《實驗動物與比較醫(yī)學(xué)》創(chuàng)刊40年重點文獻(xiàn)回顧（續(xù)）

高 誠

1. 上海實驗動物研究中心，上海 201203；2. 上海市實驗動物學(xué)會，上海 200025；3. 《實驗動物與比較醫(yī)學(xué)》編輯部，上海 201203

3 飼料

飼料關(guān)乎實驗動物質(zhì)量和福利。從實驗動物全價飼料研發(fā)、耐高溫高壓配方，到營養(yǎng)全面且適口性好、特殊實驗動物模型飼料的研制應(yīng)用，歷經(jīng)了兩代實驗動物科學(xué)工作者的共同努力。本節(jié)簡述刊登在本刊的相關(guān)論文。

1981年，王楠田等[141]對青紫藍(lán)實驗兔的飼料配方中應(yīng)用脫水蔬菜的飼養(yǎng)效果進(jìn)行了觀察比較（顆粒或混合粉料），探討了飼料中粗纖維和蛋白質(zhì)的比例；此后對飼料配方進(jìn)行改進(jìn)，飼喂青紫藍(lán)和大耳白的育成兔，初步獲得了滿意效果[142]；然后用不同配方飼喂繁殖雌兔，肯定了脫水蔬菜在飼料中的作用并推廣應(yīng)用[143]。1982年，胡開元[144]采用該飼料飼育實驗兔獲得滿意的效果。經(jīng)過兩年多的努力，集上海實驗動物行業(yè)之力的實驗兔顆粒飼料終獲成功，生產(chǎn)200余萬斤，大大降低了幼兔死亡率（小于1.5%），并且節(jié)約原料，降低成本，提高了實驗兔的質(zhì)量[145]。1983年，李錦銘等[146]、薛逸禎等[147]和王志榮[148]也確認(rèn)了飼喂全價顆粒飼料的效果，并分別對成本、加工工藝、儲存、飼喂方式等方面的進(jìn)一步完善等提出了評價和建議。另外，林吉強(qiáng)等[149]和舒家模等[150]用顆粒飼料對新西蘭兔的生長和繁殖進(jìn)行了詳細(xì)和長期的觀察，均獲得滿意的結(jié)果。蔡亞[151]還就家兔骨折實驗中使用全價營養(yǎng)顆粒料的重要性，從骨折修復(fù)、增重和對麻醉藥的反應(yīng)做了評價；邱志方等[152]對實驗兔飼喂顆粒飼料前后進(jìn)行了比較，提出需要專業(yè)生產(chǎn)和檢測以保證質(zhì)量。從1979至1981年，上海實驗動物科學(xué)界前輩歷時兩年，協(xié)力攻關(guān)，初步研制成功具有劃時代意義的實驗兔全價顆粒飼料，其中的艱辛和喜悅，唯有親歷者才深有體會。1984年，王楠田等[153]對不同日齡家兔消化加有脫水蔬菜的顆粒料的效能進(jìn)行了比較。至此，實驗兔的全價飼料研制基本完成，并開始了飼料的標(biāo)準(zhǔn)化、社會化和為特殊模型制作，結(jié)束了長期以來實驗兔飼養(yǎng)需要飼喂青綠飼料的歷史，解決了實驗兔飼養(yǎng)中經(jīng)常發(fā)生腹瀉等難題。

