代森鋅在胡蘿卜和豌豆中的殘留行為研究及安全性評價

馮義志 李瑞娟 張愛娟

摘要 [目的]探明代森鋅在胡蘿卜和豌豆中的殘留量及殘留消解。[方法]進行1年6地田間試驗。消解動態試驗按代森鋅1 800 g a.i./hm2（推薦最高劑量的1.5倍）施藥，于施藥后0、1、2、3、5、7、10、14、21、28、35 d 采集胡蘿卜植株和豌豆莢樣品;最終殘留試驗按代森鋅1 800 g a.i./hm2（推薦最高劑量的1.5倍）和1 200 g a.i./hm2（推薦最高劑量）施藥，噴霧施藥3～4 次，施藥間隔7 d，距末次施藥后間隔7、14、21 d 采樣胡蘿卜樣品;5、7、10 d 采集豌豆莢樣品;21、28、35 d 采集豌豆樣品。[結果]田間消解動態試驗表明，代森鋅在胡蘿卜植株和豌豆莢中消解較快，半衰期分別為4.1～8.5和3.9～4.5 d。胡蘿卜中代森鋅的最終殘留量在0.032 4～1.830 0 mg/kg，豌豆莢中代森鋅的最終殘留量在<0.055～1.980 mg/kg，豌豆中代森鋅的最終殘留量均小于方法定量限（0.055 mg/kg）。[結論]參考我國和歐盟制定的代森鋅在農作物中制定的最大殘留限量，建議胡蘿卜中安全間隔期為7 d，帶莢豌豆安全間隔期為10 d，豌豆安全間隔期為21 d。

關鍵詞 代森鋅;胡蘿卜;豌豆;殘留量;安全評價

中圖分類號 S481+.8 ?文獻標識碼 A ?文章編號 0517-6611（2020）21-0210-03

Abstract [Objective]To make clear the residue and the residual digestion of zineb in carrot and peas.[Method]Conduct field trials in 6 fields for 1 year.For dissipation trial， carrot plants and pea pods were collected at 0，1，2，3，5，7，10，14，21，28，35 days after application at dosage of 1 800 g a.i./hm2 （1.5 times recommended concentrations）. For final residue trial， zineb was applied 3-4 times and the spraying interval 7 d at 1 800 g a.i./hm2 （1.5 times recommended concentrations） and 1 200 g a.i./hm2 （recommended concentrations）， respectively. Carrots were sampled at 7， 14， 21 d after application. Pea pods and peas were sampled at 5， 7， 10 d and 21， 28， 35 d after application， respectively. [Result]The field digestion dynamic test showed that zineb was digested quickly in carrot plants and pea pods， halflife values（t1/2） were 4.1-8.5 d in carrot plants and 3.9-4.5 d in pea pods， respectively. The ultimate residues of zineb in carrots were 0.032 4-1.830 0 mg/kg. The ultimate residues of zineb in pea pods were <0.055-1.980 mg/kg. The residues of zineb in peas were all less than the limit of the method（0.055 mg/kg）. [Conclusion]Referring to the maximum residue limits of zineb in crops established by China and EU， the safe interval of 7 days in carrots， 10 days in pea pods and 21 days in peas are suggested.

Key words Zineb;Carrot;Pea;Residue;Safety assessment

基金項目 農業農村部農業行業標準制定與修訂項目（14192019）;山東省農業科學院農業科技創新工程（CXGC2018E19）。

作者簡介 馮義志（1985—），男，山東濰坊人，工程師，碩士，從事農藥殘留分析工作;李瑞娟（1978—），女，山東金鄉人，副研究員，碩士，從事農藥殘留分析研究。馮義志和李瑞娟是共同第一作者。*通信作者：于建壘，研究員，從事農藥殘留分析、農藥安全使用研究;梁林，高級工程師，碩士，從事農藥殘留分析研究。

收稿日期 2020-04-12;修回日期 2020-04-27

代森鋅（zineb）屬乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽（EBDCs）類殺菌劑，對霜霉病菌、晚疫病菌和炭疽病菌有較好防效，可用于防治果樹、蔬菜、花生、茶葉等作物的多種病害[1]。但其環境毒性令人擔憂，已有研究表明其在植物、土壤和動物體內的殘留，可能會致癌、誘導有機體突變或者致畸[2-4]。因此，許多國家和組織已先后制定了代森鋅在農產品中的最大殘留限量（MRL）標準[5-7]，我國食品安全國家標準（GB 273—2019）[8]也已經制定了代森鋅在蘆筍、馬鈴薯、西瓜等30余項限量標準。

