柴胡與赤芍、醋柴胡與白芍配伍前后藥效學(xué)比較分析

安巍巍

北京市門頭溝區(qū)醫(yī)院（首都醫(yī)科大學(xué)門頭溝教學(xué)醫(yī)院）藥劑科，北京 102300

在國內(nèi)的中醫(yī)領(lǐng)域內(nèi)，把兩種中藥進行聯(lián)合使用，起到的協(xié)同作用效果能夠強化藥物本身的療效， 或者是相互之間將不良反應(yīng)消除，發(fā)揮出各自的優(yōu)勢，又或者出現(xiàn)和單一中藥不相同的效果新配伍，即藥對。 所以，正是因為藥對一般屬于多個復(fù)方成分， 針對其藥對展開深入性的研究相當關(guān)鍵，不僅可以改善藥效，將藥物運用的范圍大大擴充，更可以減少不良反應(yīng)的出現(xiàn)[1-5]，比較適合運用在一些病情復(fù)雜的患者中。 與此同時，針對中醫(yī)復(fù)方相關(guān)研究，需分析出配伍的內(nèi)在規(guī)律性。 尤其是在最近幾年，針對于柴胡與赤芍、 醋柴胡與白芍配伍產(chǎn)生的藥效學(xué)問題早已經(jīng)開展相關(guān)研究， 會牽涉中樞神經(jīng)系統(tǒng)和消化系統(tǒng)以及抗炎效果等， 然而該次研究選擇169 只小鼠（2020年1 月—2021 年1 月）作為該次分析的比較樣本，單一藥物柴胡有著顯著性的藥理作用， 即有特征性的藥效學(xué)臨床指標，便對于柴胡與赤芍、醋柴胡與白芍配伍之前、之后產(chǎn)生的藥效學(xué)改變規(guī)律予以充分分析。 現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 藥材

①赤芍；②醋柴胡；③白芍。

醋柴胡， 是按照我國的中藥藥典內(nèi)關(guān)于醋炙柴胡法予以制作。 當藥材被切之后進行飲片的制備，具體煎加上10 倍劑量的蒸餾水，予以煮沸之后，再次煎煮上40 min，將上清液有效濾出， 可以把余下的沉渣增加8 倍劑量的蒸餾水給予煮沸以后，再煎煮上20 min，再次將上清液有效濾出。 需把兩煎獲得的濾液放置在一起，進行減壓濃縮處理到1 g/mL 的生藥，處于-20℃環(huán)境下予以凍存以及備用處理[6-9]。 在臨用之前再次使用蒸餾水予以配制，直到研究所需的濃度便可。

1.2 試劑

①硫酸阿托品注射液；②加硫酸新斯的明注射液；③乙酰水楊酸片；④苯酚紅；⑤伊文思藍。

1.3 動物

在科學(xué)院中選擇實驗室動物小鼠169 只， 且雌雄均可使用，大鼠為雄性且為二級。

1.4 儀器

①離心機，為美國所福“Sovrall super T21”。 ②半自動生化分析儀，為北京中生“ZS-3 型”。

1.5 方法

把體質(zhì)量是18～20 g 雄性的小鼠進行分組安排，保證每一組至少都有8 只。

針對每一組的用藥狀況見表1，需持續(xù)用藥干預(yù)4 d。然后，在最后一次的用藥以后，給每一只鼠的腹腔都注射上濃度為1.1%的冰醋酸，且劑量是0.1 mL/10 g。再觀察當小鼠注射之后的5～20 min 時間里動物扭動的實際次數(shù)，當注射了冰醋酸30 min 以后， 對于每一只鼠予以靜脈注射濃度為0.5%的伊文思藍（生理鹽水）溶液，劑量是0.1 mL/10 g。 等到20 min 之后給予脫頸椎處死，再對腹部輕輕按揉50 次，隨后將腹部皮膚上的肌肉成功剪開，再運用5 mL的生理鹽水對腹腔進行沖洗[10-12]， 且在搜集好腹腔液以后，運用3 000 r/min 做離心操作5 min，將上清液吸取于吸光度是590 nm 數(shù)值位置予以比色觀察。

