饑餓復(fù)投喂對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化功能的影響

吳曉雲(yún) 陳葉雨 賴見生 劉亞 宋明江 龔全

摘要：【目的】明確饑餓與復(fù)投喂對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化功能的影響，為揭示其對環(huán)境脅迫的生理適應(yīng)機制提供參考依據(jù)。【方法】選取120尾體重相近（60.532±0.284 g）、健康、活力好的長江鱘隨機分為4個處理組，分別進行0、3、7和14 d饑餓再復(fù)投喂14 d，試驗結(jié)束后檢測長江鱘肝臟、腸道和肌肉的各項抗氧化指標，包括丙二醛（MDA）含量、蛋白質(zhì)羰基（PC）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶（GST）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、谷胱甘肽還原酶（GR）活性、谷胱甘肽（GSH）活性及抗超氧陰離子（ASA）和抗羥基自由基（AHR）能力。【結(jié)果】在饑餓期間，長江鱘肝臟MDA含量、GST活性、GSH-Px活性和GR活性均隨饑餓脅迫時間的延長顯著下降（P<0.05，下同）;腸道GR活性和GSH活性也隨饑餓脅迫時間的延長逐漸下降，MDA含量呈先升高后下降的變化趨勢，CAT活性、GST活性和GSH-Px活性則先下降后上升;肌肉MDA含量和PC含量呈先顯著升高后下降的變化趨勢，CAT活性以饑餓14 d后最高，GR活性、GSH活性及ASA能力均無顯著差異（P>0.05，下同）。復(fù)投喂后，長江鱘肝臟GSH-Px活性呈顯著下降趨勢，GR活性的變化趨勢與GSH-Px活性恰好相反;腸道PC含量隨饑餓脅迫時間的延長而顯著下降，CAT活性、GST活性、GSH-Px活性和GR活性則先升高后降低，說明其腸道抗氧化能力在饑餓7 d復(fù)投喂14 d后顯著上調(diào);肌肉MDA含量、PC含量、SOD活性和AHR能力均呈顯著下降趨勢，CAT活性、GST活性和GR活性則以饑餓14 d復(fù)投喂14 d的最高。【結(jié)論】饑餓會抑制長江鱘體內(nèi)抗氧化能力，隨著饑餓脅迫時間的延長，其體內(nèi)通過調(diào)動不同抗氧化酶活性逐漸形成新的氧化平衡以維持正常生理狀態(tài);復(fù)投喂后由于營養(yǎng)物質(zhì)得到補充，促使魚體各項生理機能得到恢復(fù)，一定程度上緩解饑餓產(chǎn)生的氧化應(yīng)激并形成新的氧化平衡。

關(guān)鍵詞： 長江鱘;饑餓;復(fù)投喂;抗氧化酶;氧化平衡

中國分類號： S965.219? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標志碼： A 文章編號：2095-1191（2021）11-3157-09

Effects of starvation and refeeding on antioxidative function of liver， intestine and muscle in Acipenser dabryanus

WU Xiao-yun， CHEN Ye-yu， LAI Jian-sheng， LIU Ya，

SONG Ming-jiang， GONG Quan*

（Fishery Institute， Sichuan Academy of Agricultural Sciences/Observation and Research Station of Sichuan Province of Fish Resources and Environment in Upper Reaches of the Yangtze River， Chengdu? 611713， China）

Abstract：【Objective】In order to study the effects of starvation and refeeding on antioxidant function of liver， intestine and muscle in Acipenser dabryanus， so as to provide reference basis for revealing its physiological adaptation mechanism to environmental stress.【Method】One hundred and twentyhealthy and vigorous A.dabryanus with similar body weight（60.532±0.284 g）were randomly divided into four treatment groups for 0， 3， 7 and 14 d starvation and 14 d refee-ding test.After the experiment，the activities of antioxidant enzymes in liver， intestine and muscle were detected，including malondialdehyde（MDA） content and protein carbonyl（PC） content， superoxide dismutase（SOD） activity，catalase （CAT） activity， glutathione S-transferase （GST） activity， glutathione peroxidase （GSH-Px）activity，glutathione reductase（GR） activity and glutathione（GSH） activity and anti-superoxide anion（ASA） and anti-hydroxyl radical（AHR） ability. 【Result】During starvation， the results showed that the MDA content， GST， GSH-Px and GR activities in liver decreased significantly with prolonged starvation（P<0.05， the same below）; GR activity and GSH content in intestine decreased gradually with prolonged starvation， CAT， GST and GSH-Px activities decreased first and then increased， while the MDA content increased first and then decreased. MDA and PC content in muscle increased significantly at first and then decreased， the highest activity of CAT was observed in 14 dgroup， whilethere was no significant difference in GR，GSH and ASA activities（P>0.05，the same below）. After refeeding， GSH-Px activities in liver decreased significantly， the change trend of GR activity was opposite to that of GSH-Px; intestinal PC content decreased significantly with with prolonged starvation， CAT， GST， GSH-Px and GR activities increased first and then decreased，it showed that the intestinal antioxidant capacity was significantly up-regulated after 7 d of starvation and 14 d of refeeding; the content of MDA and PC， activities of SOD and AHR in muscle sinificantly decreased，where the CAT， GST and GR enzymes activities were the highestin14 d group. 【Conclusion】Starvation can inhibit the antioxidant capacity of A. dabryanus. With the extension of starvation stress time， a new oxidative balance is gradually formed by mobilizing different antioxidant enzyme activities to maintain the normal physiological state. After refeeding， nutrients are supplemented to restore the physio-logical functions of the fish， alleviate the oxidative stress caused by starvation to a certain extent， and form a new oxidative balance.

