高血壓病人MTHFR C677T基因多態(tài)性與血漿同型半胱氨酸水平的關(guān)系探討

高曉峰，趙俊琴，周 青，李建勇，王旭敏，張?jiān)丛矗?鑫，關(guān) 琴

高血壓和同型半胱氨酸(Hcy)升高是導(dǎo)致腦卒中發(fā)生的因素，二者具有協(xié)同作用，可增加腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。H型高血壓是指合并Hcy升高(Hcy≥10 μmol/L)的高血壓[1]，我國(guó)高血壓人群中H型高血壓病人約占75%，這可能是導(dǎo)致我國(guó)腦卒中持續(xù)高發(fā)的重要原因。因此，探討高血壓和Hcy升高是防控我國(guó)腦卒中持續(xù)高發(fā)的重要環(huán)節(jié)。本研究探討高血壓病人N5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)C677T基因類型及不同類型基因?qū)ρ獫{Hcy的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選自2018年1月—2019年12月在我院就診的高血壓病人1 340例，其中男790例，女550例；年齡19～91(59.34±13.05)歲。高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合2018年《中國(guó)高血壓防治指南》[2]制定的標(biāo)準(zhǔn)；收縮壓≥140 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)和(或)舒張壓≥90 mmHg。合并血漿Hcy升高(Hcy≥10 μmol/L)的原發(fā)性高血壓稱為高血壓合并高同型半胱氨酸血癥，其中H型高血壓組1 231例和非H型高血壓組109例。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重肝、腎疾病、內(nèi)分泌代謝疾病及半年內(nèi)已服用葉酸、維生素B6、維生素B12等病人。

1.2 觀察指標(biāo) 記錄所有病人性別、年齡、民族、吸煙史、飲酒史、合并癥、并發(fā)癥、既往史、血壓、體質(zhì)指數(shù)、各項(xiàng)生化指標(biāo)，心電圖和頭部CT、MRI。病人安靜休息15 min后，坐位測(cè)量上臂收縮壓、舒張壓3次，取平均值。根據(jù)糖尿病、冠心病、腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合病人病史及輔助檢查，確定有無(wú)合并糖尿病、冠心病、腦卒中。

1.3 檢測(cè)方法 MTHFR C677T基因檢測(cè)：采用EDTA抗凝采血管抽取2 mL靜脈血，提取、配液，使用Roche Applied Science Light Cycler480熒光PCR儀器擴(kuò)增，應(yīng)用PCR熒光探針?lè)ńY(jié)果判讀(使用深圳泰樂(lè)德醫(yī)療有限公司生產(chǎn)的MTHFR 677C/T檢測(cè)試劑盒)。血漿Hcy檢測(cè)：抽取清晨空腹肘靜脈血10 mL，離心取血漿以循環(huán)酶法日立7600全自動(dòng)生化儀測(cè)定(上海榮盛公司生產(chǎn)試劑盒)。常規(guī)血生化指標(biāo)測(cè)定：空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)。

2 結(jié) 果

2.1 高血壓病人基本特征(見表1)

2.2 不同性別高血壓病人血漿Hcy水平比較(見表2)

表2 不同性別高血壓病人血漿Hcy水平比較[M(P25，P75)] 單位：μmol/L

2.3 高血壓病人MTHFR C677T不同基因型Hcy水平比較 高血壓病人MTHFR C677T基因型有3種，分別為CC型、CT型、TT型。MTHFR C677T 3種不同基因類型病人測(cè)定的血漿Hcy水平不同。TT型病人血漿Hcy水平高于CC型和CT型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。詳見表3。

表3 高血壓病人MTHFR C677T不同基因型Hcy水平比較[M(P25，P75)] 單位：μmol/L

2.4 H型高血壓與非H型高血壓病人臨床資料比較(見表4)

表4 H型高血壓組與非H型高血壓組臨床資料比較

3 討 論

本研究結(jié)果顯示，H型高血壓在高血壓中占比為91.87%，高于全國(guó)平均水平；高血壓病人多數(shù)為H型高血壓，H型高血壓普遍存在。男性血漿Hcy水平高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與既往研究[3-5]結(jié)果一致。

本研究結(jié)果顯示，檢測(cè)1 340例高血壓病人MTHFR C677T基因類型，CC型275例，CT型647例，TT型418例。CC型血漿Hcy水平最低，TT型血漿Hcy水平最高，CT型血漿Hcy水平介于兩者之間；各種不同類型基因Hcy水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。Hcy是由蛋氨酸去甲基化后形成的一種含硫氨基酸。影響血漿Hcy水平因素較多，代謝過(guò)程中受MTHFR影響較大； MTHFR C677T突變后，如第677位點(diǎn)上胞嘧啶被胸腺嘧啶代替，即造成轉(zhuǎn)錄后丙氨酸被纈氨酸代替，可使變異的酶對(duì)熱不耐受而活性降低，進(jìn)而引起Hcy升高[6-7]。不同類型基因?qū)е缕渚幋a的相應(yīng)酶蛋白活性不同，從而影響其作用的代謝物轉(zhuǎn)化速率，因此，血漿Hcy水平隨之變化。本研究結(jié)果顯示，MTHFR為TT型病人Hcy水平高于CC型和CT型；本研究人群CC基因型比例為20.5%，是導(dǎo)致Hcy普遍升高主要原因之一。因此，純合突變TT型對(duì)病人Hcy影響最大，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注和干預(yù)。

高同型半胱氨酸血癥是動(dòng)脈硬化和血管相關(guān)事件發(fā)生的危險(xiǎn)因素，可損害血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起血管內(nèi)皮功能紊亂，脂質(zhì)過(guò)氧化，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成；刺激動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞過(guò)度增生，促進(jìn)平滑肌老化、組織纖維化及硬化，引起動(dòng)脈硬化形成；增高血小板黏附與聚集，促進(jìn)血栓形成，導(dǎo)致心腦血管血栓事件增加。

本研究結(jié)果表明，H型高血壓患病率增高，高血壓病人出現(xiàn)高同型半胱氨酸血癥比例(91.87%)遠(yuǎn)高于合并糖尿病、高脂血癥比例。本研究實(shí)現(xiàn)了Hcy代謝途徑相關(guān)酶MTHFR C677T基因分型檢測(cè)和臨床分型；明確TT型基因在高Hcy中的作用大于CC型和CT型，是形成H型高血壓的原因之一。臨床可根據(jù)不同基因型預(yù)測(cè)病人Hcy水平，為精準(zhǔn)個(gè)體化干預(yù)提供依據(jù)，給予針對(duì)性防控，進(jìn)而降低心腦血管疾病事件發(fā)生率。