禽痘病毒的診斷與防控

宋玉紅/內(nèi)蒙古赤峰市巴林右旗動物疫病預(yù)防控制中心 025150

1 流行病學(xué)

在禽痘暴發(fā)期間，金絲雀和其他雀鳥的死亡率可達80%至100%。這與雞和火雞的死亡率普遍較低形成鮮明對比。病毒的傳播可通過皮膚損傷發(fā)生，吸血性昆蟲如蚊子和螨蟲傳播。受感染的鳥類產(chǎn)生的氣溶膠，或攝入受污染的食物或水，也被認為是傳播的來源。這種疾病最常見的特征是皮膚增生性病變，包括表皮上皮增生，導(dǎo)致增生，疣狀突起。上述癥狀主要局限于身體中沒有羽毛的部位，如腿、腳、眼瞼和喙基部。在恢復(fù)和愈合后疤痕通常可見。野生鳥類的死亡率通常很低，這取決于增殖性病變的數(shù)量和大小。然而，如果感染發(fā)生在皮膚無羽毛區(qū)，繼發(fā)性細菌感染，死亡率可能很高。另一種較不常見的APV 感染形式是白喉型，在消化道和上呼吸道粘膜中以纖維壞死和增殖性病變的形式出現(xiàn)，其死亡率一般高于皮膚癥狀。盡管宿主和病毒株種類繁多，但受感染的家禽的相關(guān)病理仍然相同，臨床癥狀因病毒的毒力、宿主的易感性、病變的分布和類型而異。APV與禽逆轉(zhuǎn)錄病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒之間存在一定的關(guān)系。由前病毒整合到APV 基因組中同時引起的網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥可能在疾病暴發(fā)時APV 感染中起著重要的作用。眾所周知，網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒感染會導(dǎo)致免疫抑制。在受影響的鳥類中。在APV 感染導(dǎo)致網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒可能會加劇疾病的發(fā)展。盡管一些哺乳動物細胞系似乎能夠支持APV 的復(fù)制，但沒有證據(jù)表明APV 在人類身上引起了臨床疾病。

2 臨床診斷

感染臨床特征顯示多種皮膚病變，從丘疹到結(jié)節(jié)不等。在剖檢過程中，皮膚和喉的病變通常懷疑為APV 感染。

2.1 實驗室診斷

2.1.1 組織病理學(xué)和電鏡對于疑似APV 感染，可以用剖檢來檢測，尤其是口腔出現(xiàn)白喉形態(tài)。此外，用經(jīng)典的Wright’s Giemsa 染色對組織切片進行組織學(xué)檢查，可以發(fā)現(xiàn)典型的大、實或環(huán)狀嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體，稱為Bollinger 小體。透射電鏡（TEM）也確認出APV 感染，有包涵體內(nèi)典型的APV 顆粒。用2%磷鎢酸（Pta）對感染細胞進行負染電鏡也可鑒定APV。這些方法通常用來實驗室鑒定APV。

2.1.2 病毒分離將典型APV 的臨床標本的勻漿接種到雞胚上，是診斷APV 的標準方法，盡管有些APV 株在雞胚上不容易生長。雞胚首先用70%的酒精擦拭消毒，然后在氣室上的打一個小孔，在雞胚的另一側(cè)打另一個孔，形成一個假氣囊，然后用橡膠球負壓降低氣壓。用無菌一次性1mL 注射器對感染樣本進行接種，接種量約為0.1～0.2mL。雞胚在37℃下孵育5d，每天用檢查胚胎死亡情況。接種后3～5d，在膜上可觀察到大小為0.5至1.5mm 的斑點狀病變。另一種分離APV 的方法需要對臨床樣本進行切除和勻漿，并將勻漿上清液接種到細胞上培養(yǎng)，如CEF 細胞。細胞病變通常在接種后4～6d 內(nèi)形成，這取決于病毒分離物和感染的多重性。

2.1.3 分子生物學(xué)檢測針對特定基因的PCR、限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）、Southernblot 雜交等方法正在越來越多地用于檢測和鑒定APV。PCR技術(shù)對病毒核酸檢測是敏感和特異，可以提高對許多病毒病原體的診斷敏感性。