Key words： Acipenser dabryanus; starvation; refeeding; antioxidant enzymes; oxidative balance

Foundation item：Sichuan Science and Technology Project（2021YFYZ0015）; Project of Key Laboratory of Sichuan Province for Fishes Conservation and Utilization in the Upper Reaches of the Yangtze River（NJTCCJSYSYS07）; Frontier Project of Sichuan Academy of Agricultural Sciences（2019QYXK021）;Sichuan Freshwater Fish Innovation Team Construction Project of National Modern Agricultural Industrial Technology System（2019-2023）

0 引言

【研究意義】長江鱘（Acipenser dabryanus）又稱達氏鱘、沙臘子或小臘子，隸屬于鱘形目（Acipense-riformes）鱘科（Acipenseridae），曾是長江上游重要的經(jīng)濟捕撈對象（劉亞等，2018），但由于過度捕撈、水體污染、海灘開墾及人類活動的干擾，從20世紀后期開始長江鱘自然種群資源規(guī)模急劇縮小，現(xiàn)已被列為國家一級重點保護野生動物（陳俊和徐承旭，2019;胡偉等，2020），并被世界自然保護聯(lián)盟（IUCN）升級為極危級（GR）保護物種。營養(yǎng)狀況、免疫力和抗氧化能力間的動態(tài)平衡決定了魚類抵抗疾病的生理能力（Feng et al.，2011;謝雨欣等，2018）。在自然水域生態(tài)系統(tǒng)中，魚類常因時間、空間、季節(jié)更替及環(huán)境變化導(dǎo)致食物短缺而受饑餓脅迫的影響（徐蕾，2019）。饑餓脅迫過程中魚類的抗氧化水平降低，易引起活性氧（Reactive oxygen species，ROS）侵襲，當細胞內(nèi)ROS水平超過清除酶系統(tǒng)的處理能力則導(dǎo)致組織損傷甚至死亡，即氧化應(yīng)激（Oxidative stress，OS）。抗氧化劑（酶類和非酶類）能有效調(diào)節(jié)動物機體氧化還原平衡，減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，阻止或減少自由基氧化應(yīng)激的破壞（朱若岑等，2015）。因此，通過饑餓復(fù)投喂模擬自然環(huán)境變化研究長江鱘抗氧化功能，可為評估長江鱘對環(huán)境脅迫的生理適應(yīng)機制提供參考依據(jù)，同時對進一步優(yōu)化其人工養(yǎng)殖技術(shù)具有重要意義。【前人研究進展】至今，已有大量研究證實饑餓能顯著影響意大利鱘（A. naccarii）（Furné et al.，2009）、虹鱒（Oncorhynchus mykiss）（Furné et al.，2009）、卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）幼魚（蘇慧等，2012）、羅非魚（Oreochroms mossambcus）（盧俊姣等，2013）、團頭魴（Megalobrama amblycephala）（蘇艷莉等，2017）及黃姑魚（Nibea albiflora）（Song et al.，2019）等魚類的肝臟抗氧化酶活力;其次，饑餓對魚類的消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)影響極大（高露姣等，2004;Zeng et al.，2012），能引起閃光鱘（Acipenser stellatus）（Gune et al.，2021）和翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）（徐蕾，2019）等魚類腸道的氧化應(yīng)激。此外，魚類肌肉中含有大量不飽和脂肪酸，饑餓引起的氧化應(yīng)激會導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化，已有研究發(fā)現(xiàn)饑餓脅迫能影響大黃魚（Pseudosciaena crocea）（Zhang et al.，2008）、波紋短須石首魚（Umbrina cirrosa）（Hidalgo et al.，2017）和黑鯛（Sparus macrocephalus）（徐蕾，2019）的肌肉抗氧化防御。可見，饑餓脅迫顯著影響魚類肝臟、腸道和肌肉中抗氧化功能。【本研究切入點】目前，有關(guān)長江鱘的研究主要集中在人工養(yǎng)殖技術(shù)、早期發(fā)育及基因克隆等方面（杜軍等，2009;單喜雙等，2015;劉亞等，2017），僅有Yang等（2019）研究報道了禁食能激活長江鱘的抗氧化防御，同時在饑餓4周后其血清和肝臟中的氧化應(yīng)激得到緩解。魚類體內(nèi)抗氧化酶活性的變化能反映其對外界環(huán)境變化的抗氧化防御能力，但至今未見短期自然環(huán)境更替對長江鱘抗氧化功能影響的研究報道。【擬解決的關(guān)鍵問題】通過探究饑餓復(fù)投喂期間長江鱘肝臟、腸道和肌肉中相關(guān)抗氧化劑含量或酶活性的變化規(guī)律，明確饑餓與復(fù)投喂對其抗氧化功能的影響，為揭示長江鱘對環(huán)境脅迫的生理適應(yīng)機制提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗設(shè)計

供試長江鱘為四川省農(nóng)業(yè)科學院水產(chǎn)研究所人工繁殖的F2代幼魚。試驗前將長江鱘置于循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)暫養(yǎng)2周，每天早晚各投喂1次飼料。飼料營養(yǎng)成分：粗蛋白含量41.31%、粗脂肪含量10.00%、粗纖維含量4.68%、粗灰分含量13.51%、水分含量9.14%。暫養(yǎng)2周后，選取120尾體重相近（60.532±0.284 g）、健康、活力好的長江鱘隨機分為4個處理組，每處理組3個平行，每個平行10尾。其中，A組（對照組）連續(xù)投喂14 d，B組饑餓3 d后連續(xù)投喂14 d，C組饑餓7 d后連續(xù)投喂14 d，D組饑餓14 d后連續(xù)投喂14 d。試驗期間水溫控制在（18.5±2.0）℃，溶解氧（DO）≥5.0 mg/L。

