藥用石斛黑斑病及其防治

孔德章，楊平飛，莫遠琪，韋啟迪，吳明開

(貴州省農業科學院 農作物品種資源研究所，貴州 貴陽 550006)

石斛是我國的名貴中藥材，主要分布于南方地區，貴州是石斛的地道產區之一。石斛是貴州主推的十二個特色產業之一。隨著種植面積的增加和種植時間的延長，石斛病害問題逐漸突顯出來，其中黑斑病較為常見，發病率極高。據管成林[1]對浙江幾處大型鐵皮石斛種植基地調查發現，石斛黑斑病發病率均大于30%；據李戈等[2]調查，云南石斛黑斑病發病率約30%。石斛患黑斑病會影響其品質和產量，黑斑病的高發生率已經嚴重制約了石斛產業的發展。因此，對石斛黑斑病的研究情況進行綜述，以期為石斛栽培提供參考。

1 發病癥狀

石斛黑斑病主要危害新葉，老葉很少受害，發病初期，葉片上密生針尖大小的斑點，褐色或黑色，斑點周圍黃色，隨后斑點逐漸擴大，嚴重時覆蓋整葉，直至整個葉片枯萎脫落，隨病情加重，莖干上會產生圓形或近圓形的紫色病斑[2-5]。桑維鈞等[6]在貴州赤水調查發現，患病葉片現淡褐色或灰白色病斑。

2 病原類型及其特征特性

2.1 病原菌類型

從現有研究報道看，石斛黑斑病病原復雜多樣，主要為真菌病原，其中較為常見的為細極鏈格孢菌(Alternariatenuissima)[3,6-8]。此外，付開聰[9]鑒定云南普洱石斛黑斑病病原為柱盤孢(Cylindrosporiumsp.)；王仕玉等[10]認為齒瓣石斛黑斑病病原為鏈格孢菌(Alternariasp.)；宋海超等[11]認為，由葉點霉(Phyllostictasp.)引起海南石斛蘭黑斑病；管成林[1]報道，尖孢枝孢(Cladosporiumoxysporum)、互隔鏈格孢(Alternariaalternata)也能引起石斛黑斑病。另外謝昀燁等[12]認為，石斛黑斑病是由于過量施用氮肥而引發的生理性病害。

2.2 形態特征

張敬澤等[3]、李夢嬌[8]等在培養條件下觀察測定了細極鏈格孢的形態特征：菌落正面灰黑色、圓形，背面具有黑白相間的輪紋，輪紋圈中產生大量孢子。分生孢子梗單生，少見分枝。分生孢子呈倒棒形至長卵圓形，有小型分生孢子和大型分生孢子，前者有3～7個橫膈膜，1～4個縱膈膜，呈淺棕色；后者較細長，深褐色，具長喙。菌落邊緣的分生孢子多為鏈長5～13個孢子的單鏈，偶見1～2個短鏈，鏈長僅2～5個孢子；從邊緣向內，鏈的分枝數和鏈長都有增加，一般為鏈長4～13個孢子的分枝，分枝數目為2～5個，鏈與鏈之間交織排布。典型的分生孢子中部有隔膜，數量1～2個，顏色較深且寬，隔膜處縊縮。菌絲多為匍匐生長，張敬澤等[3]觀察到氣生菌絲較少，而李夢嬌[8]認為氣生菌絲致密且呈淺灰色。

2.3 生物學特性

2.3.1 對溫度的響應 病原菌菌絲適宜溫度為25～27℃。桑維鈞等[6]測試了細極鏈格孢菌對溫度的響應，發現菌絲在5～40℃均能生長(最適溫度為25℃)，分生孢子在5～35℃均能萌發(最適溫度為25℃)，曹星星[7]認為在20～30℃適合生長。王仕玉等[10]從齒瓣石斛患黑斑病的葉片上分離獲得鏈格孢菌培養發現，病原菌生長及產孢的適宜溫度均為20～30℃, 但20℃條件下產孢量最多。孔瓊等[13]對其分離鑒定的病原細極鏈格孢和鏈格孢研究發現，菌絲在25～27℃生長最快，超過35℃上難以生長。

2.3.2 對光照的響應 光照對病原菌的影響較小。桑維鈞等[6]研究認為，光照對細極鏈格孢菌菌絲生長和孢子萌發無明顯的影響。王仕玉等[10]從齒瓣石斛的葉片黑斑病斑上分離獲得鏈格孢菌培養發現，是否光照對菌絲生長影響不大且都能產生分生孢子，但光暗交替(光照黑暗各半)有助于產孢。孔瓊等[13]對其分離鑒定的病原細極鏈格孢和鏈格孢研究發現，光照的有無對菌絲生長影響不大。