研究農藥使用后在農作物中的殘留和消解，對于農藥的安全使用具有重要意義。目前，有關代森鋅在農作物中殘留消解的研究涉及作物主要有蘋果[9]、小白菜[1]、柑橘[10]和蘆筍[11]。研究表明，代森鋅在不同作物中殘留量及消解情況差異較大。賀敏等[9]研究表明代森鋅在蘋果上的降解半衰期為20.4～36.5 d，而鄭坤明等[1]研究表明代森鋅在小白菜上的降解半衰期為1.8～2.4 d。為明確代森鋅在豌豆和胡蘿卜中的殘留和消解情況，筆者研究了80%代森鋅可濕性粉劑在豌豆和胡蘿卜中的殘留消解動態和最終殘留，為其安全使用提供科學依據，并對評價代森鋅的環境安全性具有很重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料

氣相色譜儀（GC-2010），配FPD（S）檢測器;多功能食品加工機（XBLL-25A），上海帥佳電子科技有限公司;電子天平，上海精密科學儀器有限公司;離心機，上海安亭科學儀器廠。

氯化亞錫（分析純，上海廣諾化學科技有限公司）;抗壞血酸（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）;鹽酸（分析純，煙臺雙雙化工有限公司）;正己烷（色譜純，Thermo Fisher Scientific）。

代森鋅標準品（純度為83%），購自Dr. Ehrenstor fer GmbH。

稱取鹽酸500 g至廣口瓶中，用去離子水稀釋，加入20 g SnCl2溶解并定容至1 L得5 mol/L SnCl2-HCl溶液。

1.2 田間試驗設計

按照《農藥殘留試驗準則》[12]和《農藥登記殘留田間試驗標準操作規程》[13]要求設試驗小區，小區面積30 m2，重復3次，小區間設保護帶。試驗時間：2018年;試驗地點：山東省濟南市、安徽省宿州市、湖南省桃江縣、內蒙古烏蘭察布市、廣東省廣州市和吉林省吉林市。80%代森鋅可濕性粉劑在胡蘿卜和豌豆上防治多種病害的推薦使用劑量（有效劑量，下同）960～1 200 g/hm2，在發病前期或初期，莖葉噴霧施藥2～3次，施藥間隔7 d。

1.2.1 消解動態試驗。

消解動態按1 800 g/hm2于胡蘿卜和豌豆生長期，噴霧1次施藥。分別于施藥后當天（施藥后0 d）、1、2、3、5、7、10、14、21、28、35 d采集胡蘿卜植株和豌豆莢樣品。在試驗小區內用隨機的方式采樣，每次每小區在10個以上采樣點采集2 kg以上生長正常的樣品，去除明顯腐壞、萎蔫、枯老部分的莖葉，裝入樣本容器中包扎妥當。將田間采集的樣本用不銹鋼刀切成1～2 cm大小的碎塊，并于不銹鋼盆中充分混勻。用四分法縮分樣品，分取2份150 g的樣品，分別裝入封口袋中，并貼好標簽，放入-20 ℃低溫冰柜中貯存。

1.2.2 最終殘留試驗。

設2個施藥劑量：低劑量（1 200 g/hm2）、高劑量（1 800 g/hm2），各設3次和4次施藥，施藥間隔7 d。末次施藥后間隔7、14、21 d采集胡蘿卜樣品;5、7、10 d采集豌豆莢樣品，21、28、35 d采集豌豆籽粒樣品。樣品制備同動態樣品。

1.3 前處理方法

準確稱取搗碎樣品5.0 g于50 mL頂空瓶中，依次加入0.05 g抗壞血酸、5 mL水、20 mL 5 mol/L的SnCl2-HCl 溶液和5 mL正己烷，迅速用聚四氟乙烯和硅膠墊密封，放85 ℃水浴中反應2 h，每隔15 min搖晃15 s，反應完成后冷卻至室溫，吸取上層有機相過0.22 μm微孔濾膜，待測。

1.4 色譜條件

色譜柱：SH-Rt-Silica BOND（30 m×0.2 mm×0.32 μm）;進樣口溫度：150 ℃;柱溫：80 ℃保持1 min，以10 ℃/min升至250 ℃;檢測器溫度：250 ℃，氫氣：60 mL/min、空氣：70 mL/min;進樣量：1 μL;不分流進樣;總流量：19.5 mL/min;柱流量：2.05 mL/min;控制方式：線速度。

