乙肝病毒相關肝細胞肝癌中性激素受體的表達及其意義

李媛，郭琳，張松，侯紹章

1.寧夏醫科大學護理學院，寧夏銀川 750004；2.寧夏醫科大學總醫院，寧夏銀川 750004；3.寧夏醫科大學基礎醫學院，寧夏銀川 750004

肝細胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種最多發的肝原發性腫瘤，致死性腫瘤中排名第二位[1]。乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）的感染存在于超過80%的HCC患者中[2]，有研究表明相比于女性，男性更容易感染HBV，這說明早在HCC癌前病變階段男女之間的差異就已經存在[3]。有研究認為雌二醇可通過激活雌激素受體（estrogen receptor，ER）在抑制肝癌細胞增殖和介導癌細胞凋亡方面起到重大影響，并對HBV相關的肝癌進展起到保護作用[4]。近些年研究發現雄激素受體（androgen receptor，AR）尤其是在胞核內表達的激活AR在HCC癌細胞及癌旁肝細胞中的表達與病理組織學分級[5]以及預后[6]有關。HBV感染是HCC發生的重要危險因素，且機體對于病毒感染的應對也存在性別差異[7]。該研究回顧性選取2016年6月—2020年12月240例HBV相關HCC病例進行研究，旨在探討性激素受體（AR、ER）在HBV相關HCC癌及癌旁組織的表達情況，以期在HBV相關HCC患者的診斷、治療、預后等方面提供新的思路。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象來源于回顧性選取寧夏某醫院病理科確診為HCC患者的相關臨床（包括年齡、性別等）及病理資料（包括癌細胞分化程度、mVI分級、癌旁組織有無肝硬化、有無衛星灶等），經納入、排除標準篩查后共計HBV相關HCC患者240例，從上述240例HBV相關HCC病例中進行簡單隨機抽樣（分別從女性52例和男性188例中進行簡單隨機抽樣），抽出HBV相關HCC患者54例（女25例，男29例，平均年齡55歲）的組織蠟塊行免疫組織化學（immunohistochemistry，IHC）檢測。

1.2 方法

使用IHC檢測AR、ER在54例HBV相關HCC癌及癌旁組織標本中的表達情況。將組織經常規處理、切片后，按照說明書操作進行免疫組化染色。

1.3 觀察指標

運用半定量計數評估癌細胞及癌旁肝細胞中AR、ER的IHC染色，陽性結果以腫瘤細胞和（或）癌旁肝細胞內出現棕黃/黃褐色顆粒為標記。每張切片任意觀察5個高倍鏡（×400倍）視野，計數100個細胞/視野后取平均，細胞無染色或陽性細胞數＜5%為（－），≥5%為（＋）。

1.4 統計方法

采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，計數資料采用[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AR在HBV相關HCC癌細胞及癌旁肝細胞中的表達情況

AR陽性定位于細胞的胞漿和（或）胞核，陽性呈棕黃/黃褐色（圖1、圖2）。在54例癌組織及癌旁組織中，AR陽性表達率分別為癌細胞核陽40.7%（22/54）、漿陽3.7%（2/54）、核漿雙陽0.0%（0/54），癌旁肝細胞核陽1.9%（1/54）、漿陽9.3%（5/54）、核漿雙陽85.2%（46/54），且AR在癌細胞與癌旁肝細胞間的表達差異有統計學意義（P＜0.001），見表1。

表1 AR在HBV相關HCC癌及癌旁肝細胞中的表達情況[n(%)]

圖1 HBV相關HCC癌細胞中AR的表達（×400倍）

圖2 HCC癌旁肝組織中AR的表達（×400倍）

2.2 ER在HBV相關HCC癌細胞及癌旁肝細胞中的表達情況

ER陽性定位于細胞的胞核，陽性呈棕黃色（圖3）。在54例HBV相關HCC癌及癌旁組織中，ER在癌細胞中表達率為0.0%（0/54），在癌旁肝細胞中則為75.9%（41/54），癌及癌旁組織間的表達差異有統計學意義（P＜0.001），見表2。

圖3 HBV相關HCC癌及癌旁肝組織中ER的表達（×400倍）

表2 HBV相關HCC癌及癌旁組織中ER的表達情況[n(%)]

3 討論

HCC是最多發的肝細胞源性惡性腫瘤，而HBV感染、男性在HCC發展中屬于重要因素[2，7]。目前有關AR及ER在HCC發生發展中的作用及機制未像其他激素依賴性腫瘤一樣完全明確，尤其是其在HBV相關HCC中的表達及意義仍需深入學習和探討。

AR是一種被睪酮或二氫睪酮激活后連接到DNA特殊區域上進而調控相關基因表達的轉錄因子，有研究表明AR在HCC發生發展中起到的重要作用是通過AR的激活實現的而非僅僅是AR受體的存在[8]，相關研究結果表明67.7%肝癌細胞表達AR，癌細胞中AR陽性率要高于癌旁肝細胞且其表達在癌細胞、癌旁肝細胞、正常肝組織中依次減少[9-10]。進一步挖掘AR在其中參與的通路及涉及的效應能有助于更好地了解AR在HCC中所扮演的具體角色，進而為HCC患者的靶向激素治療提供理論依據。在該研究中發現，AR在HBV相關HCC患者癌細胞中以核陽模式為主（40.7%），而在癌旁肝細胞中則以核漿雙陽模式為主（85.2%）。如上述，定位在胞漿中的多為未活化的AR，定位在胞核的則多為活化后的AR[11]，這支持了AR在HCC發生、發展中的影響不僅僅是與癌細胞中受體的存在有關，而AR主要通過雄激素（睪酮）激活，這在某種程度上解釋了HCC患者中男性發病率高的原因。

ER是雌二醇所有受體的總稱，主要包括了ER-α，ER-β和GPER。如生理劑量的雌激素通過ER-α，經由抑制Toll樣受體適配蛋白MyD88調節的NF-κB活化來抑制IL-6的促腫瘤生長能力并下調腫瘤生長因子和在腫瘤微環境中的IL-6表現出抑制HCC癌轉移[12]。除此之外，出于免疫系統表現出的性二態性，相較于男性，女性能夠更好地應對HBV感染[13]，而且女性HBV攜帶者的病毒載量低于男性攜帶者[14]，較男性更容易產生HBV相關抗體，如HBeAb和HBsAb[14-15]。這提示雌激素及其受體在HBV感染及HCC發生、發展中的作用是復雜而未完全明確的，需要更進一步地研究。

在該研究中，與AR的表達模式不同，ER的表達僅定位于細胞核，且未發現ER在癌細胞中表達的病例，而在癌旁肝細胞中則有75.9%（41/54）的陽性率。

綜上所述，AR在HBV相關HCC癌細胞中主要表達于細胞核，在癌旁肝細胞中主要在細胞核、漿中表達，相比于作為明確HCC診斷的IHC標志物，AR更適合作為HBV相關HCC患者的一項預后指標，或可預測HBV相關HCC患者預后提供一定理論依據。ER主要在癌旁肝細胞細胞核中表達，ER或可成為鑒別高分化癌細胞與癌旁增生的標記物。