在實驗兔顆粒飼料研制的基礎(chǔ)上，1983年，舒家模等[154]初報了犬用顆粒料的研制，解決了適口性和因水分含量高不易保存的問題。3年后，舒家模等[155]研制了犬全價營養(yǎng)膨化顆粒飼料（SDF系列產(chǎn)品），試驗17個月，對消化試驗的育成犬進(jìn)行了胃鏡檢查，比較了繁殖效果，檢測了公犬的精液品質(zhì)，分析了母犬的乳汁營養(yǎng)成分，比較了仔犬的生長和體質(zhì)量，測定了犬的血液生化指標(biāo)，詳細(xì)分析了原料和膨化料的營養(yǎng)成分；1986年7月該飼料通過成果鑒定。至1986年，上海地區(qū)主要實驗動物大鼠、小鼠、倉鼠、兔和犬均有了標(biāo)準(zhǔn)化飼料[156]。1987年，朱欽龍[157]報告獼猴全價膨化飼料通過部級鑒定。由于地區(qū)發(fā)展的不平衡，且科學(xué)發(fā)展永無止境，后續(xù)還有一些相關(guān)報道。1990年，長春生物所唐靜敏等[158]對兩種不同配方的金黃倉鼠飼料進(jìn)行了繁育效果的實驗觀察，發(fā)現(xiàn)飼料配方中加入苜蓿粉并停喂蔬菜可以解決因腹瀉造成的死亡。1991年，上海生物所劉連生等[159]用全價顆粒飼料對普通級、清潔級和SPF金黃倉鼠的生產(chǎn)、繁殖進(jìn)行了觀察比較，獲得了滿意的結(jié)果；小鼠、倉鼠全價營養(yǎng)顆粒飼料及其標(biāo)準(zhǔn)通過專家鑒定[160]。1994年，江西醫(yī)學(xué)實驗動物中心羅厚良等[161]研制了實驗大鼠、小鼠全價顆粒飼料。

1987年，王兆綽等[162]比較了高壓滅菌和60Co輻照滅菌飼料的微生物、營養(yǎng)成分和飼喂效果，認(rèn)為輻照飼料好于高壓滅菌飼料。1988年，王四旺等[163]分析比較了8個劑量輻照對飼料營養(yǎng)成分的影響，認(rèn)為劑量小于1Mrad（100 rad= 1 Gy）較好。1995年，張周等[164]用60Co-γ射線輻照滅菌大鼠與小鼠飼料，對輻照后飼料營養(yǎng)成分、有效保存期和飼喂效果進(jìn)行了比較，結(jié)果認(rèn)為輻照滅菌飼料的方法值得推廣。2000年，梁永利等[165]用0.5 Mrad60Co輻照飼料與高壓滅菌飼料、不輻照不高壓處理飼料進(jìn)行比較，觀察了3種飼料對新西蘭兔繁育生長的影響，結(jié)果表明輻照飼料最好。同年，陳國強(qiáng)[166]報告了標(biāo)準(zhǔn)化的60Co輻照滅菌實驗動物系列全價顆粒飼料。2001年，周正宇等[167]比較了7個劑量60Co輻照對大鼠、小鼠飼料的影響，認(rèn)為25 kGy劑量以上的輻照飼料可保存120 d。輻照技術(shù)在實驗動物飼料滅菌中的應(yīng)用減輕了高溫高壓滅菌對飼料營養(yǎng)成分（特別是維生素類成分）的破壞程度。

4 籠器具和飼育設(shè)備

1982年，薛逸禎等[168]以塑料飼育盒和土制瓦罐對小鼠的繁殖效果進(jìn)行了12個月的比較觀察，結(jié)果表明，塑料飼育盒能夠耐高溫高壓，耐腐蝕，在人工控制普通環(huán)境中可保持高產(chǎn)繁殖性能。土制瓦罐缺點很多，如笨重易碎、清潔消毒不方便、吸異味（時間久了很臭）、不能套疊存放占空間、操作者勞動強(qiáng)度大且易患手指和腕關(guān)節(jié)肌腱炎等。

1984年，陳天培等[169]研制了塑料薄膜無菌隔離器，并對工藝的關(guān)鍵點做了闡述，將國產(chǎn)塑料薄膜與日本相應(yīng)產(chǎn)品、國產(chǎn)過濾材料與美國的做了比較；在隔離器無菌隔離性能測試的基礎(chǔ)上，飼養(yǎng)SPF裸小鼠和純種小鼠、無菌小鼠一年多，經(jīng)微生物學(xué)監(jiān)測，均符合無菌要求。國產(chǎn)塑料薄膜隔離器的研制成功，為隨后我國的無菌動物和悉生動物研究奠定了基礎(chǔ)。

