急性心肌梗死患者血漿miRNA-423-5p與整合素連接激酶水平表達對評價近期臨床預后的價值

達 晶,張 超,吳紅葵,劉 剛,王文科,孫向陽

（1.寶雞市中心醫(yī)院老年心腦血管病科，陜西寶雞，721000；2.達州市中心醫(yī)院心內科，四川達州 635000）

急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是引發(fā)急性胸痛的主要原因。早期明確診斷與對癥治療有助于降低急性心肌梗死的死亡率[1]。在急性心肌梗死患者中，冠心病、高血壓等易增加急性心肌梗死并發(fā)心力衰竭的可能性，是導致心肌梗死患者死亡的主要原因。miRNA-423-5p屬于單鏈非編碼小分子RNA，具有基因表達可調控性，高度保守性。有研究發(fā)現：miRNA-423-5p能夠參與心肌梗死、心力衰竭、高血壓等多種心血管疾病的發(fā)生與發(fā)展；miRNA-423-5p可作為急性心肌梗死生物標志物，用于疾病診斷與治療，其與急性心肌梗死后心室重構存在密切關聯(lián)性，尤其在急性心肌梗死預后效果預測中具有重要價值[2]。整合素連接激酶屬于Ser/Thr蛋白激酶，位于細胞表面，能夠參與多種信號轉導。整合素連接激酶與心血管疾病發(fā)生與發(fā)展存在密切關聯(lián)性，整合素連接激酶能夠增加血管內皮生長因子的表達，提高心肌梗死周圍微血管密度，以促進血管新生，具有心肌梗死后心臟功能保護作用。miRNA-423-5p與整合素連接激酶與急性心肌梗死之前存在的關聯(lián)性，決定其可成為急性心肌梗死生物學標記物，為早期診斷提供依據[3]。既有研究匯總分析后，miRNA-423-5p，整合素連接激酶在心肌梗死診斷與預后的作用鮮見報道。本研究旨在對miRNA-423-5p，整合素連接激酶在急性心肌梗死近期預后的作用進行分析。

1 材料與方法

1.1 研究對象 將寶雞市中心醫(yī)院老年心腦血管病科2016年1月～2018年1月收治的80例急性心肌梗死患者編入實驗組，同一時期收治的80例穩(wěn)定性心絞痛患者編入對照組。診斷標準：①《急性心肌梗死診斷和治療指南》中規(guī)定的相關診斷標準[1]。②選擇性冠狀動脈造影診斷結果（心絞痛診斷金標準）。納入標準：①經臨床診斷，確診為穩(wěn)定性心絞痛者；②在發(fā)病后12h內成功接收經皮冠狀動脈介入術的急性心肌梗死患者（首次發(fā)作ST段抬高型EMI患者）；③患者知情同意，簽署知情同意協(xié)議，經由醫(yī)院倫理委員會批準者。排除標準：①并發(fā)嚴重肝、腎功能障礙者；②血液疾病、感染、外傷、腦卒中及其他嚴重疾病者；③近期使用激素者；④心律失常者。實驗組男性49例，女性31例，年齡60～83歲，平均年齡67.9±5.4歲。對照組男性48例，女性32例，年齡59～85歲，平均年齡67.8±5.3歲。經檢驗，實驗組與對照組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 儀器與試劑 電子天平（上海臺衡儀器儀表有限公司）；低溫離心機（湖南恒諾儀器設備有限公司）；低速離心機（美國Eppendorf公司）；低溫（超低溫）冰箱（浙江捷盛低溫設備有限公司）；PCR儀（北京麥克奧迪公司）；實時熒光定量PCR試劑盒（銳賽生物）；整合素連接激酶檢測試劑盒（上海滬震實業(yè)有限公司）；BCA蛋白試劑盒（Pierce公司）；標準品溶液；十二烷基硫酸鈉；苯甲基磺酰氟溶液等。

1.3 研究方法

1.3.1 臨床資料采集：采集研究對象臨床資料，包括性別、年齡、既往病史、體重、身高等。記錄研究對象乳酸脫氫酶（LDH），天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、血清肌鈣蛋白I(cTnl)、尿肌紅蛋白（Mb）、心肌酶（CKMB）、左室射血分數（LVEF）、左室舒張末期容量（LVEDV）、左室收縮末期容量（LVESV）和左心室舒張末期內徑（LEVDd）等。