2 結(jié)果

2.1 對醋酸致痛及腹腔毛細血管通透性增加的影響

表1 中可以觀察到在柴胡劑量是16 g/kg、32 g/kg 時，沒有觀察到顯著的鎮(zhèn)痛效果與抗炎效果， 然而醋柴胡劑量是16 g/kg、32 g/kg 時，動物扭體次數(shù)顯著性的降低（以對照組為參考），這說明柴胡醋炙以后能獲得顯著的鎮(zhèn)痛效果。 在赤芍劑量是32 g/kg 時， 動物扭體次數(shù)顯著性降低（以對照組為參考），其柴胡與赤芍參考1∶1 的比例進行聯(lián)合煎煮，運用藥物劑量在32 g/kg 時，沒有觀察到顯著的鎮(zhèn)痛效果。 當運用16 g/kg 劑量進行合煎， 其醋柴胡以及白芍參考1∶2 比例時，能獲得顯著性的鎮(zhèn)痛效果，在劑量是32 g/kg 時，獲得的鎮(zhèn)痛效果不夠顯著。

表1 柴胡、赤芍, 醋柴胡、白芍配伍前后對醋酸致痛及毛細血管通透性增加的影響（）Table 1 Pain and capillaries induced by acetic acid before and after the compatibility of Bupleurum, Paeony, vinegar bupleurum and paeony effects of increased permeability（）

表1 柴胡、赤芍, 醋柴胡、白芍配伍前后對醋酸致痛及毛細血管通透性增加的影響（）Table 1 Pain and capillaries induced by acetic acid before and after the compatibility of Bupleurum, Paeony, vinegar bupleurum and paeony effects of increased permeability（）

組別 劑量（g/kg）動物數(shù)量（只） 扭體次數(shù) OD 值對照組柴胡+赤芍柴胡柴胡赤芍赤芍乙酰水楊酸鈉對照組醋柴胡+白芍醋柴胡+白芍醋柴胡醋柴胡白芍白芍乙酰水楊酸鈉32.00 16.00 32.00 16.00 32.00 0.80 16.00 32.00 16.00 32.00 16.00 32.00 0.80 18 10 8 10 9 10 10 16 11 12 12 12 12 12 7 24.30±11.70 18.80±12.80 16.20±8.80 18.30±12.70 16.90±9.40 10.60±7.50 4.30±4.90 24.00±7.90 17.40±6.70 18.50±6.30 12.60±6.30 10.30±6.20 20.40±10.40 19.50±9.40 2.00±3.80 2.12±0.55 2.00±0.39 2.05±0.41 2.26±0.70 2.38±0.62 2.05±0.48 1.40±0.64 1.59±0.67 2.04±0.66 1.90±0.58 1.79±0.58 1.91±0.52 1.98±0.39 2.11±0.41 0.92±0.48

2.2 對小鼠胃排空小腸推進功能的影響

2.2.1 對正常小鼠胃排空小腸推進功能的影響 小鼠為雌性，其體質(zhì)量在（20.00±1.00）g，需禁食約 24 h，然后參照體質(zhì)量情況予以分組安排， 保證每組小鼠10 只。 每一組的給藥劑量見表2：當體積達到0.2 mL/10 g，進行給藥約1 h之后，運用濃度為0.1%的酚紅處理，劑量0.8 mL/只。 運用酚紅半小時后將動物成功處死，選擇胃與小腸的全長，且把小腸的全長平均劃分成5 小段， 再把胃腸的每一小段都放置到3 mL、0.1 M 的氫氧化鈉溶液中進行消化性提取。 通過24 h 的消化處理后，運用濃度為20%的1 mL 三氯醋酸進行蛋白的沉淀， 以3 000 r/min 的速度離心處理約15 min，選擇上清液共計1 mL，再加入到 3 mL、5 M 的氫氧化鈉溶液，充分混勻以后，置于波長是560 nm 位置比色，從而計算到OD 值以及檢驗值t 值等。