2.1.4 血清學(xué)分析傳統(tǒng)的瓊脂凝膠免疫擴散的血清學(xué)檢測技術(shù)在全球范圍內(nèi)廣泛用于家禽APV 的監(jiān)測和疾病控制工作。這種檢測在對大量的血清進行檢測時，與其他檢測方法如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）相比，靈敏度似乎較低。ELSIA 是一種快速、簡便的檢測抗APV 抗體的方法，特別是當(dāng)大量的血清檢測時，比中和試驗更靈敏。

3 防治

控制家禽APV，需要在保持治療效果的同時保持低成本的策略。預(yù)防可以通過疫苗接種來實現(xiàn)。已研制出重組和活的改良疫苗，用于預(yù)防雞、鴿子、火雞和鵪鶉感染。現(xiàn)有疫苗是非常有效的，這無疑對預(yù)防家禽養(yǎng)殖中的疾病作出了巨大貢獻。由于不同的APV是從鳥類物種中分離出來的，而且由于只有少數(shù)幾個分離物已被鑒定，因此開發(fā)針對所有物種的分類群特異性疫苗一直是困難的。因此，現(xiàn)有的疫苗往往是在試驗的基礎(chǔ)上使用的，需要對這些病毒的分子生物學(xué)、病理學(xué)和流行病學(xué)有更多的了解，才能研制出能夠有效保護各種鳥類的疫苗。與大多數(shù)病毒感染一樣，沒有針對禽類痘病毒感染的專門治療方法。可用的治療方法包括使用碘甘油在皮膚增生的皮膚損傷處使用，以幫助愈合，控制繼發(fā)性細菌感染的抗生素以及使用維生素A 幫助皮膚愈合。

雞痘被認為是一種痘病，容易傳播。雞痘疫苗是最早引進的家禽疫苗之一。雞痘疫苗往往分為兩種類型：雞胚起源型（CEO）和組織培養(yǎng)型（TCO）。一般來說，TCO 比CEO 更弱，這可能是由于更廣泛的傳代。因此，雖然TCO 疫苗可以用于雛雞，但CEO 疫苗的殘留致病性較高，該疫苗在雛鳥出生幾周后才能使用。然而，TCO 疫苗的更弱的免疫反應(yīng)意味著不會提供持久的保護，因此蛋雞和育種者需要在6周時使用CEO 疫苗。TCO 應(yīng)用于日齡雛雞更實用，特別是在使用半自動注射器的情況下。

商用重組雞痘病毒載體疫苗現(xiàn)已上市，例如針對禽類腦脊髓炎，禽流感，傳染性喉氣管炎，支原體和新城疫。許多其他重組疫苗正在開發(fā)中。但使用適當(dāng)減毒的疫苗載體是很重要的，特別是在接種疫苗后避免出現(xiàn)并發(fā)癥。

4 結(jié)語

APV 是一種對家禽產(chǎn)業(yè)和野生鳥類具有經(jīng)濟重要性的疾病。因此，需要預(yù)防措施，例如疫苗接種。許多重組APV 結(jié)構(gòu)已獲準用于獸醫(yī)領(lǐng)域，目前正在測試一系列候選疫苗，以用于預(yù)防動物和人類多種傳染病的疫苗。因此，重組APV 載體疫苗在不久的將來也有可能被用于治療人類疾病。使用APV 而不是痘病毒或其他哺乳動物病毒作為載體的主要安全理由是，APV不是人畜共患病，不能在哺乳動物中進行完整的復(fù)制周期。然而，最近的研究表明，雞痘病毒能夠在一些已建立的哺乳動物細胞系中復(fù)制和產(chǎn)生后代病毒。新的分子工具使限制病毒進入某些宿主的因素和機制得到了更好的解決，例如艾滋病毒和非典病毒。宿主機制、致病性、宿主免疫和病毒免疫策略對于APV 作為載體在多種屬靶向疫苗中的應(yīng)用具有重要意義。