冠心病患者血漿可溶性Sema4D水平與冠狀動脈狹窄程度相關性

郭偉崇 馬金霞 陳統

（南陽市第一人民醫院心血管內二科，河南 南陽 473002）

冠心病在人群中具有高發病率和病死率的特點，是一種危及人民身心健康的疾病。冠狀動脈粥樣硬化是導致冠心病的主要原因[1]。然而，目前冠心病的診斷主要采用血管造影，而血管造影具有一定程度的侵入性，并且依賴于操作者的技術水平[2]。因此，尋求篩查冠狀動脈病變的標記物勢在必行。

信號素 4D（Semaphorin 4D，Sema4D）是一種150 kDa的I型整合膜糖蛋白，主要表達于T細胞，可與CD72結合促進B細胞發育，也參與軸突導向、血管生成和腫瘤進展，而且其還在血小板上高表達，并通過增強膠原蛋白引發血小板活化參與體內血栓形成[3]。而敲除Sema4D的高脂血癥小鼠中血小板水平和內膜新血管形成明顯下降，動脈粥樣硬化進程受到抑制[4]。由于可溶性Sema4D（soluble semaphorin 4D，sSema4D）可能具有潛在影響免疫系統和心血管系統的作用，因此本文擬分析冠心病患者血漿可溶性Sema4D水平與冠狀動脈狹窄程度相關性，為冠心病的嚴重程度診斷尋求一種新的標記物。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年1月在我院接受冠狀動脈血管造影檢查的112例疑似冠心病的患者作為研究對象。

冠心病納入標準:兩位獨立的介入心臟病專家評估冠狀動脈造影，并且至少一個主要冠狀動脈血管造影管腔狹窄程度>50%。排除標準:瓣膜性心臟病、心肌病、嚴重傳染病、腫瘤、免疫疾病和腎功能不全的患者；器質性心臟病和心律失常的患者。依據冠心病診斷標準并結合血管造影檢查結果，確診冠心病患者80例（冠心病組），男53例，女27例；年齡50-80歲，平均62±10歲。把狹窄<50%的患者作為對照組，共32例，男21例，女11例；年齡50-79歲，平均60±11歲。排除兩組患者在性別、年齡等方面的顯著差異（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 Gensini評分

依據冠脈狹窄程度評分，無:0分，0%~25%為1分，26%~50%為2分，51%~75%為4分，76%~90%為8分，91%~99%為16分，100%為32分，各個分支積分相加，既得Gensini積分。依據Gensini積分將冠心病組患者按照高低排序，并平均分成兩組，低分組40例（Gensini積分<30分）和高分組40例（Gensini積分≧30分）。

1.2.2 血清標本的制備及指標檢測

抽空腹靜脈血10 mL置于非抗凝管，3500 rpm離心15 min，分離血清，-20℃凍存備用。采用羅氏Cobas 8000全自動生化分析儀測定血脂等生化指標，膠乳增強免疫比濁法測定hs-CRP水平，免疫熒光法測定NTproBNP水平，試劑盒由南京建成生物研究所提供。酶聯免疫吸附法檢測血漿sSema4D水平，試劑盒由南京森貝伽生物科技有限公司提供。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 患者一般資料比較

兩組患者的性別、年齡、收縮壓（Systolic pressure，SBP）)、舒張壓（Diastolic blood pressure，DBP）)、心率（Heart rate，HR）、體質指數（Body mass index，BMI）、總膽固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride, TG）、高密度脂蛋白（High density lipoprotein，HDL）差異無統計學意義（P>0.05）。

飲酒、阿司匹林使用、β 受體阻滯劑使用、鈣拮抗劑使用、硝酸鹽類使用、他汀類藥物使用等情況差異無統計學意義（P>0.05），而吸煙史和糖尿病情況比較差異有統計學意義（P<0.05），低密度脂蛋白（Low density lipoprotein，LDL）、超敏C反應蛋白（Hypersensitive C-reactive protein，Hs-CRP）、N端前腦鈉肽（N-terminal probrain natriuretic peptide，NTproBNP）等水平比較差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

