外周血異常糖鏈糖蛋白（TAP）檢測對于腫瘤篩查及早期輔助診斷的意義

岳 丹，王曉輝，付 超，郭林芝，李雪婷

（1.山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)實驗室,太原030000;2.山西白求恩醫(yī)院病理科,太原030000)

據(jù)統(tǒng)計，近幾年我國每年新增腫瘤病例430萬人，新增死亡病例281萬人，腫瘤已經(jīng)成為我國人口死亡的主要原因。由于缺乏有效的腫瘤早期診斷方法，等到發(fā)現(xiàn)時大部分已經(jīng)到中晚期或者發(fā)生擴散轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致治療效果不佳，使得我國腫瘤死亡率升高。因此提高腫瘤的早期診斷、合理有效的篩查腫瘤對于改善腫瘤發(fā)展的現(xiàn)狀具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)正常細胞發(fā)生惡變時，細胞表面的糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生異常改變，從而產(chǎn)生多種異常糖鏈糖蛋白-鈣組蛋白復(fù)合物，統(tǒng)稱為異常糖鏈糖蛋白（tumour abmormal protein,TAP），當(dāng)體內(nèi)的TAP含量達到一定水平時，就能在受檢者的外周血中被檢測出來。國內(nèi)外大量研究已經(jīng)證明TAP與腫瘤細胞的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[1-3]。目前研究發(fā)現(xiàn)TAP檢測能夠用于肺癌[4-5]、肝癌[6-7]、胃癌[8-9]、膀胱癌[10]、食管癌[11]、甲狀腺癌[12]、乳腺癌[13]等多種腫瘤的早期輔助診斷，還可以用于乳腺癌的療效評估[14]和預(yù)后判斷[15]。但是對于TAP檢測在腫瘤廣譜篩查中的應(yīng)用價值還需進一步研究證實。本文通過研究惡性腫瘤患者、癌前病變患者、正常健康體檢者共2 435例受檢者的TAP檢測結(jié)果，進一步探討TAP檢測對于腫瘤篩查及早期輔助診斷的意義，以期指導(dǎo)TAP檢測在健康體檢腫瘤篩查中的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 研究對象 對照組：收集2019年1～9月山西白求恩醫(yī)院體檢中心做過TAP檢測，并且行內(nèi)鏡檢查排除器質(zhì)性病變的健康體檢人員1 763例，其中男性1 089例、女性674例，年齡41～80歲，平均年齡54±10歲。

癌前病變組：收集2019年1～9月山西白求恩醫(yī)院門診及住院部曾行TAP檢測，并通過組織病理學(xué)檢查明確的癌前病變患者293例，根據(jù)2016WHO腫瘤組織學(xué)分類標準，對癌前病變的定義為低級別及高級別上皮內(nèi)瘤變，293例患者包括胃癌癌前病變134例、食管癌癌前病變49例、結(jié)直腸癌癌前病變84例和其他26例，其中男性116例、女性177例，年齡41～80歲，平均年齡52±10歲。

惡性腫瘤組：收集2019年1～9月山西白求恩醫(yī)院腫瘤內(nèi)科曾行TAP檢測，并通過CT，B超、核磁共振、內(nèi)鏡、病理學(xué)明確診斷的惡性腫瘤患者379例，其中肺癌131例、胃癌84例、食管癌59例、結(jié)直腸癌患者76例，卵巢癌14例、胰腺癌患者5例和其他10例，其中男性210例、女性169例，年齡41～80歲，平均年齡50±10歲。

