玻璃體MCP-1、HMGB1表達與眼外傷患者炎癥反應(yīng)及病情程度的關(guān)系

張麗

(陜西省友誼醫(yī)院眼科,陜西 西安 710068)

眼外傷是視功能損害的主要原因之一，在一定程度上可造成眼球結(jié)構(gòu)和功能的損害，嚴(yán)重者不僅致殘，甚至喪失勞動能力，其中眼內(nèi)炎是眼外傷后最嚴(yán)重的一種并發(fā)癥[1]。有研究顯示，部分眼外傷患者雖然存在明顯的眼內(nèi)炎癥，但病原菌培養(yǎng)結(jié)果卻為陰性，提示還有其他因素參與了外傷后眼內(nèi)炎癥的發(fā)展[2]。高遷移率族蛋白1(High mobility group prorein box 1 protein，HMGB1)是機械性創(chuàng)傷、細菌感染、自身免疫性疾病相關(guān)炎癥反應(yīng)中重要的調(diào)節(jié)因子，但在眼外傷炎癥反應(yīng)中的作用尚不明確[3]。單核細胞趨化因子-1(Monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)可趨化和激活單核細胞，調(diào)節(jié)炎性細胞因子的合成，參與炎癥反應(yīng)。本研究旨在分析玻璃體MCP-1、HMGB1表達與眼外傷患者眼內(nèi)炎癥反應(yīng)及病情程度的關(guān)聯(lián)性，報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年8月至2019年10月我院92例眼外傷患者為觀察組，同期需采取標(biāo)準(zhǔn)三切口玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)的68例特發(fā)性黃斑裂孔患者為對照組。觀察組男52例，女40例，平均年齡(36.67±9.05)歲，合并癥：冠心病4例，高血壓2例，糖尿病14例，高脂血癥11例；發(fā)病前最佳矯正視力：1.0 23例，1.5 57例，≥2.0 12例；患病側(cè)：左側(cè)39例，右側(cè)53例。對照組男37例，女31例，平均年齡(37.11±8.74)歲，合并癥：冠心病2例，高血壓1例，糖尿病12例，高脂血癥9例；發(fā)病前最佳矯正視力：1.0 15例，1.5 40例，≥2.0 13例；患病側(cè)：左側(cè)31例，右側(cè)37例。納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組均有明確的眼外傷史，并經(jīng)眼B超、裂隙燈顯微鏡等檢查確診為開放性眼外傷者；需行眼內(nèi)容物摘除或標(biāo)準(zhǔn)三通道玻璃體切除術(shù)者；年齡≥18歲；單側(cè)發(fā)病；以往無眼部手術(shù)史；無其他系統(tǒng)感染類疾病；生命體征平穩(wěn)；凝血4項檢查無明顯異常；術(shù)前患眼均未接受過視網(wǎng)膜激光光凝治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：腎肺等重要臟器功能不全者；精神疾病者；存在自身免疫疾病者；單純淚小管斷裂、眼瞼裂傷，未累及眼球者。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會審核通過，患者知情同意。

1.2方法 (1)玻璃體MCP-1、HMGB1檢測：行玻璃體切割手術(shù)者于術(shù)中采集玻璃體標(biāo)本，行眼內(nèi)容物或眼球摘除患者通過注射器穿刺眼球壁，抽取中央玻璃體0.4 ml左右。采集的標(biāo)本3 000 r/min離心5 min，分離上清，通過上海晶抗生物工程有限公司酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒檢測HMGB1表達，通過上海康朗生物科技有限公司酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒檢測MCP-1表達。(2)病情評估通過眼外傷評分系統(tǒng)(Ocular trauma score，OTS)評估，包括初始視力、破裂傷、眼內(nèi)炎等，0～44分為OTS 1級，45～65分為OTS 2級，66～80分為OTS 3級，81～91分為OTS 4級，92～100分為5級，OTS評分越低眼外傷越嚴(yán)重。(3)炎癥因子檢測：均于治療前采集肘部靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min，采用廣東體必康生物科技有限公司酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒檢測血清干擾素-γ(Interferon-γ，IFN-γ)水平，采用上海瑞番生物科技有限公司酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒檢測血清白細胞介素-17(Interleukin-17，IL-17)、白細胞介素-12(Interleukin-2，IL-2)表達。

1.3觀察指標(biāo) 比較2組玻璃體MCP-1、HMGB1表達；統(tǒng)計觀察組OTS分級構(gòu)成情況；比較觀察組不同OTS分級患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達；比較觀察組有無眼內(nèi)異物患者玻璃體MCP-1、HMGB1、血清炎癥因子(IFN-γ、IL-17、IL-2)表達；分析眼外傷患者玻璃體MCP-1、HMGB1與血清炎癥因子表達相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.12組患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達 觀察組玻璃體MCP-1、HMGB1表達高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達比較

2.2觀察組OTS分級 觀察組OTS評分為20～78分，平均為(41.86±7.82)分，具體OTS分級，見表2。

表2 觀察組OTS分級構(gòu)成情況

2.3不同OTS分級 患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達 隨OTS分級惡化，患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達逐漸增高(P<0.05)。見表3。

