分光光度法分析新技術(shù)研究

柴利萍

(河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院，河南 安陽(yáng) 455000)

近些年來(lái)，分光光度法憑借其靈敏度較高、準(zhǔn)確度高、操作簡(jiǎn)便、應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)已成為食品、藥品等領(lǐng)域分析的重要常規(guī)手段之一。隨著各種新型顯色劑的出現(xiàn)和發(fā)展，特別是各種聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用，使得分光光度分析技術(shù)又有了新的進(jìn)展。

1 雙波長(zhǎng)分光光度法

以單波長(zhǎng)分光光度法為基礎(chǔ)，隨著新試劑、新技術(shù)的發(fā)現(xiàn)和使用，逐步發(fā)展出各種新的分光光度法技術(shù)，能更好的解決測(cè)定中遇到的如試樣渾濁、多組分測(cè)定困難等各種問(wèn)題。雙波長(zhǎng)分光光度法是在單位時(shí)間內(nèi)用兩條不同波長(zhǎng)的單色光以一定頻率交替照射同一吸收池的溶液，然后經(jīng)過(guò)檢測(cè)器和電子控制系統(tǒng)，計(jì)算出這兩個(gè)波長(zhǎng)下吸光度的差值ΔA與被測(cè)物質(zhì)的濃度的正比關(guān)系。與單波長(zhǎng)分光光度法要求試樣透明、無(wú)渾濁相比，雙波長(zhǎng)分光光度法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度和精密度好、多組分同時(shí)測(cè)定、能進(jìn)行高濃度溶液和渾濁溶液樣品的分析等優(yōu)點(diǎn)。

如王芳等[1]發(fā)現(xiàn)，在pH=3.0～6.5的Tris-HCl緩沖溶液中，呋塞米與維多利亞藍(lán)B(VB)反應(yīng)生成具有明顯正、負(fù)吸收峰的離子締合物，其最大正吸收波長(zhǎng)位于625 nm，最大負(fù)吸收波長(zhǎng)位于655 nm，采用雙波長(zhǎng)疊加法測(cè)定，表觀系數(shù)ε為2.46×104 L /(mol·cm)，檢出限為0.045 mg/L，呋塞米在0.27～5.0 mg/L的濃度范圍內(nèi)符合比爾定律，其回歸方程為A=0.007 97+0.072 05c (c∶mg/L)。方法用于市售呋塞米藥物、人體血液及尿液中呋塞米含量的測(cè)定，回收率為97.9%～104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8%～2.5%。方法簡(jiǎn)便易行，有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性范圍較寬，選擇性較好。……