復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠治療老年慢性牙周炎療效及對齦溝液中人類刺猬因子蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶-8水平的影響

劉 陽，高秀秋

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院口腔科，遼寧 錦州 121000)

慢性牙周炎是臨床上十分常見的口腔疾病，在牙周炎患者中占比高達95%，該病是由于微生物(細(xì)菌)所誘發(fā)的一種牙周炎癥疾病，早期可表現(xiàn)為牙齦出血，隨著疾病進展可出現(xiàn)牙周松動、疼痛等癥狀，對生活質(zhì)量有較多不良影響[1]。老年人由于缺乏口腔保護意識，屬于慢性牙周炎的高發(fā)人群[2]。臨床上針對慢性牙周炎治療目的是徹底清除菌斑、牙石等刺激物，令牙周袋變淺、消除牙齦炎癥等，在牙齦炎癥的消除方式中需使用抗菌藥物，多選擇局部給予米諾環(huán)素、硝基咪唑類等藥物，也有研究發(fā)現(xiàn)，通過聯(lián)合用藥的抗菌方案，有助于進一步加強療效[3]。近年來的報道中指出，齦溝液中(Sonic hedgehog，Shh)蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase-8，MMP-8)均參與著牙周組織炎癥的發(fā)生和發(fā)展，對其的檢測在判斷慢性牙周炎的程度上有重要作用[4-5]。因此，本研究旨在探討復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠治療老年慢性牙周炎的療效，并觀察其對齦溝液中Shh蛋白、MMP-8水平的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年6-9月我院收治的100例老年慢性牙周炎患者進行研究，按照隨機數(shù)表法，分為研究組和對照組，每組分別有50例，兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《牙周病學(xué)》[6]中關(guān)于慢性牙周炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，病情為中重度；②口腔留牙>20顆，且至少有4顆牙齒健康、無齲齒、不良修復(fù)體、充填體等；③年齡≥60歲；④近3個月未接受過抗生素或其余抗炎藥物治療；⑤患者簽署研究知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其余嚴(yán)重軀體疾病、重要器官功能障礙等；②合并急慢性感染；③合并精神障礙性疾病，無法配合研究；④對本研究相關(guān)藥物具有過敏情況。本研究已經(jīng)過我院倫理委員會批準(zhǔn)實施。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 治療方法 兩組均給予慢性牙周炎的常規(guī)牙周基礎(chǔ)治療，包括口腔衛(wèi)生處理、齦上潔治和齦下刮治、根面平整等，并采用0.9%氯化鈉注射液及3%過氧化氫交替沖洗牙周袋，最大程度的去除局部致病因素；在上述基礎(chǔ)上，對照組給予2%米諾環(huán)素軟膏(批號H20150106，規(guī)格0.5 g/支)治療，取0.5～1.0 g的量于牙周袋緩慢注入，確保完整填滿、可包裹牙齒即可，1次/周。研究組給予復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠治療，該溫敏凝膠包含2%米諾環(huán)素和0.5%奧硝唑，取總量1.0 g的溫敏凝膠于牙周袋緩慢注入，確保完整填滿、可包裹牙齒即可，1次/周；兩組均持續(xù)治療4周。

1.3 療效判定 ①臨床療效[6]：于治療4周后進行評價，顯效：牙齦腫痛、出血等癥狀消失，牙周袋深度(Pocket depth，PD)較治療前減少程度>2 mm，或PD<3 mm，探診無出血；有效：牙齦腫痛、出血等癥狀明顯緩解，PD較治療前減少程度1～2 mm，探針無出血或者仍有少量出血；無效：未滿足上述標(biāo)準(zhǔn)，甚至有加重表現(xiàn)；總有效率=(顯效+有效)/總例數(shù)×100%。②牙周指標(biāo)[6]：對治療前及治療4周后的PD、牙菌斑指數(shù)(Plaque index，PLI)、齦溝出血指數(shù)(Sulcus bleeding index，SBI)、牙齦指數(shù)(Gingival index，GI)的情況予以評價。PD為牙齒和牙齦之間的齦溝深度；PLI主要評價牙面菌斑覆蓋厚度情況：3分表示菌斑已到達臨床牙冠頸的2/3以上，2分表示已到達1/3～2/3，1分表示<1/3，0分表示牙面無菌斑表現(xiàn)；SBI主要評價出血情況：3分表示齦炎、牙齦出血程度重，2分表示牙齦有自發(fā)性出血傾向，1分表示有輕度齦炎、齦緣充血表現(xiàn)，經(jīng)過探診有輕微的出血，0分表示牙齦無充血、水腫癥狀，探診沒有出血現(xiàn)象；GI主要評價牙齦顏色和質(zhì)地：3分表示有牙齦重度炎癥、紅腫、潰瘍，2分表示牙齦有明顯的炎癥、紅腫表現(xiàn)，但無潰瘍出血，1分表示牙齦炎癥較輕、牙齒顏色有改變，0分表示牙齦健康。③齦溝液指標(biāo)：于治療前及治療4周后時，使用Whatman 3MM的濾紙條收集患者齦溝液，直接將濾紙插入齦溝底部位，靜置30 s的時間，取出濾紙置于齦溝液測量儀(美國 Oraflow Periotron 8000型)進行測量，將結(jié)果換算成體積后，再將濾紙條置于250 ml的磷酸鹽緩沖液(Phosphate buffer，PBS)中震蕩處理4 min，上離心機，轉(zhuǎn)速3000 r/min，時間10 min，收集上清液，最終儲存于-80 ℃的冷凍箱中待檢，齦溝液Shh蛋白、MMP-8水平的檢測均采用上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司所提供的酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒進行。