1.2 儀器與試劑 TAP檢測綜合診斷儀和TAP檢測試劑盒均購自浙江瑞生醫(yī)療科技有限公司。

1.3 方法 采集指尖末梢血液2ml，按照要求制成兩張血涂片，放于恒溫恒濕的環(huán)境中干燥10min，將定量的3滴TAP檢測試劑（每滴約50μl）分別滴于血涂片上，待TAP檢測試劑與血液充分反應(yīng)后（2h），將標本置于TAP檢測綜合診斷儀（浙江瑞生醫(yī)療科技有限公司）顯微鏡下，用4倍平陽消色差物鏡觀察，尋找類晶體凝聚物，并用高倍顯微鏡計算凝聚物面積。判定標準：凝聚物面積≥121 μm2為TAP陽性，凝聚物面積0～121 μm2為TAP陰性。TAP檢測過程由山西白求恩醫(yī)院病理科經(jīng)過嚴格培訓(xùn)的檢驗員完成。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件計算TAP檢測對腫瘤輔助診斷的靈敏度（真陽性率）、特異度（真陰性率）、陽性預(yù)測值，三組間TAP陽性率比較和TAP檢測與性別的關(guān)系均采用χ2檢驗，P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組研究對象TAP陽性率比較 見表1。對照組中1 763例健康體檢人群有16例陽性，陽性率為0.9%，293例癌前病變患者中有20例陽性，陽性率為6.8%，而379例惡性腫瘤患者中檢出312例陽性患者,陽性率為82.3%，三組間TAP陽性率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1 703.147，P＜0.001）。

2.2 TAP檢測對腫瘤輔助診斷的靈敏度、特異度等指標評價 TAP檢測對腫瘤輔助診斷的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值分別為89.7%，96.8%，87.3%，覆蓋腫瘤范圍廣。

2.3 TAP陽性表達與性別的關(guān)系 見表1。TAP的陽性率分別在對照組、癌前病變組、惡性腫瘤組中均與性別無關(guān)（χ2=0.333～2.534，均P＞0.05）。

表1 三組中男性和女性TAP陽性率比較[n（%）]

3 討論

腫瘤對我國人口危害的根本原因就是不能夠較早發(fā)現(xiàn)，通過傳統(tǒng)的檢測手段如影像學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)時實體腫瘤已形成，大多為中晚期，不可逆轉(zhuǎn)，這種方法不易于腫瘤早期診斷；腫瘤標志物(tumor markers，TM），由于靈敏度低、特異度低，且有些腫瘤無腫瘤標志物，會出現(xiàn)漏檢、誤檢等現(xiàn)象，在檢查過程中往往需要多種聯(lián)合使用，價格昂貴，造成患者的經(jīng)濟負擔(dān)，臨床應(yīng)用受到限制，因此在臨床上需要一種安全、有效、靈敏度高，能夠用于腫瘤早期篩查的有效方法。

研究發(fā)現(xiàn)，TAP是細胞中癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變后的表達產(chǎn)物[16]，TAP檢測是一種特異性識別“糖鏈”結(jié)構(gòu)，區(qū)別于現(xiàn)有腫瘤標志物的檢測方法，能夠在同一反應(yīng)體系中將多類腫瘤細胞產(chǎn)生的20多種異常糖鏈結(jié)構(gòu)凝聚在一起，一次性檢測出來[17]，操作安全快捷。本研究顯示TAP陽性率在對照組、癌前病變組和惡性腫瘤組這三組間具有明顯差異，惡性腫瘤組最高，癌前病變組次之，對照組最低，表明TAP的表達與腫瘤細胞的產(chǎn)生密切相關(guān)，可以較好地將這三組人群區(qū)分開來，TAP能夠為腫瘤早期輔助診斷提供重要依據(jù)。本研究進一步顯示TAP檢測對腫瘤輔助診斷具有較高的靈敏度、特異度和陽性預(yù)測值，而且癌譜廣。通過對三組中男性和女性TAP陽性率比對，發(fā)現(xiàn)TAP檢測與性別關(guān)系不大，表明TAP 檢測可以降低漏檢率，高度濃縮腫瘤高危人群，檢測結(jié)果不受性別限制，是一種有效腫瘤篩查方法，適用于健康體檢[18]。

綜上所述，TAP可以用于腫瘤的廣譜篩查，對于腫瘤早期輔助診斷具有一定的參考價值，符合國家對于腫瘤早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療的原則，值得在健康體檢的腫瘤篩查中廣泛推廣，但是TAP檢測對于腫瘤細胞不具備特異性，在不同類型腫瘤中的表達水平是否存在較大的差異有待進一步研究。