表3 觀察組不同OTS分級患者玻璃體MCP-1、HMGB1表達比較

2.4有無眼內(nèi)異物患者玻璃體MCP-1、HMGB1、血清炎癥因子表達 觀察組有眼內(nèi)異物患者玻璃體MCP-1、HMGB1、血清IFN-γ、IL-17、IL-2水平高于無眼內(nèi)異物患者(P<0.05)。見表4。

表4 觀察組有無眼內(nèi)異物患者玻璃體MCP-1、HMGB1、血清炎癥因子表達比較

2.5眼外傷患者玻璃體MCP-1、HMGB1與血清炎癥因子表達相關(guān)性 眼外傷患者玻璃體MCP-1、HMGB1與血清IFN-γ、IL-17、IL-2水平呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 眼外傷患者玻璃體MCP-1、HMGB1與血清炎癥因子表達相關(guān)性

3 討 論

HMGB1是一類DNA結(jié)合非組蛋白，可穩(wěn)定染色質(zhì)、維持核小體結(jié)構(gòu)、參與DNA重組、調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄等，是一種重要的損傷相關(guān)分子模式[4]。Zhang W等[5]研究指出，下調(diào)HMGB1表達可降低高血糖誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜炎癥反應(yīng)，說明HMGB1可調(diào)控眼部的炎癥反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示，觀察組玻璃體HMGB1表達高于對照組，且隨OTS分級惡化，玻璃體MCP-1、HMGB1表達逐漸增高，提示HMGB1與眼外傷及其病情嚴(yán)重程度有關(guān)，可為臨床治療、評估病情及預(yù)后等提供重要的參考信息。HMGB1正常情況下存在于細胞核內(nèi)，當(dāng)內(nèi)源性組織損傷或外源性病原體入侵時，可由壞死細胞或機械損傷細胞被動釋放，故眼外傷后表達升高，且損傷的眼組織可引起炎癥反應(yīng)，激活巨噬細胞、樹突狀細胞主動分泌HMGB1，并作為應(yīng)激信號與炎癥介質(zhì)釋放至細胞外，引發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)，所以與眼外傷患者病情有關(guān)[6]。眼內(nèi)異物占開放性眼外傷的18%～41%，常伴有玻璃體積血、角鞏膜裂傷等并發(fā)癥，基于異物生物學(xué)效應(yīng)，可刺激IFN-γ、IL-17、IL-2等炎癥因子合成分泌，嚴(yán)重時可引起前房積膿、化膿性眼內(nèi)炎等，造成視力障礙。本研究且玻璃體HMGB1與血清IFN-γ、IL-17、IL-2水平呈顯著正相關(guān)，提示HMGB1與炎癥因子間可相互影響，進一步加重炎癥反應(yīng)，因此臨床在處理眼外傷患者時，不僅應(yīng)重視引起炎癥反應(yīng)的炎性細胞因子的控制，還應(yīng)注意HMGB1等對炎癥反應(yīng)的間接調(diào)控作用。

MCP-1系趨化因子家族主要成員之一，主要由內(nèi)皮細胞、巨噬細胞、單核細胞等合成和分泌。本研究顯示，觀察組玻璃體MCP-1表達高于對照組，隨OTS分級惡化，患者玻璃體MCP-1表達逐漸增高，表明MCP-1與眼外傷及患者的病情有關(guān)。MCP-1是一種具有多種生物學(xué)功能的趨化因子：(1)眼外傷后，MCP-1能趨化單核巨噬細胞至損傷及炎癥部位，介導(dǎo)溶酶體酶的釋放，氧自由基、蛋白酶等被大量釋放，引起眼內(nèi)明顯的炎癥反應(yīng)[7]；(2)MCP-1能通過調(diào)控單核細胞表面的粘附分子的表達，造成局部炎癥級聯(lián)放大，加速炎癥反應(yīng)進程[8]；(3)MCP-1能通過分泌轉(zhuǎn)化生長因子等，介導(dǎo)眼內(nèi)組織纖維化，加重眼組織與視力損害[9]。故與眼外傷及患者病情有關(guān)。同時本研究還發(fā)現(xiàn)，MCP-12與血清IFN-γ、IL-17、IL-2水平呈顯著正相關(guān)，提示MCP-12與炎癥因子可相關(guān)影響，可能是炎癥反應(yīng)加重的一個影響因素，抑制MCP-12表達可能為眼外傷后局部炎癥反應(yīng)的控制提供了一個新思路，這可為臨床深入了解眼外傷后炎癥反應(yīng)機制、炎癥反應(yīng)的控制、針對性藥物的研制等提供參考信息。本研究不足之處在于，雖明確了玻璃體MCP-1、HMGB1表達在眼外傷患者炎癥反應(yīng)及病情中的價值，但尚未直接證實上調(diào)或沉默MCP-1、HMGB1表達是否能為眼外傷患者預(yù)后的改善帶來切實益處，仍有待后續(xù)基礎(chǔ)實驗的驗證、完善。

綜上所述，MCP-1、HMGB1在眼外傷患者中呈高表達，并與炎癥反應(yīng)、病情程度顯著相關(guān)。