1. 2 樣品采集

試驗方案經(jīng)四川省農(nóng)業(yè)科學院水產(chǎn)研究所動物倫理咨詢委員會批準（20180929001A）。分別于試驗前（對照組）、饑餓后（饑餓處理組）及復(fù)投喂后（對照組和饑餓處理組）選取3尾長江鱘，經(jīng)MS-222麻醉后采集其肝臟、腸道和肌肉組織樣品，放入液氮速凍后置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1. 3 酶活性檢測

采用勻漿器制備10%的組織勻漿，3000 r/min離心10 min后取上清液用于各項指標測定。指標測定前以考馬斯亮藍方法測定組織樣品總蛋白含量，預(yù)試驗確定各項指標測定的適宜勻漿濃度后，參照南京建成生物工程研究所試劑盒說明分別測定各項抗氧化指標，包括丙二醛（MDA）含量、蛋白質(zhì)羰基（PC）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶（GST）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、谷胱甘肽還原酶（GR）活性、谷胱甘肽（GSH）活性及抗超氧陰離子（ASA）和抗羥基自由基（AHR）能力。

1. 4 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計處理，并通過方差分析（ANOVA）結(jié)合Tukey法進行多重比較以檢驗差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2. 1 饑餓對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化功能的影響

2. 1. 1 饑餓對長江鱘肝臟抗氧化功能的影響 由表1可知，長江鱘肝臟MDA含量隨饑餓脅迫時間的延長而顯著下降（P<0.05，下同），而PC含量、SOD活性和ASA能力在饑餓脅迫期間無顯著變化（P>0.05，下同）。B組長江鱘肝臟CAT活性顯著低于對照組，其他處理組間無顯著差異;饑餓組（B組、C組和D組）長江鱘肝臟GST活性顯著低于對照組，但組間無顯著差異;C組和D組長江鱘肝臟GSH-Px活性顯著低于對照組和B組，B組與對照組間無顯著差異;長江鱘肝臟GSH水平在饑餓期間整體上呈逐漸下降趨勢;饑餓組（B組、C組和D組）長江鱘肝臟GR活性顯著低于對照組，其中D組的GR活性最低;長江鱘肝臟AHR能力以B組最低，顯著低于D組，其他處理組間無顯著差異。

2. 1. 2 饑餓對長江鱘腸道抗氧化功能的影響 由表2可知，B組長江鱘腸道MDA含量顯著高于對照組，其他處理組間無顯著差異;長江鱘腸道SOD活性以B組顯著低于對照組，其他處理組間無顯著差異;長江鱘腸道CAT活性在饑餓脅迫期間顯著降低，以C組的最低，而B組和D組間無顯著差異;C組長江鱘腸道的GST活性和GSH-Px活性均最低，顯著低于對照組和D組;長江鱘腸道GR活性和GSH活性均隨饑餓脅迫時間的延長呈逐漸下降趨勢，以D組的最低，顯著低于對照組;長江鱘腸道PC含量、ASA能力和AHR能力在各處理組間均無顯著差異。

2. 1. 3 饑餓對長江鱘肌肉抗氧化功能的影響 由表3可知，C組長江鱘肌肉MDA含量顯著高于對照組，但D組的含量顯著低于對照組;長江鱘肌肉PC含量以C組顯著高于其他處理組，而SOD活性以C組最低，顯著低于對照組;D組長江鱘肌肉CAT活性顯著高于其他處理組，其他處理組間無顯著差異;C組長江鱘肌肉GST活性顯著低于對照組和B組，但與D組間無顯著差異;饑餓組（B組、C組和D組）長江鱘肌肉GSH-Px活性顯著低于對照組，且以B組最低;長江鱘肌肉AHR能力以C組最低，顯著低于對照組，B組和D組與對照組間無顯著差異;長江鱘肌肉GR活性、GSH活性及ASA能力在饑餓脅迫期間均無顯著差異。

2. 2 饑餓復(fù)投喂對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化功能的影響

2. 2. 1 饑餓復(fù)投喂對長江鱘肝臟抗氧化功能的影響 由表4可知，復(fù)投喂后饑餓處理組（B組、C組和D組）長江鱘肝臟MDA含量逐漸升高，且C組和D組顯著高于對照組;長江鱘肝臟PC含量和GST活性均以C組顯著高于對照組，而SOD活性、CAT活性、ASA能力和AHR能力在各處理組間無顯著差異;D組長江鱘肝臟GSH-Px活性最低，顯著低于對照組和B組;長江鱘肝臟GR活性的變化趨勢與GSH-Px活性恰好相反，以D組顯著高于其他處理組;B組長江鱘肝臟GSH活性顯著高于C組和D組，但與對照組間無顯著差異。

2. 2. 2 饑餓復(fù)投喂對長江鱘腸道抗氧化功能的影響 由表5可知，B組長江鱘腸道MDA含量顯著低于對照組，但與C組和D組間無顯著差異;長江鱘腸道PC含量隨饑餓脅迫時間的延長而顯著下降;對照組長江鱘腸道SOD活性顯著高于B組和D組，但各饑餓組間無顯著差異;長江鱘腸道CAT活性、GST活性、GSH-Px活性和GR活性均以C組顯著高于對照組和D組，GSH活性則以D組最低，顯著低于對照組和B組;長江鱘腸道的ASA能力和AHR能力在各處理組間均無顯著差異。

