介紹一種過濾包埋石蠟的新方法

錢金林，李 青，蘇紅丹，李林秋，嚴麗霞

組織切片出現刀痕是病理技術工作中經常遇到的問題，產生刀痕原因有組織、刀片及石蠟等因素，其中用于包埋的石蠟中有雜質是刀痕產生的主要原因，去除包埋石蠟中的雜質是減少石蠟切片刀痕的重要方法之一。通常去除石蠟中雜質的方法是將石蠟靜置烤箱10 h以上，棄除下面含有雜質的沉淀石蠟后能獲得較為純凈的石蠟[1]。但該方法不能去除懸浮在石蠟中的比重較輕的其它雜質，且有燙傷操作者和引發火災的危險。本科室通過反復實踐摸索，總結出一種高效便捷、安全有效的石蠟過濾方法，提高了組織切片質量，杜絕安全隱患，現將該方法介紹如下僅供參考。

1 材料與方法

1.1 材料Leica HistoCore Arcadia H型石蠟包埋機，華靈高效切片石蠟(熔點58～60 ℃)，大小12 cm×9 cm×8 cm的不銹鋼油炸藍3個，大張方形濾紙，回形針。

1.2 方法(1)沿不銹鋼油炸籃上口切除手柄。(2)將大張濾紙裁剪為30 cm×26 cm，按不銹鋼油炸籃的尺寸折疊成一面開口的長方體，用回形針將其固定，將疊好的濾紙放入不銹鋼油炸籃中，即成為不銹鋼過濾籃(圖1)。(3)將過濾籃放入石蠟包埋機蠟缸中，使其位置盡量遠離蠟缸中間的出蠟口(圖2)。(4)將石蠟加入過濾籃中，蓋上包埋機蠟缸蓋即可過濾(圖3)。

圖1 將合適尺寸的濾紙折疊放入切除手柄的不銹鋼油炸藍，形成不銹鋼過濾籃 圖2 過濾籃放入包埋機蠟缸中，盡量遠離中間的石蠟出口 圖3 石蠟加入過濾籃中 圖4 過濾籃中可見大量絮狀雜質

2 結果

2.1 石蠟清潔度本組采用該方法過濾切片石蠟，使石蠟清潔度大大增高(圖4)。

2.2 切片刀痕本組采用該方法使包埋切片組織刀痕明顯減少，提高了切片質量，同時也降低了安全隱患。

3 討論

組織切片出現刀痕是常規制片中經常出現的問題，不僅影響切片質量，而且有時會影響診斷。組織切片刀痕的產生主要原因：(1)組織本身的因素，組織內含有較堅硬的物質，如闌尾、腸壁等含有糞石的組織；或組織內含有異物而取材時未能充分沖洗，如膽囊、肝臟等含有結石的組織，即使取材時充分流水沖洗，也不能去除組織內的細小結石。(2)標本容器的因素，臨床固定標本時使用的標本袋或者瓶子不干凈，會使異物黏附于標本中，尤其是一些較小的活檢標本不便流水沖洗，異物難以去除。(3)包埋石蠟的因素，懸浮于包埋石蠟中的雜質是產生刀痕的主要因素，石蠟中的雜質也使刀片的使用期限大大降低[2]。

為了減少刀痕的產生，除了取材時認真沖洗標本及選用干凈的標本容器外，應對包埋石蠟進行過濾以提高其清潔度。傳統包埋前對石蠟進行處理的方法有兩種：(1)將石蠟熔化后在65 ℃的烤箱中靜置10 h，讓石蠟中的雜質沉淀后, 棄去下面含雜質的石蠟，重復3次，即可獲得較為純凈的石蠟[1]。但此操作需重復3次甚至多次，過程較為繁瑣。由于石蠟是易燃品，如在烤箱內過濾中發生遺漏，易引發火災，同時操作者也容易造成燙傷。該方法使用過程繁瑣且存在較大安全隱患，不符合現代實驗室質量安全管理的要求，在日常工作中應謹慎使用該方法。(2)使用電磁爐將石蠟熔化后沉淀，再倒入包埋機蠟缸。該方法只能沉淀一些顆粒大、密度大的雜質，不能去除懸浮于石蠟中的雜質，且電磁爐在加熱熔蠟的過程中不能控制熔蠟的溫度，有引發火災、燙傷操作者和損壞包埋機的風險。為了規避以上兩種傳統石蠟過濾方法的缺點，本科室通過實踐摸索出應用過濾籃在包埋機缸中邊過濾、邊包埋的方法。Leica HistoCore Arcadia H型石蠟包埋機的蠟缸中管道出口高于底部約0.5 cm，可以沉淀石蠟中高密度的雜質，但不能去除懸浮于石蠟中的絮狀雜質。該包埋機蠟缸的溫度設置為50～75 ℃，蠟缸大小為40 cm×12 cm×9 cm，最大容量為4 L，蠟缸中可以放下3～4個大小為12 cm×9 cm×8 cm的不銹鋼過濾籃(使用多個過濾籃可以增大過濾面積)。在放置過濾籃時應盡量遠離出蠟口以保證出蠟通暢，即使標本量大、包埋速度快的情況下也可以做到邊過濾、邊包埋。該方法使用固體石蠟直接加入包埋機蠟缸中的過濾籃中，避免包埋機被高溫熔化的石蠟損壞，杜絕火災，避免操作者被燙傷等安全風險，且能有效地過濾石蠟中的雜質，提高了切片質量，值得推廣應用。