表2 中可以觀察到，柴胡為16 g/kg 時，進行給藥1 次后，對于胃排空以及小腸的推進效果影響差異性小。 赤芍為16 g/kg 時，其小腸第4 段、第5 段的酚紅要比常規(guī)的對照組低很多，說明了存在減緩解痙推進效果。 當柴胡以及赤芍運用1∶1 比例進行配伍， 推進酚紅抑制效果更顯著一些，讓腸段2 對應(yīng)OD 值得到顯著性增高，醋柴胡以及白芍參考1∶2 比例予以配伍，當劑量是16 g/kg 時，也能夠呈現(xiàn)出一定的解痙協(xié)同效果。

表2 柴胡、赤芍、醋柴胡、白芍配伍前后對正常小鼠胃腸推進功能的影響（）Table 2 Effects of Bupleurum, Paeony, Vinegar Bupleurum and Paeony on gastrointestinal propulsive function of normal mice before and after compatibility（）

表2 柴胡、赤芍、醋柴胡、白芍配伍前后對正常小鼠胃腸推進功能的影響（）Table 2 Effects of Bupleurum, Paeony, Vinegar Bupleurum and Paeony on gastrointestinal propulsive function of normal mice before and after compatibility（）

組別 劑量（g/kg）OD 值胃腸1 腸2 腸3 腸4 腸5正常對照阿托品柴胡+赤芍柴胡赤芍醋柴胡+白芍白芍醋柴胡0.01 16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 0.81±0.32 1.08±0.32 0.92±0.20 0.57±0.27 0.62±0.29 0.92±0.32 0.70±0.25 0.99±0.34 0.36±0.17 0.18±0.06 0.28±0.07 0.20±0.08 0.31±0.20 0.08±0.01 0.31±0.17 0.17±0.10 0.97±0.83 0.94±0.66 2.13±0.91 1.10±0.89 1.60±0.91 1.08±0.85 1.06±0.97 0.49±0.50 1.89±0.53 1.63±0.28 1.31±0.85 2.34±0.93 1.94±1.00 2.32±0.88 2.37±0.74 2.04±0.72 1.13±0.84 1.40±0.88 0.12±0.08 0.32±0.43 0.17±0.04 0.10±0.07 0.06±0.01 0.90±1.11 0.01±0.01 0.15±0.13 0.07±0.02 0.09±0.10 0.11±0.01 0.03±0.01 0.08±0.01 0.01±0.01

2.2.2 對新斯的明處理小鼠胃排空及小腸推進功能的影響小鼠的選擇同上，包含正常對照組與新斯的明組以及新斯的明+給藥組，具體的劑量使用為表3：體積是0.2 mL/10 g,進行給藥為30 min 以后，不含正常對照組，剩下的其他小組每只小鼠使用新斯的明劑量是0.1 mg/kg， 約給藥了1 h之后，運用濃度是0.1%的酚紅予以每只小鼠0.8 mL，下述方法與2.2.1 保持同步。

表3 柴胡、赤芍, 醋柴胡、白芍配伍前后對新斯的明處理小鼠胃腸運動功能的影響（）Table 3 Effects of bupleurum, paeony, vinegar bupleurum, paeony before and after the combination on gastrointestinal motility of neostimine treated mice（）

表3 柴胡、赤芍, 醋柴胡、白芍配伍前后對新斯的明處理小鼠胃腸運動功能的影響（）Table 3 Effects of bupleurum, paeony, vinegar bupleurum, paeony before and after the combination on gastrointestinal motility of neostimine treated mice（）