1.5 結果計算及反應原理

代森鋅既不溶于水也不溶于大多數有機溶劑，直接檢測母體難度大，目前國際和國內針對其在農產品上的檢測大多是采用頂空技術，即以二硫化碳的檢測量計算。因此各國制定的代森鋅在農作物中的最大殘留限量均以二硫化碳含量表示。該研究中代森鋅在胡蘿卜和豌豆中的殘留量均以二硫化碳含量表示。

酸性和恒溫加熱條件下，代森鋅與氯化亞錫反應，定量產生二硫化碳氣體，氣體被正己烷吸收，用氣相色譜檢測正己烷中二硫化碳含量，由此得出代森鋅殘留量。

2 結果與分析

2.1 標準曲線和方法定量限

將1 000 mg/kg的代森鋅標準母粉用無水硫酸鈉粉末稀釋配得10.0、5.0、1.0、0.5、0.05 mg/kg系列標準溶液，在“1.4”色譜條件下進行測定，以代森鋅標準品濃度的對數對應色譜峰面積對數作圖，即用logC對應logA繪制標準曲線，得出代森鋅線性回歸方程為y=1.465x+7.548，相關系數（r）為0.991 5。

該研究中以最低添加濃度為方法定量限。代森鋅在胡蘿卜和豌豆中的方法定量限分別為0.05和0.10 mg/kg（以二硫化碳計分別為0.027 5和0.055 0 mg/kg）。

2.2 代森鋅添加回收率和精密度

添加不同質量分數的代森鋅于空白基質中，進行添加回收試驗（表1）。結果表明，代森鋅在胡蘿卜和豌豆等基質中回收率為70.8%～110.0%，相對標準偏差（RSD）為0.9%～9.6%，符合SANTE/11813/2017歐盟指導方針的要求（平均回收率在70%～120%、RSD<20%）[14]。

2.3 代森鋅在胡蘿卜植株和豌豆莢中的消解試驗

消解試驗結果表明（圖1），代森鋅在胡蘿卜植株和豌豆莢中半衰期分別為4.1～8.5和3.9～4.5 d，均降解較快（表2）。蘿卜植株中代森鋅降解安徽露地明顯快于山東保護地，而豌豆莢中代森鋅降解趨勢兩地差異不明顯。考慮到山東和安徽氣候條件差異不大，推測安徽露地胡蘿卜植株中代森鋅降解較快的原因是降雨造成的。另外，代森鋅在2種作物中的原始沉積量差別巨大。說明噴霧施藥時，胡蘿卜植株著藥量明顯高于豌豆莢。相同作物、不同地區之間原始沉積量亦有差別，這可能與施藥時作物種植密度、種植品種和生長時期不同有關。

2.4 代森鋅在胡蘿卜和豌豆中的最終殘留量

80%代森鋅可濕性粉劑按照1 200和1 800 g/hm2，莖葉噴霧施藥3～4次，施藥間隔7 d。從表3可以看出，末次施藥后間隔7、14、21 d采集的胡蘿卜樣品中代森鋅殘留最大值分別為1.830、0.697和0.696 mg/kg。末次施藥后間隔5、7、10 d采集的豌豆莢樣品中代森鋅殘留最大值分別為1.980、1.360和0.716 mg/kg。末次施藥后間隔21、28、35 d采集的豌豆樣品中代森鋅殘留量均小于方法定量限（0.055 mg/kg）。

3 結論與討論

對代森鋅在豌豆和胡蘿卜中的殘留及消解情況進行了研究，結果表明，代森鋅在胡蘿卜植株和豌豆莢中降解符合一級動力學方程，半衰期分別為4.1～8.5和3.9～4.5 d，均降解較快。

目前，我國食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量（GB 2763—2019）[8]規定，代森鋅在胡蘿卜中的最大殘留限量為5 mg/kg，尚未規定代森鋅在豌豆中的最大殘留限量。歐盟規定代森鋅在豌豆莢和豌豆中的最大殘留限量分別為1.0、0.2 mg/kg。以此為依據，2018年山東等6地殘留試驗結果，80%代森鋅可濕性粉劑用于胡蘿卜和豌豆作物中多種病害防治，以960～1 200 g/hm2劑量，于病害發生初期用藥2～3次，施藥間隔7 d，建議胡蘿卜、豌豆莢和豌豆的安全間隔期分別為7、10、21 d。

參考文獻

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[7]The Japan Food Chemical Research Foundation，Japan[DB/OL].[2020-01-05].http：//db.ffcr.or.jp/front/pesticide_detail？id=28700.

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[14]European Commission Directorate General Health and Consumer Protection.Guidance document on analytical quality control and validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed：SANTE/11813/2017[Z].2017.