1.3.2 檢測方法與流程：研究實施期間采用的血漿miRNA-423-5p檢測方法為實施熒光定量PCR法[4]。患者在PCI手術實施前后接受心室重構相關指標檢測，檢測期間，檢測探頭的頻率控制在1.7～3.4MHz之間，檢測指標以左心室舒張末期內徑、左心室舒張末期容積、左心室收縮末期容積及左心室射血分數等指標為主。心肌酶譜、cTnl指標、Mb指標及CK-MB指標的檢測工作也以抽血檢測為主，實驗組、對照組同時采血，血液樣本采集完成以后分離血清，進行心電圖記錄，cTnl和Mb檢測的方法以免疫熒光法為主，CK-MB的測定采用酶速率法。整合素連接激酶為局部心肌組織檢測整合素連接激酶，按照試劑盒操作說明書進行操作。在檢驗工作實施期間，相關人員需要根據陽性對照與陰性對照控制試驗條件，出于保證實驗結果的準確性的需要，檢驗期間使用的待檢樣品被分為兩份。根據研究需要，實驗組患者分為高表達組與低表達組。高表達組與低表達組的分組依據為miRNA-423-5p的相對表達量。相對表達量≤0.39的急性心肌梗死患者編入低表達組，相對表達量＞0.39以上的患者編入高表達組。研究期間利用自制生活質量量表，分析患者的生活質量,生活質量評分涉及到環(huán)境維度、社會維度、心理維度及生理維度等方面[4]。

1.3.3 治療方案：對照組為心絞痛患者，采取改善心肌缺血、緩解癥狀、提高生活質量，預防急性心肌梗死的治療方式。實驗組為急性心肌梗死患者，采取擴張冠狀動脈、消除治病的阻塞物，減輕心臟負荷，如：臥床休息＋吸氧。在其接診之后提供經皮冠狀動脈介入治療。

1.4 統(tǒng)計學分析 本次研究數據利用SPSS21.0版統(tǒng)計學軟件進行處理，計量資料用均數±標準差（±s），組間比較采用t檢驗，計數資料以數（n）或率（%）描述統(tǒng)計，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 miRNA-423-5p，心肌酶譜、心肌損傷指標情況比較 見表1。治療前，兩組miRNA-423-5p，心肌酶譜指標、心肌損傷指標比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，實驗組miRNA-423-5P，心肌酶譜指標、心肌損傷指標水平均高于對照組，差均異具有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

表1 實驗組與對照組miRNA-423-5p，心肌酶譜、心肌損傷指標比較（±s）

表1 實驗組與對照組miRNA-423-5p，心肌酶譜、心肌損傷指標比較（±s）

項目 實驗組 對照組 t P miRNA-423-5p表達水平 0.6±0.2 0.3±0.1 12.000 0.000心肌酶譜指標 LDH（U/L） 250.4±1.5 222.3±0.7 43.768 0.000 AST（U/L） 49.4±0.3 40.7±0.7 102.176 0.000 CK（U/L） 210.5±3.2 191.4±1.2 26.433 0.000 ALT（U/L） 60.3±2.1 41.4±4.6 33.430 0.000心肌損傷指標 cTnl（ng/ml） 20.9±14.9 0.2±0.1 12.426 0.000 Mb（ng/ml） 647.4±203.2 24.1±14.3 27.368 0.000 CK-MB（ng/ml） 136.0±42.9 14.1±3.2 57.593 0.000

2.2 整合素連接激酶表達水平 治療前，兩組整合素連接激酶表達水平對比，無顯著差異（P＞0.05）。治療3個月后，對照組的整合素連接激酶表達水平為1.8±0.1，實驗組的整合素連接激酶表達水平為3.2±0.4，實驗組的整合素連接激酶的表達水平高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（t=30.370,P＜0.05）。

2.3 高表達組與低表達組心室重構情況 見表2。治療前，實驗組中高表達組、低表達組的心室重構情況差異無統(tǒng)計學意義（t=0.043～0.468，均P＞0.05）。治療3個月后，高表達組與低表達組LEVD，LVEDV，LVESV，LVEF水平之間對比，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2 高表達組與低表達組LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF水平比較（±s）