之后，隨著國內(nèi)對高質(zhì)量實驗動物的要求迫切，各機(jī)構(gòu)轉(zhuǎn)而研發(fā)成本相對較低、操作方便，又能一定程度上滿足微生物控制要求的層流架。1988年，楊祖循等[170]詳細(xì)介紹了超凈空氣層流架的研制和應(yīng)用，包括主要技術(shù)和部件、與國外同類產(chǎn)品的比較、實用性能數(shù)據(jù)、微生物檢測等。同年，姚明等[171]開展了層流架生物學(xué)檢測和應(yīng)用研究；姚一康等[172]探討了層流架飼育SPF小鼠的可行性；王沄等[173]觀察了層流架飼育小鼠的生物學(xué)指標(biāo)；劉全海[174]報告，雙面中立式層流架通過了鑒定。1989年，陸志剛等[175]對無菌小鼠微生物污染做了監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)傳遞窗開啟頻度導(dǎo)致的污染率為12.4%，而使用空氣預(yù)過濾器后污染率僅占1.32%。由于層流架在微生物控制等方面存在缺陷，該設(shè)備未能推廣使用。

1980年代，美國Thoren Maximiser公司研發(fā)并生產(chǎn)了首臺獨(dú)立通風(fēng)換氣籠（individual ventilated cages，IVC）。21世紀(jì)初，實驗大鼠、小鼠IVC開始在國內(nèi)逐步得到應(yīng)用并發(fā)展。2003年，丁雋等[176]對IVC和層流架中2個品系的小鼠生長發(fā)育性能進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示IVC 優(yōu)于層流架。同年，顧鋒等[177]測試不同濃度過氧乙酸對IVC的滅菌效果，結(jié)果是0.5%的過氧乙酸處理IVC 12 h以上即可達(dá)到要求。2004年，Bantin[178]比較了塑料薄膜隔離器和IVC的應(yīng)用效果，認(rèn)為隔離器有其優(yōu)勢。同年，施正良等[179]報告，采用國產(chǎn)IVC飼養(yǎng)裸小鼠并進(jìn)行了停電24 h試驗，結(jié)果顯示4只/盒均存活。高文婷等[180]對IVC環(huán)境下的裸小鼠繁育、生長發(fā)育進(jìn)行了觀察，效果良好。敖紅等[181]在IVC建立大鼠肝臟誘癌模型獲得成功。2013年，梁春南等[182]對IVC的兼容性、品質(zhì)和服務(wù)與價格進(jìn)行了較為系統(tǒng)的評估。2015年，孔麗娟等[183]對高校的IVC動物實驗室的管理制度作了初步的探討。2017年，王貴平等[184]對排氣通風(fēng)籠具（exhaust ventilated closed-system cage rack，簡稱EVC）的微環(huán)境進(jìn)行了物理參數(shù)和化學(xué)參數(shù)（氨濃度）的動態(tài)檢測。IVC在國內(nèi)的廣泛應(yīng)用，使國內(nèi)實驗大鼠、小鼠的生產(chǎn)和動物實驗更加高效和安全。

5 標(biāo)準(zhǔn)化和實驗動物管理

1983年，皇甫在[185]詳細(xì)探討了SPF小鼠質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，側(cè)重于微生物學(xué)的病原體檢測。1992年，上海市技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布上海市地方標(biāo)準(zhǔn)《實驗動物全價營養(yǎng)飼料》（標(biāo)準(zhǔn)號：DB31/67-92），這是我國實驗動物科學(xué)領(lǐng)域的第一個地方標(biāo)準(zhǔn)[186]。1994年，雜志簡介了上海市地方標(biāo)準(zhǔn)《實驗動物環(huán)境及設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)》[187]。1995年，上海市科委頒布并實施了《上海市實驗動物合格證管理暫行辦法》[188]。1996年，穆正明等[189]探討了江蘇省實驗動物籠器具質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和現(xiàn)狀，對籠具、籠架、水瓶、層流架和檢測方法做了詳細(xì)的闡述。1995年上海市地方標(biāo)準(zhǔn)《實驗用犬微生物學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》頒布實施[190]。2019年，續(xù)國強(qiáng)等[191]詳細(xì)探討了以微衛(wèi)星位點為檢測方法，建立近交系中國倉鼠遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。2020年，陶凌云等[192]總結(jié)比較了現(xiàn)階段國內(nèi)外大鼠、小鼠病原體檢測標(biāo)準(zhǔn)。