組別 劑量（g/kg） 新斯的明（μg/kg）OD 值胃腸1 腸2 腸3 腸4 腸5正常對照新斯的明柴胡+赤芍柴胡赤芍醋柴胡+白芍白芍醋柴胡16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 1.01±0.21 0.39±0.21 0.67±0.33 0.75±0.42 0.80±0.31 0.65±0.24 0.40±0.28 0.52±0.27 0.22±0.09 0.12±0.05 0.10±0.05 0.16±0.07 0.27±0.16 0.07±0.02 0.09±0.03 0.11±0.05 0.23±0.75 0.91±0.62 1.03±0.23 0.76±0.25 1.10±0.64 0.93±0.15 0.78±0.48 0.69±0.28 1.51±0.73 1.76±0.64 1.71±0.53 1.77±0.41 1.50±0.71 2.12±0.23 1.93±0.33 1.92±0.40 0.64±0.48 0.51±0.41 0.26±0.27 0.16±0.14 0.28±0.13 0.11±0.06 0.82±0.56 0.75±0.56 0.03±0.01 0.06±0.03 0.04±0.01 0.02±0.01 0.18±0.03 0.05±0.01 0.14±0.04 0.08±0.07

從表3 中可以觀察，柴胡以及赤芍參考1∶1 的比例配伍之后，運用16 g/kg 的劑量實施新斯的明處死小鼠，其胃腸推進功能沒有顯著性影響與變化， 然而醋柴胡以及白芍參考1∶2 的比例配伍之后， 運用16 g/kg 的劑量實施新斯的明處死小鼠，其胃腸推進功能產(chǎn)生顯著性變化，即抑制效果， 體現(xiàn)為小腸4 段其酚紅含量要比新斯的明組低很多；然而小腸3 段其酚紅含量有所增高。

3 討論

當前，中醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，中醫(yī)的藥對運用早已經(jīng)有很長的一段時間， 其在臨床醫(yī)學(xué)運用之中利用藥對能夠獲得比較獨特的效果。 在《太平惠民和劑局方》的逍遙散之中，曾記載著：柴胡與白芍屬于藥對，其中柴胡有著疏肝解郁的效果，而白芍有著養(yǎng)血斂陰以及柔肝和血的效果，將兩者配伍之后獲得的藥效可以疏肝和血。 另外，柴胡與赤芍屬于藥對，被最早記錄在王清任著寫的《醫(yī)林改錯》一書中——血府逐瘀湯。 將柴胡以及赤芍進行配伍以后，能夠達到理氣活血的效果，使用赤芍比白芍更容易增加效果。而且在其《本草經(jīng)疏》當中，也還記錄著赤芍以及白芍兩種藥物存在的區(qū)別（不同），即芍藥，被《圖經(jīng)》記錄著兩種情況，即金芍藥的顏色為白，木芍藥的顏色為赤。 其中赤芍有促進小便散血的作用，白芍有止痛下氣的效果，因此赤芍行血，白芍補血。 也就是說，白芍為補、赤芍為瀉；白芍能收、赤芍能散[13]。但是，現(xiàn)在使用的白芍以及赤芍在藥材方面的主要不同就是，原本植物來源有差別，加工方法也有差別。 芍藥最為主要的成分便是芍藥苷，予以加工為藥材以后，其芍藥苷的含量實際上很低，通常比1%還要低。 并且，赤芍當中的芍藥苷在含量上卻相對高一些，通常是3.5%～8.0%。 具體分析，由于赤芍以及白芍在原植物的來源上有差別，選用的加工工藝方法也有差別造成的。芍藥苷能夠擴張機體的血管壁，并且也增加冠脈血流量，對心悸氧化、供應(yīng)狀況予以改善[14]。與此同時，還能夠?qū)ρ“宓木奂闆r進行抑制，針對血小板的cAMP 指標水平予以增高等。 白芍能夠抗心肌缺血，并且實現(xiàn)抗血小板栓塞目標，控制紅細胞的剛性表現(xiàn)以及血液黏稠度，非常有利于控制血小板聚集情況，減少紅細胞進行壓積，也能控制抗凝血酶的綜合活性。