1.4 觀察指標(biāo) 記錄治療4周后臨床療效、治療前及治療4周后牙周指標(biāo)(PD、PLI、SBI、GI)、齦溝液Shh蛋白、MMP-8水平的結(jié)果，并記錄治療期間的相關(guān)不良反應(yīng)(局部刺激、疼痛、胃腸道反應(yīng))的相關(guān)情況。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者臨床療效情況比較 研究組的總有效率為96.00%，對照組為82.00%，研究組結(jié)果明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.2 兩組患者牙周指標(biāo)情況比較 治療4周后，兩組患者的牙周指標(biāo)PD、PLI、SBI、GI和治療前比較均明顯降低，且研究組結(jié)果均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表2 兩組患者臨床療效情況比較[例(%)]

表3 兩組患者牙周指標(biāo)情況比較

2.3 兩組患者齦溝液中Shh蛋白、MMP-8水平情況比較 治療4周后，兩組患者齦溝液中Shh蛋白、MMP-8水平和治療前比較均明顯降低，且研究組結(jié)果均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表4 兩組患者齦溝液中Shh蛋白、 MMP-8水平情況比較(ng/ml)

2.4 兩組患者不良反應(yīng)情況比較 治療期間，兩組不良反應(yīng)情況對比顯示，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表5。

表5 兩組患者不良反應(yīng)情況比較[例(%)]

3 討 論

慢性牙周炎在老年人中具有較高的發(fā)病率，慢性牙周炎的發(fā)生不僅會對牙周組織、結(jié)構(gòu)造成破壞，嚴(yán)重的甚至造成牙齒脫落，影響到日常生活質(zhì)量[7]。牙周基礎(chǔ)治療是該病的常用治療手段，主要是采用清潔、平整等機械方式，但難以有效的清除牙根面的菌斑和牙周袋深處部位的細(xì)菌，極易導(dǎo)致細(xì)菌再次侵襲，此時抗生素的使用則顯得極為重要[8-9]。米諾環(huán)素是代表性的四環(huán)類抗生素，具有廣譜的抗菌效應(yīng)，主要是通過對病微生物細(xì)胞壁產(chǎn)生破壞作用，并對其蛋白質(zhì)或者DNA的合成過程予以阻斷，起到發(fā)揮抗菌效果[10]。但在慢性牙周炎患者中，牙周袋中的菌斑成分主要為革蘭陽性、兼性厭氧菌，單獨使用米諾環(huán)素對厭氧菌的作用效果有局限性[11]。奧硝唑是中硝基咪唑類抗生素，其對厭氧菌有著廣譜的抗菌效果，其分子中的硝基可進入到病菌中，將致病菌轉(zhuǎn)化成為氨基，并對其DNA合成產(chǎn)生抑制作用，產(chǎn)生抗菌作用[12]。劉曉靜等[13]實驗發(fā)現(xiàn)，通過將米諾環(huán)素及奧硝唑相互聯(lián)合，可明顯提高對慢性牙周炎患者的治療效果。

Shh蛋白又被稱作是刺猬因子，其信號通路在急慢性炎癥反應(yīng)過程中的作用也備受臨床學(xué)者關(guān)注。有研究發(fā)現(xiàn)，在慢性牙周炎患者中，齦溝液中Shh蛋白的表達明顯比健康人群高，主要機制是在炎癥的刺激下，Sonic Hedghog信號通路會出現(xiàn)激活，導(dǎo)致Shh蛋白水平的升高，且隨著局部炎癥反應(yīng)的加重，這種升高程度會更明顯[14]。MMP-8又被稱作是中性粒細(xì)胞膠原酶，對其的檢測有助于反應(yīng)機體組織損傷程度，當(dāng)牙周組織出現(xiàn)炎癥反應(yīng)時，MMP-8的表達可出現(xiàn)大量釋放，并對牙周結(jié)締組織造成破壞作用，致使牙周附著喪失，并對牙槽骨的吸收產(chǎn)生影響[15]。

本研究所使用的復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠主要成分由米諾環(huán)素和奧硝唑組成，并加入溫敏凝膠制成凝膠質(zhì)地，結(jié)果顯示，采用復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠的患者PD、PLI、SBI、GI及齦溝液中Shh蛋白、MMP-8水平的降低程度上明顯優(yōu)于使用米諾環(huán)素軟膏的患者，且臨床療效高達96.00%，明顯更具有優(yōu)勢，在復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠中，米諾環(huán)素和奧硝唑兩者發(fā)揮相互協(xié)同作用，聯(lián)合加強了抗菌、抗炎效果，且通過口腔局部給藥的方式，可在牙齦部位產(chǎn)生直接作用，藥物在病變組織可保證長時間的濃度效應(yīng)，進一步緩解局部炎癥反應(yīng)，提高臨床療效。此外，溫敏凝膠作為一種小分子凝膠，和米諾環(huán)素軟膏的高分子成分相比，對皮膚和黏膜的刺激更小，在本研究中使用復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠的患者均無局部刺激、疼痛的現(xiàn)象，但在總體的不良反應(yīng)比較上差異無統(tǒng)計學(xué)意義，考慮和樣本量過少相關(guān)。但慢性牙周炎屬于一種容易復(fù)發(fā)的疾病，由于時間限制，本研究未持續(xù)觀察兩組遠期復(fù)發(fā)情況的差異，此后也將持續(xù)深入研究。

綜上所述，復(fù)方米諾環(huán)素奧硝唑溫敏凝膠治療老年慢性牙周炎的療效顯著，可有效改善牙周指標(biāo)、降低齦溝液中Shh蛋白、MMP-8水平的表達。