7項呼吸道病原體IgM抗體檢測在兒童呼吸道感染中的結果分析

華純芳　張純林　高錦偉　張潘

【摘要】目的：探討7項呼吸道病原體IgM抗體在兒童呼吸道感染中的診斷價值。方法：收集因呼吸道感染來無錫市第八人民醫院住院的患兒2898例，采用間接免疫熒光法檢測7種病原體，從病原體的構成、季節分布、性別差異、年齡差異等幾方面分析其流行病學特征。結果：2898例患兒中共檢出陽性1170例，陽性率40.37%，以肺炎支原體-IgM（MP-IgM）的檢出率最高（27.78%） ;混合病毒感染檢出107例（3.69%），占全部感染例數的9.15%，其中MP與乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM）的混合感染在混合感染中所占比例最高為5.64%;不同季節呼吸道病毒檢出率不同，以秋季的檢出率最高（53.49%）;不同性別間差異具有統計學意義（P<0.05），女童呼吸道病毒檢出率較高（45.95%）;不同年齡組呼吸道病毒檢出率不同（P<0.05），4～6歲患兒陽性檢出率最高（53.75%）。結論：兒童呼吸道病原體檢出率較高，MP是無錫地區兒童呼吸道病毒感染的主要病原體，在4～6歲患兒和秋冬季高發，要加強防護。

【關鍵詞】呼吸道病原體;間接免疫熒光法;兒童

[中圖分類號]R725.6;R446.6 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2021）10-0184-02

急性呼吸道感染是一組嚴重危害人類健康的疾病，其傳染力極強，傳播速度快，發病率占急性傳染病的首位，在我國每年都有不同程度的流行[1]。呼吸道病原體種類和致病率因不同國家、不同地區、不同季節等而有所差異，同一病原體可引起疾病的不同臨床表現，相同的臨床表現也可能是由不同或多種混合病原體引起。呼吸道感染是兒童時期常見的疾病之一，發病初期，快速診斷呼吸道感染病原體至關重要，否則，醫生很難僅憑臨床癥狀，對病原體進行針對性治療，常會致抗生素的濫用，延擱患兒的診斷和治療。本文通過對7項呼吸道病原體IgM抗體的檢測結果分析，旨在為兒童預防呼吸道感染及臨床診斷治療提供依據。

1 解決方法與執行過程

1.1 標本來源 收集2019年1月1日～2019年12月31日來無錫市第八人民醫院住院的呼吸道感染患兒2898例，臨床表現為發熱、咽痛、流涕、咳嗽等癥狀，其中男1590例，女1308例。年齡在1個月至18歲之間，<1歲318例（占10.97%），1～3歲1258例（占43.41%），4～6歲800例（占27.61%），>6歲522例（占18.01%）。

1.2 標本采集 清晨抽取患兒空腹靜脈血3ml，3500r/min分離血清，當日完成檢測。

1.3 試劑和儀器 試劑盒為歐蒙醫學實驗診斷股份公司提供的呼吸道病原體譜抗體IgM檢測試劑盒，采用間接免疫熒光法對患者血清標本進行7項呼吸道病原體[甲型流感病毒-IgM（IFA-IgM），乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM），肺炎支原體-IgM（MP-IgM），肺炎衣原體-IgM（CP-IgM），腺病毒-IgM（ADV-IgM），呼吸道合胞病毒-IgM（RSV-IgM），副流感病毒-IgM（PIV-IgM）]檢測。儀器為倒置熒光顯微鏡（EUROStar Ⅲ Plus），旋渦混合器為上海醫科大學儀器廠生產（XW-80A），臺式離心機購置北京白洋醫療器械有限公司（G16），生物安全柜（蘇凈安泰BSC-130011132）。嚴格按照試劑盒說明書操作及結果判斷。上述所有生物試劑都有正式批號，均在有效期內使用。

1.4 檢測方法 ①取患兒血清22.5ul，用樣本稀釋液1：10稀釋后，3000r/min離心10min去除沉淀，②取30ul稀釋后的樣本上清液加至除肺炎支原體以外的反應區;取22.5ul稀釋后的樣本上清液，再用PBS吐溫緩沖液1：10稀釋，取上述卜100稀釋后的標本30ul加至肺炎支原體的反應區，陰陽性對照同樣本，③18～25℃溫育30min，用PBS吐溫緩沖液沖洗后立即放入裝有PBS吐溫緩沖液中浸泡至少5min，④取出自然風干后滴加25ul FITC標記的抗人免疫球蛋白，⑤重復步驟③，⑥取出自然風干后，滴加10ul甘油，用熒光顯微鏡200倍觀察熒光模型。