2. 2. 3 饑餓復(fù)投喂對長江鱘肌肉抗氧化功能的影響 由表6可知，長江鱘肌肉MDA含量和PC含量均以B組最高、D組最低，且二者間差異顯著;D組長江鱘肌肉SOD活性和GSH-Px活性顯著低于對照組，而GST活性和GR活性顯著高于對照組;D組長江鱘肌肉CAT活性也最高，與對照組間無顯著差異，但顯著高于B組和C組;長江鱘肌肉GSH活性在各處理組間無顯著變化;長江鱘肌肉ASA能力和AHR能力均以D組最低，但與對照組間無顯著差異。

3 討論

3. 1 饑餓對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化酶功能的影響

肝臟作為重要的代謝器官，在協(xié)助排毒和代謝產(chǎn)物降解的過程中極易受內(nèi)源性或外源性自由基的攻擊（Lee et al.，2015;李思和劉曉宇，2019）。Varju等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，長期饑餓會削弱梭鱸（Sander lucioperca）谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)的活性。在本研究中，長江鱘肝臟GST、GSH-Px、GR和GSH的活性在饑餓脅迫后均呈下降趨勢，即饑餓過程中肝臟氧化應(yīng)激反應(yīng)不活躍，但長時間的饑餓脅迫會造成ROS積累，從而上調(diào)肝臟對超氧陰離子和羥自由基的清除功能。GST雖然不能清除體內(nèi)的H2O2，但具有清除體內(nèi)過氧化物及解毒的雙重功效（馬森，2008）。Bayir等（2011）研究報道，饑餓能導(dǎo)致褐鱒（Salmo trutta）肝臟GST活性降低23%，即長期饑餓脅迫后魚類承受氧化應(yīng)激的能力顯著降低。GSH-Px是清除體內(nèi)H2O2和脂質(zhì)過氧化物的抗氧化酶（況新宇，2016;王晶晶等，2019）。Furné等（2009）研究分析意大利鱘和虹鱒在饑餓10 d后其肝臟GSH-Px活性顯著下調(diào)，Varju等（2018）研究表明饑餓3周后梭鱸的GSH-Px活性顯著下降，究其原因是持續(xù)饑餓脅迫致使魚體缺乏連續(xù)氨基酸供應(yīng)，而導(dǎo)致含巰基基團的GSH合成受到干擾，GSH作為GSH-Px的輔助底物，其含量下降必然引起GSH-Px活性下降（Furné et al.，2009）。GR在清除自由基和活性氧及保持細胞內(nèi)物種氧化還原狀態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，CAT的主要作用是清除體內(nèi)H2O2，且在持續(xù)饑餓脅迫過程中能將ROS濃度控制在理想的平衡狀態(tài)（徐蕾，2019）。本研究結(jié)果表明，長江鱘在饑餓3 d時其肝臟CAT活性顯著下降，之后又恢復(fù)至正常水平，推測CAT參與調(diào)節(jié)肝臟中的ROS平衡。MDA是細胞中多不飽和脂肪酸過氧化的最終產(chǎn)物之一，是衡量氧化性脂質(zhì)損傷的重要標志物（丁立云等，2019）。長江鱘肝臟MDA含量在饑餓3 d時無顯著變化，但隨著饑餓時間的延長而顯著下降，與董學興等（2011）研究異育銀鯽（Carassiusauratus gibelio）血清MDA含量變化得出的結(jié)論一致，可能是由于饑餓過程中魚類脂質(zhì)優(yōu)先被降解供能，體內(nèi)游離脂肪酸水平下降，導(dǎo)致MDA含量隨之減少。超氧陰離子和羥自由基是組成ROS的2個重要成員，長江鱘肝臟的AHR能力在饑餓14 d時達最高值，表明其抗氧化防御能力依然存在，與劉松巖（2006）、Bayir等（2011）的研究結(jié)論存在差異，可能是由于不同物種的抗氧化反應(yīng)機制不同所致。

在長江鱘腸道方面，其MDA含量隨著饑餓時間的延長呈先升后降的變化趨勢，短期饑餓（3 d）腸道細胞的脂質(zhì)過氧化程度加深，可能與SOD活性下降有關(guān)。SOD是生物體內(nèi)的重要抗氧化酶類，能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的ROS。長江鱘腸道SOD活性在饑餓第3 d顯著下降，之后略有回升。這與董學興等（2011）研究表明短期饑餓8 d時異育銀鯽血液SOD活性顯著下降，隨后恢復(fù)正常的結(jié)論相似，說明短期饑餓時會抑制長江鱘的腸道抗氧化功能，使其免疫能力下降。至饑餓14 d時長江鱘腸道的抗氧化功能又被激活，CAT、GST和GSH-Px的活性相對饑餓7 d時均呈升高趨勢，即腸道新的抗氧化平衡逐漸恢復(fù)。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著饑餓脅迫時間的延長，長江鱘腸道GR活性受到抑制。GR主要負責維持抗氧化劑GSH濃度，二者的變化趨勢基本保持一致，與在肝臟中的現(xiàn)象相似，但至饑餓14 d時GSH-Px活性和GST活性的增加似乎與GR或GSH的活性變化無關(guān)，與Bayir等（2011）對褐鱒肝臟的研究結(jié)果相似，但具體原因有待進一步探究。