表1 患者一般資料比較

2.2 sSema4D和 Gensini評分相關性分析

與對照組比較，冠心病組sSema4D和Gensini評分降低（P<0.05）。sSema4D水平與Gensini評分正相關（r=0.476，P<0.05），見表2。

表2 sSema4D和Gensini評分對比（±SD）

表2 sSema4D和Gensini評分對比（±SD）

注：與對照組比較，**P<0.01。

組別 例數 sSema4D（pg?ml） Gensini評分（分）對照組 32 6986.26±248.24 3.02±1.02觀察組 80 12212.48±684.57** 42.02±1.57**

2.3 Gensini低分組和和高分組臨床資料比較

與低分組比較，Gensini高分組年齡、男性比例、LDL、Hs-CRP、NTproBNP、sSema4D水平均明顯升高（P<0.05），見表3。

表3 Gensini低分組和和高分組臨床資料對比

2.4 高Gensini積分危險因素分析

Logistics回歸分析顯示，高年齡、男性、LDL、Hs-CRP、NTproBNP、sSema4D均為高Gensini積分的獨立危險因素，見表4。

表4 高Gensini積分危險因素分析

2.5 sSema4D診斷冠心病的效能

當sSema4D診斷臨界值取10126 pg?ml-1時，敏感性為82.6%，特異性為87.5%。sSema4D的ROC曲線下面積為0.712（95%CI:0.590-0.796）。

圖1 sSema4D診斷冠心病的ROC曲線

3 討論

Sema4D是免疫系統中表達的跨膜糖蛋白，可由基質金屬蛋白酶切割產生可溶性的Sema4D，主要表達于B細胞、內皮細胞、血小板、腫瘤細胞，參與多種炎癥性疾病、血管的生成[5]、血栓的形成以及腫瘤的進展[6]。本研究結果顯示，冠心病組患者的sSema4D水平明顯高于對照組，與Gong H[7]的研究結果一致，說明在病理狀態下，尤其是冠狀動脈粥樣硬化發生時，Sema4D被釋放并通過切割產生可溶性的Sema4D，加速血管壁的炎癥反應，促進斑塊的易碎性，促進血小板的激活和聚合，加速血栓的形成。這同時也說明高水平的可溶性的Sema4D參與了冠心病的發生和進展。

Gensini評分系統目前被廣泛用于量化冠狀動脈疾病，Gensini評分不僅可以量化狹窄程度，而且可以根據冠狀動脈的不同部分準確客觀地表示冠狀動脈病變的程度。計算方法相對簡單，更適合于大型臨床樣本量的計算。分數越高，狹窄程度越嚴重[8]。因此，它是一種非常實用和有效的定量評估方法[9]。本研究中，冠心病組患者的Gensini評分明顯高于對照組，這與劉愛國等[10]研究一致，而且Gensini高分組患者的sSema4D水平明顯高于低分組，Logistics回歸模型分析顯示，高年齡、男性、LDL、Hs-CRP、NTproBNP、sSema4D均為高Gensini積分的獨立危險因素。這就說明sSema4D水平可以評價冠狀動脈狹窄程度，Sema4D水平越高，炎癥程度越嚴重，動脈粥樣硬化越嚴重，狹窄程度越重。

本研究通過ROC曲線評價sSema4D預測冠狀動脈狹窄程度的價值，結果顯示，sSema4D診斷臨界值取10126 pg?ml-1時，診斷效率最高，說明在臨床上，患者的sSema4D水平高于10126 pg?ml-1時，冠狀動脈狹窄程度更嚴重，臨床醫生應該積極考慮并給予相應的治療，減緩冠心病的進展。

因此，sSema4D水平與Gensini評分正相關，對冠心病的嚴重程度具有較好的預測價值，值得在臨床上作為一個預測指標推廣。