1980年代末，國內(nèi)實驗動物學(xué)界就開始關(guān)注信息技術(shù)（IT）與實驗動物科學(xué)的結(jié)合。1988年，陳靈等[193]探討了實驗動物管理計算機(jī)化，對近交系小鼠的基因位點和下頜骨形態(tài)測量值進(jìn)行電腦處理。1990年，孫魯洪等[194]編制了專用程序，建立實驗動物繁殖資料數(shù)據(jù)庫，并編制遺傳譜系。同年，李小青[195]探討了微機(jī)用于SPF大鼠、小鼠生產(chǎn)管理的可行性。黃幗英等[196]編制了“近交系小鼠繁殖譜系管理”程序，為選種提供數(shù)據(jù)。2000年，薛成等[197]采用ASP（active serve page）技術(shù)實現(xiàn)廣東省實驗動物信息網(wǎng)的技術(shù)更新。2008年，賀爭鳴等[198]按照科技部要求，提出了實驗動物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)化表達(dá)的規(guī)范化數(shù)據(jù)共享。2009年，和占龍等[199]開發(fā)了靈長類動物生產(chǎn)管理信息系統(tǒng)軟件。2011年，孫琪華等[200]嘗試將實驗動物動態(tài)信息與財務(wù)信息管理一體化。2014年，陳穎等[201]將大鼠、小鼠、豚鼠、兔、犬和猴六種常用實驗動物多種光鏡下的組織圖片建立了共享數(shù)據(jù)庫。2015年，陳繼猛等[202]較詳細(xì)地介紹了已開發(fā)的實驗動物管理系統(tǒng)軟件，包括模塊、技術(shù)特點和應(yīng)用體會。2016年，顧祖曦等[203]介紹了已開發(fā)的動物實驗信息化管理系統(tǒng)軟件，側(cè)重于模塊分布。2017年，余琛琳等[204]初步探索了實驗動物從業(yè)人員遠(yuǎn)程培訓(xùn)考核體系，指出這一體系還有待于進(jìn)一步細(xì)化和完善。另外，2017年，鄧威等[205]采用3D打印多孔鈦材料修復(fù)兔股骨髁骨缺損，具有良好的生物相容性，為臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)；芮敏等[206]用3月齡和6月齡新西蘭兔橈骨經(jīng)CT掃描后進(jìn)行三維重建并對參數(shù)測量，探討兔橈骨解剖學(xué)參數(shù)間的相關(guān)性。2019年，徐孝平等[207]開發(fā)了基于瀏覽器/服務(wù)器模式架構(gòu)的高校動物實驗管理系統(tǒng)。

國內(nèi)實驗動物機(jī)構(gòu)國家認(rèn)可始于2018年，迄今已有10家機(jī)構(gòu)獲得認(rèn)可（北京7家，成都、昆明和上海各1家）；實驗動物機(jī)構(gòu)認(rèn)可工作的依據(jù)文件始于2011年的科技部項目。2012年，史光華等[208]比較了國內(nèi)外管理現(xiàn)狀，深刻思考了我國實驗動物機(jī)構(gòu)認(rèn)可的工作，為實驗動物機(jī)構(gòu)管理水平接軌國際奠定了基礎(chǔ)。

時值雜志創(chuàng)刊40周年之際，本文梳理了在本刊已發(fā)表的、具有一定創(chuàng)新性的論文。由于筆者考慮的方方面面與部分讀者可能不一，肯定還有遺漏或沒有選中的創(chuàng)新性論文。凡事沒有絕對，但我已盡力，至少引用的每篇論文均已仔細(xì)拜讀過。所以，撰寫此文一方面是回溯、整理和分享，另一方面也是致敬為我國40年實驗動物科學(xué)發(fā)展做出貢獻(xiàn)的學(xué)者和作者！

致謝：感謝同事張俊彥、富群華和王偉民提供了雜志的總目錄和相關(guān)論文資料，徐平教授審閱了本稿并提出寶貴意見，謹(jǐn)致謝意！