1.5 統計學分析 用SPSS22.0軟件對數據進行統計學分析，各組間病原體陽性率比較采用x2檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 單項呼吸道感染病毒陽性檢出率 2898例標本中共檢出陽性1170例，陽性率40.37%，以MP的檢出率最高（27.78%），其它依次為IFB（7.25%），CP（2.24%），PIV（1.62%），IFA（0.93%），ADV（0.41%），RSV（0.14%）。

2.2 混合病原體感染結果 2898例標本中，三重感染本研究僅檢出2例，都為MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB參與的感染最多，占比9.15%（107/1170），見表1。

2.3 不同季節呼吸道病原體檢出率 MP在四季中的陽性率均最高，IFB在冬季的陽性率最高，PIV在秋季的陽性率最高。RSV全年僅4例，秋冬季各2例。詳見表2。

2.4 不同性別與呼吸道病原體感染的關系 2898例標本中，男女性別間差異有統計學意義（x2=30.78，P<0.05）。見表3。

2.5 各年齡組中呼吸道病原體的檢出情況 四個年齡組中，4～6歲患兒陽性檢出率最高（53.75%），其次為>6歲組（40.8%），1～3歲組（38.79%），<1歲組（12.26%），前三組陽性檢出率差異有統計學意義[6歲組無統計學意義（P>0.05）。MP、IFB、CP在4～6歲組均高于其他年齡組。

3 討論

本研究對具有呼吸道感染癥狀的2898名患兒采用間接免疫熒光法進行7項呼吸道病原體IgM檢測，該檢測方法方便、快速，一次可檢測7個項目，既可檢測出單項感染，又可發現病原體的混合感染，其結果方便臨床醫生正確選擇有效的抗感染藥物，有利于對患者進行針對性治療。2898例患兒共檢測出1170例陽性，陽性率40.37%（1170/2898），與韓歡等[2]的研究結果有很大的區別，韓歡等研究結果的陽性率為19.20%，這可能與不同地區的氣候差異、不同人群、不同檢測方法有關，韓歡等采用的是直接免疫熒光法，RSV的感染陽性率最高，而本研究采用的間接免疫熒光法，以MP的感染最高27.78%，與陳文華等[3]報道的MP陽性率26.39%相近，其次是IFB（7.25%），MP、IFB感染率占陽性病例的86.75%。混合感染107例，混合感染率3.69%（107/2898），其中MP+IFB混合感染66例，MP+PIV混合感染 19例，MP+CP混合感染14例，三重感染本研究僅檢出2例，都為MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB參與的感染最多，占陽性病例的9.15%（107/1170）。從統計結果來看，無錫地區秋冬季引起呼吸道感染的主要病原體為MP，其次為IFB，對于采取針對性的預防措施有一定的意義，可以起到一定的預防作用，減少MP的感染。肺炎支原體主要通過呼吸道飛沫傳播，容易造成患兒的呼吸道感染，感染一種病原體后患者的身體處于較弱階段，免疫力下降，如果與其他患兒接觸，交叉感染的機會就會增加[4]。

綜上所述，本地區兒童呼吸道病原體感染的首要病原是MP，在4～6歲的孩子中發病率最高，秋冬季高發，女童的陽性率高于男童。通過本次研究可知，7項呼吸道病原體IgM抗體檢測在兒童呼吸道感染中具有較高的應用價值，能及時為臨床提供病原學資料，為兒童呼吸道感染的精準醫療提供依據，并對減少抗生素濫用也具有重要意義。

參考文獻

[1]于娟，李紅，饒華祥，等.流感高發季節150例流感病毒核酸陰性的流感樣病例鼻咽分泌物呼吸道病毒檢測分析[J].山東醫藥，2018，58（31）：40-43.

[2]韓歡，古今剛，吳文文，等.11744例兒童7項呼吸道病毒抗原檢測結果[J].武漢大學學報（醫學版），2019，40（3）：425-428.

[3]陳文華，何寶明，毋崇嶺.住院患兒呼吸道病毒感染檢測結果分析[J].山西醫藥雜志，2018，47（20）：2478-2480.

[4]楊麗華，張清慧，吳毅凌，等.上海市松江地區急性上呼吸道感染患兒呼吸道病毒感染研究[J].國際病毒學雜志，2017，24（6）：388-393.

作者簡介：華純芳（1981.11-），女，本科學歷，主管技師，研究方向：醫學檢驗臨床免疫學。