該研究顯示在相同的劑量標準下， 柴胡以及醋柴胡于同一條件小動物進行作用時， 其醋柴胡使用的藥理強度要高于柴胡[15]，因此能夠說明柴胡運用在鎮(zhèn)痛方面以及抗炎方面綜合藥效沒有醋柴胡更加理想， 這也有可能是由于柴胡醋炙了以后有利于皂苷相關(guān)成分的溶出。 當柴胡與赤芍進行配伍，醋柴胡和白芍進行配伍，獲得的抗炎效果與鎮(zhèn)痛效果無顯著性的協(xié)同機制作用， 但于單味藥的運用比較時，僅有少許的推進效果，說明將兩種藥物進行配伍以后針對解痙活性表現(xiàn)出了協(xié)同效果[16-17]。 按照醋柴胡以及白芍的藥對配伍，然后分析化學(xué)成分，顯示了兩種藥物一起煎煮以后， 某些成分含量也會相對發(fā)生些許變化。

從研究結(jié)果來看，以醋酸止痛效果為例，在柴胡劑量是16 g/kg、32 g/kg 時，沒有觀察到顯著的鎮(zhèn)痛效果、抗炎效果，然而同等劑量標準下，柴胡醋炙以后能獲得顯著鎮(zhèn)痛效果。 在赤芍劑量是32 g/kg 時， 觀察到一定的鎮(zhèn)痛效果，但柴胡∶赤芍為1∶1 的比例進行聯(lián)合煎煮，運用藥物劑量在32 g/kg 時，沒有觀察到顯著鎮(zhèn)痛效果；當運用16 g/kg劑量進行合煎，且醋柴胡：白芍為1∶2，能獲得顯著性的鎮(zhèn)痛效果。 在劑量是32 g/kg 時，相反沒有顯著鎮(zhèn)痛效果。 與巫丹[18]研究內(nèi)容一致，選擇給小鼠腹腔注射醋酸，針對藥物鎮(zhèn)痛以及抗炎效果展開觀察， 發(fā)現(xiàn)在柴胡劑量是16 g/kg、32 g/kg 的時候，不會呈現(xiàn)出顯著性鎮(zhèn)痛以及抗炎效果；但是醋柴胡劑量是16 g/kg、32 g/kg 時，顯示會呈現(xiàn)出柴胡醋炙之后的鎮(zhèn)痛效果加強。 當赤柴劑量是32 g/kg 時， 且將柴胡與赤芍以1∶1 的比例進行合煎， 隨后運用32 g/kg 劑量給藥沒有顯著性鎮(zhèn)痛效果； 當以16 g/kg 的劑量合煎且保證醋柴胡以及白芍為1∶2 的比例給藥時， 鎮(zhèn)痛效果顯著，但是以32 g/kg 劑量時沒有顯著性鎮(zhèn)痛作用。 因此，醋炙柴胡在鎮(zhèn)痛方面、利膽方面能夠形成強藥效作用。

綜上所述， 以化學(xué)成分的改變?yōu)榛A(chǔ)去分析柴胡與赤芍以及醋柴胡與白芍的藥對配伍以后合用， 更加可以促進對中藥復(fù)方配伍產(chǎn)生的規(guī)律性進行一定解析。 即醋炙柴胡于鎮(zhèn)痛方面與利膽方面獲得的藥效相對被增強，而柴胡與赤芍以及醋柴胡與白芍進行配伍以后獲得的解痙作用相對有所增強；然而，柴胡與赤芍的配伍，醋柴胡與白芍的配伍，都在鎮(zhèn)痛方面、抗炎方面沒有顯著性的協(xié)同效果。