本研究結(jié)果表明，長江鱘肌肉MDA和PC的含量在饑餓7 d時顯著上調(diào)，與此同時SOD活性、GST活性、GSH-Px活性及AHR能力卻顯著下降，說明至饑餓7 d時肌肉抗氧化能力下降。饑餓14 d后，長江鱘肌肉MDA和PC的含量均呈下降趨勢，而CAT活性、SOD活性、GST活性及AHR能力均呈上調(diào)趨勢，說明肌肉氧化損傷得到緩解，新的氧化平衡逐漸實現(xiàn)，抗氧化功能緩慢恢復(fù)。但Bayir等（2011）研究發(fā)現(xiàn)饑餓14 d內(nèi)黑鯛和大黃魚的肌肉MDA含量變化均不明顯，而饑餓21～28 d后顯著高于其他處理組，即當饑餓周期超過21 d后黑鯛和大黃魚的自身防御無法清除過多的ROS，究其原因可能是物種或個體大小不同所造成，也可能與饑餓試驗?zāi)Ｊ接嘘P(guān)（Zhang et al.，2007）。

3. 2 饑餓復(fù)投喂對長江鱘肝臟、腸道和肌肉抗氧化功能的影響

復(fù)投喂后觀察發(fā)現(xiàn)，C組和D組的長江鱘肝臟脂質(zhì)氧化損傷程度加劇，蛋白氧化損傷以C組最嚴重，其GST活性顯著上調(diào)。同時，D組長江鱘肝臟GSH-Px活性顯著下降，GSH活性達最低值，但GR活性顯著提高。Bayir等（2011）也研究證實，饑餓49 d以后飽食投喂14 d褐鱒肝臟GR活性顯著提高。說明長江鱘肝臟在饑餓7～14 d復(fù)投喂后的抗氧化能力尚未得到完全恢復(fù)，同時可能通過提高GST活性和GR活性以增強肝臟清除活性氧的能力。饑餓復(fù)投喂對長江鱘肝臟SOD活性無明顯影響，但在周期性饑餓復(fù)投喂試驗中，團頭魴肝臟SOD活性在饑餓1 d復(fù)投喂1 d模式下顯著提高，而建鯉（Cyprinus carpiovar Jian）肝臟SOD活性在各周期間均顯著提高（喬秋實，2011），說明不同物種在不同投喂模式下的抗氧化調(diào)控機制存在明顯差異。

本研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)投喂后對照組和B組長江鱘腸道的CAT活性、GST活性、GR活性、GSH活性及ASA和AHR能力均無顯著差異，表明饑餓3 d后復(fù)投喂14 d長江鱘腸道抗氧化功能受到的影響較小。經(jīng)14 d復(fù)投喂后，C組長江鱘腸道MDA含量和PC含量均呈下降趨勢，CAT活性、GST活性、GSH-Px活性和GR活性則以C組最高，表明長江鱘腸道抗氧化能力在饑餓7 d復(fù)投喂14 d后顯著上調(diào)。此外，SOD活性與ASA能力的變化趨勢基本相似，表明長江鱘腸道的抗氧化能力在饑餓7 d復(fù)投喂14 d后最高。

在長江鱘肌肉中，復(fù)投喂后B組的MDA含量和PC含量顯著提高，說明饑餓后復(fù)投喂對肌肉脂質(zhì)和蛋白過氧化作用顯著。Furné等（2009）對意大利鱘和虹鱒的研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)投喂能使其肌肉脂質(zhì)過氧化作用提高，主要是對饑餓期的代償性代謝反應(yīng)。長江鱘MDA含量和PC含量的變化可能與食物匱乏導(dǎo)致魚類活躍度下降在補飼期間得到恢復(fù)，或?qū)е录∪庵醒趸瘧?yīng)激增加有關(guān)。長江鱘肌肉的SOD活性、CAT活性、GST活性、GSH-Px活性和GR活性在對照組、B組和C組間均無顯著差異，表明短期的饑餓復(fù)投喂對長江鱘肌肉抗氧化功能影響不明顯;AHR能力在B組顯著提高，ASA能力在C組顯著提高，推測短期饑餓復(fù)投喂過程中由于ROS含量增加，刺激肌肉對超氧化物和羥自由基的清除能力提高，但由于此時大部分酶類活性變化不明顯，說明免疫能力有所提升，而對抗氧化功能的影響并不明顯;D組長江鱘的SOD活性和GSH-Px活性顯著下降，而GST活性和GR活性顯著提高，表明饑餓14 d復(fù)投喂14 d致使長江鱘肌肉中的ROS清除能力下降，但機體依然試圖調(diào)動GST和GR（代償性增高）以抵消這部分的影響。

綜上所述，長江鱘體內(nèi)抗氧化過程復(fù)雜，不同組織間的抗氧化調(diào)節(jié)機制存在明顯差異，饑餓或復(fù)投喂過程中抗氧化功能也有所不同。饑餓會抑制長江鱘體內(nèi)抗氧化能力，但隨著饑餓脅迫時間的延長，其體內(nèi)通過調(diào)動不同抗氧化酶活性逐漸形成新的氧化平衡以維持正常生理狀態(tài)。復(fù)投喂后，營養(yǎng)物質(zhì)得到補充，促使魚體各項生理機能得到恢復(fù)，形成新的氧化平衡。在饑餓及復(fù)投喂過程中，首先對長江鱘的肝臟抗氧化功能影響最大，其次是腸道，最后是肌肉，究其原因可能是白肌作為厭氧性肌肉需要的血液供給較少，對氧氣的需求也較其他組織少，因而對氧化應(yīng)激的耐受能力較強（Furné et al.，2009）。饑餓3～7 d后再復(fù)投喂14 d對長江鱘腸道和肌肉的抗氧化功能影響相對較小，表明短期饑餓后進行復(fù)投喂能在一定程度上緩解其氧化應(yīng)激反應(yīng)。

