Wnt1與WT1在卵巢癌中的表達及臨床意義

裴 越，劉盈盈，孫森森，付 莉，呂榮榮，張鳳舜

(吉林大學第二醫院 婦產科，吉林 長春130041)

Wnt的激活已經在乳腺、肺、結直腸和造血系統惡性腫瘤中被觀察到，并與腫瘤的復發相關[1]。其中，Wnt1蛋白是一種分泌信號蛋白，結合卷曲體受體(FZD)和協同受體低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP5),啟動Wnt信號通路[2]。Wilms’tumour(WT1)在成人腫瘤中廣泛表達，包括來自上皮、間充質、造血和神經元組織。哺乳動物WT1基因長度為50 kb，編碼多達10個外顯子的蛋白質。至少有36種潛在的哺乳動物WT1亞型，其多樣性是通過替代轉錄起始位點、翻譯起始位點、剪接和RNA編輯的組合而產生的[3]。Carter.等[4]對196例卵巢腫瘤進行研究，結果表示WT1與卵巢腫瘤類型、分級、FIGO分期及患者生存相關。本研究探討卵巢癌、正常卵巢組織中Wnt1蛋白及WT1陽性表達及臨床意義。為今后臨床檢測卵巢癌提供新思路。

1 資料和方法

1.1 研究對象

收集 2019年6月至2020年6月于吉林大學第二醫院就診的34例卵巢癌患者作為研究對象，同時取因子宮肌瘤行全子宮、雙附件切除術患者的正常卵巢組織10例，作為對照組，年齡為 43-73歲。所有患者均接受手術治療并經病理確診，其中漿液性癌 24 例，黏液性癌 2例，透明細胞癌 4例，子宮內膜樣癌3 例，未分化癌1例，且均未接受放療、化療及其他抗腫瘤治療;所有患者均未合并其他原發性腫瘤。患者按(FIGO，2014) 標準進行手術-病理分期，其中Ⅰ期4例，Ⅱ期12例，Ⅲ期17例，Ⅳ期1 例;按是否伴有淋巴結轉移進行分組，其中淋巴結轉移組8例，無淋巴轉移組17例。本研究已通過我院倫理委員會審批。

1.2 方法

1.2.1免疫組化檢測Wnt1、WT1表達情況 按照說明書，采用免疫組化(SP) 法觀察Wnt1 、WT1陽性反應情況。試劑由Immunoway公司提供。比較不同年齡、手術-病理分期、病理學分組、淋巴結轉移情況時Wnt1、WT1表達陽性率(計算公式為Wnt1表達陽性例數÷總例數×100%) 。

1.2.2統計學方法 應用SPSS22.0軟件進行χ2檢驗、計算P值，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 Wnt1和WT1在正常卵巢及卵巢癌組織中表達和比較卵巢癌組織中 Wnt1 和WT1的陽性率均顯著高于正常卵巢組織(表1) 。Wnt1卵巢癌組與正常卵巢組差異無統計學意義(P>0.05)，WT1表達卵巢癌組與正常卵巢組差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 不同卵巢組織中Wnt1、WT1表達情況

2.2 卵巢癌組織 Wnt1與卵巢癌臨床病理特征間的關系免疫組化染色后，鏡下可見Wnt1 陽性細胞質與細胞核呈棕黃色染色，不同年齡的卵巢癌患者Wnt1蛋白相對表達量差異無統計學意義(P>0.05)。不同手術-病理分期卵巢癌的Wnt1蛋白相對表達量不同(P<0.05)，從Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相對表達量逐漸增高，差異有統計學意義(P<0.05)。不同病理學分組卵巢癌的 Wnt1蛋白相對表達量差異無統計學意義(P>0.05)。卵巢癌伴有淋巴結轉移時，Wnt1蛋白相對表達量高于無淋巴結轉移患者，差異有統計學意義(P<0.05) (表2)。

表2 卵巢癌組織中Wnt1的表達情況

2.3 卵巢癌組織中WT1的表達免疫組化染色后，鏡下可見WT1 陽性細胞質呈棕黃色染色，不同年齡的卵巢癌患者WT1蛋白相對表達量差異無統計學意義(P>0.05)。不同手術 -病理分期卵巢癌的WT1蛋白相對表達量不同(P<0.05) ，從Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相對表達量逐漸增高，差異有統計學意義(P<0.05) 。不同病理學分組卵巢癌的 WT1蛋白相對表達量差異有統計學意義(P<0.05) 。卵巢癌有、無淋巴結轉移時，WT1蛋白表達差異無統計學意義(P>0.05) (表3)。

表3 卵巢癌組織中WT1的表達情況

3 討論

Wnt1蛋白作為Wnt/β-catenin通路的配體之一，由于其基因突變與腫瘤發生密切相關，近年來，已成為研究的熱點。既往有研究發現，上皮性卵巢漿液性癌組織中WNT1蛋白高表達[5]，但其在上皮性卵巢癌發生、發展中的作用及機制尚未完全明確。我們通過對已確診的卵巢癌患者的組織進行免疫組化分析，Wnt1蛋白不僅在卵巢癌中表達，也在正常卵巢組織中表達，在卵巢癌中表達的陽性率高于正常卵巢組織中表達的陽性率，但由于正常卵巢組織樣本數量相對較少，不除外存在偏差，未來仍需要大樣本數據進一步研究。另外，Wnt1蛋白與卵巢的分期、有無淋巴轉移有關，分期越晚，表達程度越高，Ⅲ期明顯高于Ⅰ-Ⅱ期，由于Ⅳ期患者術前大多采用新輔助化療，樣本量較少，此次數據中的Ⅳ期患者標本Wnt1表達陽性，不除外個體差異。有淋巴結轉移組明顯高于無淋巴結轉移組。Wnt1的表達與年齡、腫瘤病理學類型無明顯相關性。

WT1在腫瘤侵襲和轉移中發揮重要作用,小鼠模型中WT1缺失顯著抑制細胞遷移和侵襲，逆轉上皮-間充質轉化(EMT)，并阻止卵巢癌細胞的轉移[6]。在本研究中表明，WT1表達與卵巢癌病理學類型有明顯的相關性，幾乎大部分漿液性卵巢癌中均表達WT1，其他病理學類型如：子宮內膜樣、透明細胞樣、粘液性卵巢癌中，WT1表達較弱，或不表達。這也與崔麗燕等[7]的研究結果一致。WT1的表達與手術-病理分期有關，病理分期越晚，其表達率越高，與年齡、淋巴轉移無相關性。