表2 高表達組與低表達組LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF水平比較（±s）

項目 高表達組 低表達組 t P LEVDd（mm） 治療前 50.8±1.3 50.7±1.4 0.468 0.640治療后 55.1±1.1 51.0±1.6 14.280 0.000 LVEDV（ml） 治療前 121.65±10.3 120.71±10.4 0.043 0.966治療后 135.72±9.63 123.16±8.37 41.880 0.000 LVESV（ml） 治療前 55.4±7.4 55.3±7.5 0.085 0.932治療后 60.8±6.4 56.1±8.2 4.890 0.000 LVEF（%） 治療前 39.8±4.1 39.7±4.0 0.152 0.880治療后 45.2±2.1 50.1±1.2 12.893 0.000

2.4 生活質量評分 見表3。治療前，兩組患者各項生活質量評分對比，無顯著差異（P＞0.05）；治療后，對照組生活質量評分高于實驗組，比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表3 治療后實驗組與對照組生活質量評分比較（±s）

表3 治療后實驗組與對照組生活質量評分比較（±s）

項目 實驗組 對照組 t P環(huán)境維度 11.4±1.2 18.7±1.8 30.182 0.000社會維度 11.2±0.8 18.6±1.1 48.662 0.000心理維度 12.7±0.9 19.5±1.8 30.222 0.000生理維度 13.2±1.5 19.1±0.4 28.231 0.000

3 討論

miRNA-423-5p為高度保守的單鏈非編碼小分子RNA，能夠參與心肌梗死、心力衰竭、高血壓等多種心血管疾病的發(fā)生與發(fā)展[5-6]。根據既有研究，miRNA-423-5p在急性心力衰竭中有顯著表達[7]。本研究中，實驗組、對照組的miRNA-423-5p表達量存在顯著差異，表明miRNA-423-5p水平與急性心肌梗死之間具有較為密切的聯(lián)系。對照組miRNA-423-5p水平高于實驗組，可能與患者心肌損傷存在密切關聯(lián)性。本次研究證實，miRNA-423-5p表達與心肌損傷程度、心室重構存在類似正相關的關系，患者經治療心肌酶譜指標（LDH，AST，CK，ALT）、心肌損傷指標（cTnl，Mb，CK-MB）改善，心肌功能恢復，缺血壞死心肌細胞減少，可能其釋放的miRNA-423-5p的表達下降[8-9],使得心室重構（LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF）得以改善[10]。根據miRNA-423-5p的變化，可了解急性心肌梗死發(fā)展過程，并對急性心肌梗死預后情況進行評估，miRNA-423-5p的變化反映了心肌梗死的發(fā)展過程。心肌細胞凋亡是急性心肌梗死發(fā)生、發(fā)展的重要基礎，高表達整合素連接激酶有助于改善患者的心功能[11-12]。本次研究中，治療后急性心肌梗死患者的整合素連接激酶表達水平明顯高于穩(wěn)定性心絞痛患者，其原因可能與心室重構過程中出現的心腔內壓力變化相關。整合素連接激酶屬于Ser/Thr蛋白激酶,是位于整合素下游的多功能細胞內信號蛋白，可與整合素β-1，β-3亞單位胞漿區(qū)結合,參與心肌收縮、心臟細胞肥大等多種信號傳導[13]。急性心肌梗死使心肌細胞凋亡，在進行心肌重構過程中，會出現收縮障礙、舒張障礙。整合素連接激酶可通過提高心肌梗死周圍微血管密度，促進血管新生，控制心肌細胞凋亡，進行心臟功能保護[14]。因此，治愈后急性心肌梗死患者整合素連接激酶的表達降低，所以根據整合素連接激酶水平變化，可以判斷患者急性心肌梗死癥狀的發(fā)展趨勢[15]。

本次研究中，對照組的生活質量評分高于實驗組（P＜0.05），表明對照組心室重構情況的變化更能使患者心臟功能得到改善，并讓患者的臨床癥狀得到一定程度的緩解。當患者臨床癥狀緩解后，可以在影響患者生理狀況的過程中，促進患者心理狀況的變化，患者心理情緒變化也會使其在環(huán)境領域及社會領域的評分有所提升，從而改善患者生活質量。隨著患者生活質量評分的變化，患者治療后的生活能力得到一定程度的改善，故而生活質量變化可作患者疾病預后的反映。本次研究而言，觀察治療3個月后指標的變化，時間較短，故而今后需要開展長時間的隨訪研究工作，有待進一步驗證研究結果。

綜上，miRNA-423-5p，整合素連接激酶對急性心肌梗死患者近期預后狀況具有一定的預測價值，可通過miRNA-423-5p，整合素連接激酶水平監(jiān)測，判斷患者的近期預后狀況，并同步調整治療方案，以保障其病情控制效果。