起該病的發生。

IL-4能夠刺激B細胞增殖，可有效提高B細胞產生抗原能力，促使免疫系統產生抗原刺激發生免疫應當，同時與B細胞促進IgE產生有密切的相關性。同時其對于Th2細胞具有維持增殖的效果，與IL-1存在協同作用的效果，可維持活化T細胞增殖。IL-4還能夠提高巨噬細胞產生抗原以及殺傷腫瘤細胞的功能，能夠提高中性粒細胞介導的吞噬和殺傷效果，能夠抑制TNF以及IL-6的表達。此外，IL-4還可刺激肥大細胞增殖，與IL-3有協同作用效果。本次觀察組IL-4水平明顯低于對照組，這說明妊娠期高血壓患者血清IL-4表達水平較低。

為了更好的篩查妊娠期高血壓孕婦，從而盡早的進行干預和治療，因此需要通過有效的觀察指標進行檢查。本次通過相關性分析發現，HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫存在密切的相關性，這說明HSP70、TNF-α、IL-4反應了妊娠期高血壓患者體液免疫水平，可以作為臨床篩查指標，從而盡早發現妊娠期高血壓患者，盡早采取有效的干預措施。雖然大部分妊娠期高血壓患者在分娩結束后血壓會恢復正常水平，但是妊娠期高血壓可引起多種不良妊娠結局，例如宮內發育遲緩、產后大出血以及圍產兒死亡等，因此需要對于血壓過高的患者采取降壓治療措施，避免不良妊娠結局的出現。

綜上所述，妊娠期高血壓患者體液免疫水平與HSP70、TNF-α、IL-4存在正相關性，可以通過HSP70、TNF-α、IL-4檢查篩查高危孕婦，從而盡早給予有效的干預措施，保護母嬰健康安全。