2.3.3 對pH值的響應 不同的病原菌對pH的響應不同。王仕玉等[10]研究鏈格孢菌對pH值的響應發現，其生長和產孢適宜pH為5～6的偏酸性環境。曹星星[7]認為，pH 5～5.7適合細極鏈格孢菌生長。孔瓊等[13]認為，菌絲生長和孢子萌發的最適pH分別為6和8。

2.3.4 碳氮營養 石斛黑斑病病原菌對碳氮營養要求不高，環境適應性強。王仕玉等[10]從齒瓣石斛的葉片黑斑病斑上分離獲得鏈格孢菌，培養發現在所供試培養基中均能生長，其中以淀粉、硝酸銨為碳、氮源的培養基上菌絲生長最好，而以葡萄糖、水解乳蛋白為碳、氮源的培養基對產孢有利。曹星星[7]研究發現，細極鏈格孢菌在各供試碳、氮源處理下均能很好的生長。孔瓊等[13]對其分離鑒定的病原細極鏈格孢和鏈格孢研究發現，該2種病原菌在多種培養基上均能生長，但PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基)最適合菌絲生長，PCA(馬鈴薯胡蘿卜瓊脂培養基)最適合產孢。

3 發病規律

該病在高溫高濕、通風不暢的環境中易發生。在病殘植株上越冬的菌絲或孢子，待來年溫度20℃以上、濕度40%以上時，便開始產孢浸染[14]。張敬澤等[3]研究發現，移植9 d后的石斛苗會出現針尖大小的病斑，15 d后病斑直徑即可達2～4 mm，隨后病斑周圍變黃甚至葉片脫落。

4 致病機理

相關研究表明[3,15]，石斛黑斑病病原菌為兼性腐生菌，寄生性強，主要通過葉背氣孔(也可通過傷口)侵入。

病原菌分生孢子著陸在組織表面；隨后萌發產生牙管，牙管可產生在孢子側面或頂端，側面牙管垂直于孢子方向生長，頂端牙管沿孢子軸方向生長；牙管遇到氣孔便侵入組織，不能遇到氣孔則緊貼組織表面繼續生長，寄主表面的牙管長短與遇到氣孔的早晚有關[3]。芽管侵入石斛后分泌毒素和酶，破壞石斛組織，同時產生大量菌絲并向氣孔周圍組織擴散組成菌絲體，隨后引起石斛組織解體，分泌的毒素還會殘留在植株體內，對人體食用產生潛在危害[3,16-18]。

5 防治方法

5.1 生物防治

近年來，石斛黑斑病的生物防治研究逐漸興起。趙明富等[19]進行變棲克雷伯菌在石斛體內定殖及其拮抗黑斑病試驗表明，菌株定殖35 d后達到相對穩定狀態，且對石斛黑斑病的相對防效達71.53%。武利勤等[20]從霍山石斛中篩選到1株對石斛黑斑病菌具有較強抑制性的菌株，鑒定為甲基營養芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)。管成林[1]研究了我國幾個鐵皮石斛主產區內生菌，從中篩選到1株鐵皮石斛同源內生拮抗菌(Burkholderiasp.)能有效拮抗黑斑病病原菌(C.oxysporum和A.alternata)。李夢嬌[8]進行石斛病害生防特性認定試驗表明，篩選的2株菌種(經鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis、多粘芽孢桿菌Paenibacilluspolymyxa)對鐵皮石斛黑斑病具有較好的防效，抑菌率分別達82.1%、79.7%。

5.2 農業防治

石斛黑斑病的農業防治，首先要選用抗病性品種；其次應合理密植和施肥；此外，還要及時清除病株，以防感染其他正常植株。

5.3 化學防治

桑維鈞[6]對赤水金釵石斛黑斑病菌進行室內藥劑篩選試驗表明，苯醚甲環唑和惡霜靈對菌絲的抑制率極佳。張敬澤等[21]對防治石斛黑斑病農藥進行篩選試驗表明，代森鋅、代森錳鋅、易保和炭疽福美能完全抑制孢子萌發，使百克和世高對菌絲抑制效果最好且對孢子萌發也有較強的抑制作用。曹星星[7]、黃雅俊等[22]進行了咪鮮胺藥效試驗表明，其對鐵皮石斛黑斑病具有良好的防治效果。此外，波爾多液、多菌靈、甲基托布津、異菌脲等對石斛黑斑病也有一定防效[7,14,23]。

6 展望

截止2020年5月底，我國已批準產品登記防治石斛黑斑病的農藥為咪鮮胺[24-25]，結合前人的研究結果，筆者認為，必要的時候可選用使百克(咪鮮胺)防治石斛黑斑病。就現有報道看，石斛黑斑病病原菌復雜多樣，特征特性也有不同，這可能是病原菌種類與石斛類型、栽培區域等有關，也有可能是研究方法的不同導致鑒定結果存在差異，今后需對石斛黑斑病病原菌進行系統性研究，深入探索石斛黑斑病發病規律和開發生物農藥，從而更全面的認識和防治石斛黑斑病。