4 結(jié)論

饑餓會抑制長江鱘體內(nèi)抗氧化能力，隨著饑餓脅迫時間的延長，其體內(nèi)通過調(diào)動不同抗氧化酶活性逐漸形成新的氧化平衡以維持正常生理狀態(tài);復(fù)投喂后由于營養(yǎng)物質(zhì)得到補充，促使魚體各項生理機能得到恢復(fù)，一定程度上緩解饑餓產(chǎn)生的氧化應(yīng)激并形成新的氧化平衡。

參考文獻：

陳俊，徐承旭. 2019. 極危物種長江鱘全人工繁殖成功[J]. 水產(chǎn)科技情報，46（4）：235. [Chen J，Xu C X. 2019. Successful artificial propagation of a critically endangered species，Acipenser dabryanus[J]. Fisheries Science & Technology Information，46（4）：235.]

丁立云，陳文靜，饒毅，張桂芳，傅義龍，張愛芳. 2019. 饑餓脅迫對彭澤鯽幼魚生長、體組成、消化酶活性及抗氧化性的影響[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學，48（1）：141-145. [Ding L Y，Chen W J，Rao Y，Zhang G F，F(xiàn)u Y L，Zhang A F. 2019. Effects of starvation on growth，body composition，activities of digestive enzyme and antioxidant of Carassius auratus var. Pengze[J]. Journal of Henan Agricultural Scien-ces，48（1）：141-145.] doi：10.15933/j.cnki.1004-3268.2019. 01.023.

董學興，呂林蘭，黃金田，王愛民，於葉兵. 2011. 饑餓后再投喂對異育銀鯽血液生理和非特異性免疫指標的影響[J]. 中國農(nóng)學通報，27（23）：76-79. [Dong X X，Lü L L，Huang J T，Wang A M，Yu Y B. 2011. Effect of starvation and re-feeding on blood physiological and non-specific immune parameters of Carassius auratus gibelio[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，27（23）：76-79.]

杜軍，趙剛，龔全，沈丹舟，吳明森，劉光迅. 2009. 達氏鱘親魚池塘人工培育試驗[J]. 西南農(nóng)業(yè)學報，22（3）：824-827. [Du J，Zhao G，Gong Q，Shen D Z，Wu M S，Liu G X. 2009. Study on Acipenser dabryanus Dumeril farmed in pool[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences，22（3）：824-827.] doi：10.3969/j.issn.1001-4829.2009.03. 064.

高露姣，陳立僑，趙曉勤，莊平. 2004. 施氏鱘幼魚的饑餓和補償生長研究——對消化器官結(jié)構(gòu)和酶活性的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學，11（5）：413-419. [Gao L J，Chen L Q，Zhao X Q，Zhuang P. 2004. Starvation and compensantory growth of Acipenser schrenckii—Effects on digestive organs structure and digestive ezymes activity[J]. Journal of Fishery Science of China，11（5）：413-419.] doi：10.3321/j.issn：1005-8737.2004.05.006.

胡偉，許巧情，郭慧芝，李由申，韓盼盼，袁漢文，張書環(huán)，陳敦學. 2020. 達氏鱘自噬基因MAP1LC3B克隆及其組織表達分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報，51（2）：445-452. [Hu W，Xu Q Q，Guo H Z，Li Y S，Han P P，Yuan H W，Zhang S H，Chen D X. 2020. Cloning and expression of autophagy-related gene MAP1LC3B in Dabry’s sturgeon （Acipenser dabryanus）[J]. Journal of Southern Agriculture，51（2）：445-452.] doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2020.02.026.

況新宇. 2016. 高溶氧對西伯利亞鱘、雜交鱘生長、氧化應(yīng)激及免疫功能的影響[D]. 大連：大連海洋大學. [Kuang X Y. 2016. Effction of high dissolved oxygen on growth，oxidative stress，and immune capacity of Acipenser baerii and hybird sturgeon[D]. Dalian：Dalian Ocean University.] doi：10.7666/d.D01051577.

李思，劉曉宇. 2019. 辛硫磷對鯽魚肝微粒體中CYP1A活性及其表達水平的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報，50（10）：2329-2334. [Li S，Liu X Y. 2019. Effects of phoxim on the activity and expression of CYP1A in liver microsomes of Carassius auratus gibebio（crucian carp）[J]. Journal of Southern Agriculture，50（10）：2329-2334.] doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2019.10.25.

劉松巖. 2006. 環(huán)境脅迫對中華鱘體內(nèi)自由基水平和抗氧化酶活力的影響[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學. [Liu S Y. 2006. Effect of environmengtal stress on free radical le-vel and antioxdant enzyme activities of Chinese sturgeon，Acipenser sinensis[D]. Wuhan：Huazhong Agricultural University.] doi：10.7666/d.y1004947.

劉亞，龔全，李強，杜軍，趙剛. 2017. 全人工繁殖達氏鱘胚胎發(fā)育的形態(tài)學和組織學觀察[J]. 西南農(nóng)業(yè)學報，30（7）：1686-1692. [Liu Y，Gong Q，Li Q，Du J，Zhao G. 2017. Morphological and histological observation of embryonic development of artificially-bred Acipenser dabryanus Dumeril[J]. Southwest China Journal of Agricultural Scien-ces，30（7）：1686-1692.] doi：10.16213/j.cnki.scjas.2017.7. 039.

劉亞，楊銳，陳葉雨，宋明江，顏其貴，龔全，李強，楊煥超，賴見生. 2018. 達氏鱘維氏氣單胞菌的分離鑒定及病理組織學觀察[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報，49（6）：1235-1241. [Liu Y，Yang R，Chen Y Y，Song M J，Yan Q G，Gong Q，Li Q，Yang H C，Lai J S. 2018. Isolation，identification of Aeromonas veronii in Acipenser dabryanus and its histological observations[J]. Journal of Southern Agriculture，49（6）：1235-1241.] doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2018. 06.28.

盧俊姣，劉淑蘭，翟少偉. 2013. 饑餓脅迫對羅非魚肝胰臟抗氧化能力的影響[J]. 中國農(nóng)學通報，29（35）：75-79. [Lu J J，Liu S L，Zhai S W. 2013. Effects of starvation stress on antioxidant capacity in hepatopancreas of tilapia （Oreochromis niloticus）[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，29（35）：75-79.]

馬森. 2008. 谷胱甘肽過氧化物酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶研究進展[J]. 動物醫(yī)學進展，29（10）：53-56. [Ma S. 2008. Progress on GSH-Px and GST[J]. Progress in Veterinary Medicine，29（10）：53-56.] doi：10.3969/j.issn.1007-5038. 2008.10.015.

喬秋實. 2011. 周期性饑餓再投喂對團頭魴和建鯉生長性能、體組成、消化酶及抗氧化酶的影響[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學. [Qiao Q S. 2011. Effects of the cyclic starvation-refeeding on growth performance，body composition，digestive enzymes and antioxidant enzymes of Megalobrama amblycephala and Cyprinus carpio var. Jian[D]. Nanjing：Nanjing Agricultural University.] doi：10.7666/d.Y2038231.

單喜雙，岳華梅，陳細華，葉歡，楊曉鴿，李創(chuàng)舉. 2015. 達氏鱘生長激素基因cDNA克隆、表達及免疫熒光定位研究[J]. 水生生物學報，39（2）：307-314. [Shan X S，Yue H M，Chen X H，Ye H，Yang X G，Li C J. 2015. cDNA cloning，expression and immunolocalization of growth hormone gene in Acipenser dabryanus[J]. Acta Hydrobio-logica Sinica，39（2）：307-314.] doi：10.7541/2015.41.

蘇慧，區(qū)又君，李加兒，王永翠，劉汝建，曹守花. 2012. 饑餓對卵形鯧鲹幼魚不同組織抗氧化能力、Na+/K+-ATP酶活力和魚體生化組成的影響[J]. 南方水產(chǎn)科學，8（6）：28-36. [Su H，Ou Y J，Li J E，Wang Y C，Liu R J，Cao S H. 2012. Effects of starvation on antioxidative capacity，Na+/K+-ATPase activity and biochemical composition in juvenile Trachinotus ovatus[J]. South China Fisheries Scien-ce，8（6）：28-36.] doi：10.3969/j.issn.2095-0780.2012.06. 005.

蘇艷莉，戈賢平，孫盛明，朱健，張武肖，余含. 2017. 高溫季節(jié)饑餓后補償攝食對團頭魴幼魚生長性能、血清生化指標、腸道消化酶活性及肝臟抗氧化酶活性的影響[J]. 動物營養(yǎng)學報，29（11）：4198-4206. [Su Y L，Ge X P，Sun S M，Zhu J，Zhang W X，Yu H. 2017. Effects of compensatory feeding after starvation on growth performance，serum biochemical indexes，intestinal digestive enzyme activities and hepatic antioxidant enzyme activities of juvenile blunt snout bream （Megalobrama amblycephal） in summer[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition，29（11）：4198-4206.] doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2017.11.044.

王晶晶，張新笑，卞歡，耿志明，李鵬鵬，王道營，徐為民. 2019. 麻鴨磷脂氫谷胱甘肽過氧化物酶高效可溶性表達及其部分酶學性質(zhì)[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報，50（5）：1120-1126. [Wang J J，Zhang X X，Bian H，Geng Z M，Li P P，Wang D Y，Xu W M. 2019. Highly efficient soluble expression and partial enzymatic properties of shelduck phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase[J]. Journal of Southern Agriculture，50（5）：1120-1126.] doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2019.05.28.

謝雨欣，張木子，黎明，袁莉霞，李冰，陳雨詩，王日昕. 2018. 氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚生長性能、血液健康、抗氧化能力及免疫應(yīng)答的影響[J]. 動物營養(yǎng)學報，30（8）：3073-3081. [Xie Y X，Zhang M Z，Li M，Yuan L X，Li B，Chen Y S，Wang R X. 2018. Effects of starvation and refeeding on growth performance，blood health，antioxidant capacity and immune response of juvenile yellow catfish under ammonia stress[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition，30（8）：3073-3081.] doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2018.08.024.

徐蕾. 2019. 短期饑餓對翹嘴鱖腸道氧化應(yīng)激及自噬的影響[D]. 桂林：廣西師范大學. [Xu L. 2019. Effects of short-term fasting on the oxidative stress and autophagy in intestinal of Siniperca chuatsi[D]. Guilin：Guangxi Normal University.]

朱若岑，蔣維維，譚柱良，易金娥. 2015. 動物體內(nèi)活性氧、氧化應(yīng)激與細胞凋亡以及抗氧化劑研究進展[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，34（3）：21-25. [Zhu R C，Jiang W W，Tan Z L，Yi J E. 2015. Progress of resctive oxygen spcies，oxidative strss，cell apoptosis and antioxidant in animals[J]. Journal of Traditional Chinese Veterinary Medicine，34（3）：21-25.] doi：10.13823/j.cnki.jtcvm.2015.03.005.

Bayir A，Sirkecioglu A N，Bayir M，Haliloglu H I，Kocaman E M，Aras N M. 2011. Metabolic responses to prolonged starvation，food restriction，and refeeding in the brown trout，Salmo trutta：Oxidative stress and antioxidant defenses[J]. Comparative Biochemistry and Physiology. Part B：Biochemistry & Molecular Biology，159（4）：191-196. doi：10.1016/j.cbpb.2011.04.008.

Feng G P，Shi X T，Huang X R，Zhuang P. 2011. Oxidative stress and antioxidant defenses after long-term fasting in blood of Chinese sturgeon （Acipenser sinensis）[J]. Procedia Environmental Sciences，8：469-475. doi：10.1016/j.proenv.2011.10.074.

Furné M，García-Gallego M，Hidalgo M C，Morales A E，Domezain A，Domezain J，Sanz A. 2009. Oxidative stress parameters during starvation and refeeding periods in Adriatic sturgeon （Acipenser naccarii） and rainbow trout （Oncorhynchus mykiss）[J]. Aquaculture Nutrition，15（6）：587-595. doi：10.1111/j.1365-2095.2008.00626.x.

Gune I E F，Georgescu S E，Dudu A，Bala M，Voicu S，Grecu I，Dediu L，Dinischiotu A，Costache M. 2021. Oxidative stress and antioxidant defense mechanisms in response to starvation and refeeding in the intestine of stellate sturgeon（Acipenser stellatus） juveniles from aquaculture[J]. Animals，11（1）：76. doi：10.3390/ani11010076.

Hidalgo M C，Morales A E，Arizcun M，Abellán E，Cardenete G. 2017. Regional asymmetry of metabolic and antioxidant profile in the sciaenid fish shi drum （Umbrina cirrosa） white muscle. Response to starvation and refeeding[J]. Redox Biology，11：682-687. doi：10.1016/j.redox. 2017.01.022.

Lee J W，Choi Y C，Kim R，Lee S K. 2015. Multiwall carbon nanotube-induced apoptosis and antioxidant gene expression in the gills，liver，and intestine of Oryzias latipes[J]. BioMed Research International，2015：485343. doi：10. 1155/2015/485343.

Song H B，Xu D D，Tian L，Chen R Y，Wang L G，Tan P，You Q C. 2019. Overwinter mortality in yellow drum （Nibea albiflora）：Insights from growth and immune responses to cold and starvation stress[J]. Fish & Shellfish Immunology，92：341-347. doi：10.1016/j.fsi.2019.06.030.

Varju M，Müller T，Bokor Z，?arski D，Mézes M，Balogh K. 2018. The effects of excessive starvation on antioxidant defence and lipid peroxidation in intensively reared，commercial-size pikeperch（Sander lucioperca L.）[J]. Egyptian Journal of Aquatic Research，44（4）：349-352. doi：10.1016/j.ejar.2018.11.003.

Yang S，He K，Yan T，Wu H，Zhou J，Zhao L L，Wang Y，Gong Q. 2019. Effect of starvation and refeeding on oxidative stress andantioxidant defenses in Yangtze sturgeon （Acipenser dabryanus）[J]. Fish Physiology Biochemistry，45（3）：987-995. doi：10.1007/s10695-019-0609-2.

Zeng L Q，Li F J，Li X M，Cao Z D，F(xiàn)u S J，Zhang Y G. 2012. The effects of starvation on digestive tract function and structure in juvenile southern catfish（Silurus meridionalis Chen）[J]. Comparative Biochemistry and Physiology. Part A：Molecular & Integrative Physiology，162（3）：200-211. doi：10.1016/j.cbpa.2012.02.022.

Zhang X D，Wu T X，Cai L S，Zhu Y F. 2007. Influence of fasting on muscle composition and antioxidant defenses of market-size Sparus macrocephalus[J]. Journal of Zhejiang University. Science B，8（12）：906-911. doi：10.1631/jzus.2007.B0906.

Zhang X D，Zhu Y F，Cai L S，Wu T X. 2008. Effects of fas-ting on the meat quality and antioxidant defenses of market-size farmed large yellow croaker （Pseudosciaena crocea）[J]. Aquaculture，280（1-4）：136-139. doi：10.1016/j.aquaculture.2008.05.010.

收稿日期：2020-10-13

基金項目：四川省科技計劃項目（2021YFYZ0015）;長江上游魚類資源保護利用四川省重點實驗室開放基金項目（NJTCCJSYSYS07）;四川省農(nóng)業(yè)科學院前言學科研究基金項目（2019QYXK021）;國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系四川淡水魚創(chuàng)新團隊建設(shè)專項（2019-2023）

通訊作者：龔全（1979-），https：//orcid.org/0000-0001-8044-9227，副研究員，主要從事魚類增養(yǎng)殖及營養(yǎng)與免疫研究工作，E-mail：admiral671@163.com

第一作者：吳曉雲(yún)（1993-），https：//orcid.org/0000-0002-7437-8327，主要從事魚類增養(yǎng)殖及營養(yǎng)與免疫研究工作，E-mail：cloudyheaven@qq.com

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