血清Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致血管性癡呆的相關性

鹿濱麒，陳建明

（南陽市第二人民醫院神經內科，河南南陽473000）

缺血性腦卒中（Ischemic stroke）是腦動脈狹窄或阻塞，導致腦供血不足，致腦組織壞死的腦缺血類型的總稱,為臨床常見的腦血管疾病之一[1]。血管性癡呆(Vascular dementia，VD)指由缺血性腦卒中、出血性腦卒中等腦血管疾病引起的智力及認知功能障礙的綜合征[2,3]。Klotho蛋白包括αKlotho和β Klotho兩種,為成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor，FGF）受體復合物的主要成分[4,5]。有研究表明[6]，FGF及Klotho蛋白的高表達有助于延長壽命，且Klotho蛋白具有抗炎、抗血小板聚集、保持血管擴張的作用。孫俊[7]等人認為，Klotho基因通過體內基因表達,產生的膜結合型蛋白與分泌型蛋白均對心血管疾病有明顯保護作用，且濃度越高，心血管疾病發病率越低。本研究旨在探討血清Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致血管性癡呆的相關性，希望為臨床提供更多的參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年2月至2018年1月我院收治的126例缺血性腦卒中患者作為研究對象。納入標準：⑴年齡60～85歲；⑵確診為缺血性腦卒中者；⑶自愿受試。排除標準：⑴出血性腦卒中者；⑵精神病患者；⑶除血管性癡呆的其他類型癡呆者；⑷依從性差。所有患者在發病后3個月復診，分為血管性癡呆（癡呆組）和非癡呆組，癡呆組60例，男性36例，女性24例，年齡72～85歲，平均年齡為78.36±4.23歲；非癡呆組66例，男性38例，女性28例，年齡66～78歲，平均年齡為76.43±4.52 歲。兩組患者一般資料無明顯差異，不具有統計學意義（P＞0.05）?；颊呒捌浼覍倬鶎Ρ狙芯砍浞种椋液炇鹬橥鈺狙芯拷浳以簜惱砦瘑T會批準。

1.2 方法 所有患者入院后均進行血液檢查、心電圖檢查及頭顱電子計算機斷層掃描（Computed Tomography，CT）和磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging，MRI）檢查確定診斷；所有患者入院后均給予抗血栓形成、抗血小板凝集、降低腦水腫、降壓、降血糖等對癥治療；所有患者均在發病后3個月采集清晨空腹狀態下靜脈血5ml，測定血清中超敏C反應蛋白 （hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）、高半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）及Klotho蛋白水平,具體方法如下：⑴hs-CRP:采集的靜脈血離心后取上清液,采用膠乳粒子增強比濁免疫測定法(Latex particle enhanced turbidimetric immunoassay,LETIA)，通過全自動生化分析儀（日本日立公司生產，型號7180）及hs-CRP試劑盒進行測定。⑵Hcy：將乙二胺四乙酸二鈉（北京索萊寶生物科技有限公司，型號E8030）加入采集的靜脈血標本中進行抗凝處理，加入磺基水楊酸（北京索萊寶生物科技有限公司，型號S8330）以沉淀蛋白質，離心后取上清液，加入三乙酰氧基硼氫化鈉（美國SIGMA公司,編號316393）還原胺化,加入單溴二胺（美國艾美捷科技有限公司，型號AAT-633）反應3分鐘,后加入無水乙酸以終止反應,將150mm×4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠填料（Octadecylsilyl，ODS）插入樣本，使用高效液相色譜熒光檢測器（美國安捷倫科技有限公司生產，型號G1321A）激發波長365nm，發射波長475nm進行檢測，保持10.5分鐘。⑶Klotho蛋白：利用人Klotho蛋白檢測試劑盒（上?？道噬锟萍加邢薰?貨號KL-KL-Hu）及其說明書進行測定。

1.3 觀察指標 一般情況；體內hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平；缺血性腦卒中致VD的危險因素。

1.4 統計學處理 采用SPSS20.0軟件對數據進行統計分析。計量資料采用配對t檢驗；計數資料采用χ2檢驗；有序分類變量資料采用秩和檢驗；危險因素采用Logistic回歸分析；相關性分析采用Pearson檢驗；所有檢驗確定P值，做出推論。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者一般情況比較 兩組患者年齡、飲酒、梗死范圍上有顯著差異，具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組患者體內hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較 兩組患者體內hs-CRP、Hcy水平有明顯差異，且癡呆組水平明顯高于非癡呆組，具有統計學意義（P＜0.05）；兩組患者體內Klotho蛋白水平有明顯差異，且癡呆組明顯低于非癡呆組，具有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 危險因素Logistic回歸分析 年齡、hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平為缺血性腦卒中致VD的密切相關因素，具有統計學意義（P＜0.05）；高血脂和大面積梗死為缺血性腦卒中致VD的可能相關因素。見表3。

表1 兩組患者一般情況比較（例）

表2 兩組患者血清中體內hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較(±s)

表2 兩組患者血清中體內hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較(±s)

組別 例數癡呆組非癡呆組60 66 t P hs-CRP（mg/L）Hcy（μmol/L）4.98±0.86 4.57±0.92 2.577 0.011 18.36±10.42 13.52±11.36 2.484 0.014 Klotho蛋白（pg/ml）165.69±96.68 324.64±87.63 9.681 0.000

表3 危險因素Logistic回歸分析

3 討論

缺血性腦卒中為VD的主要發病原因。有研究表明[8]，年齡、高血壓、LDL等為VD的危險因素。腦部缺血可導致體內膽堿能通路受損[9]。膽堿能神經(cholinergic nerve)指末梢可釋放乙酰膽堿（Acetylcholine，Ach）的神經纖維，主要分布于大腦白質區域。腦白質損傷所致認知功能障礙的機制主要為額葉-皮質下聯絡纖維破壞，導致執行功能障礙[10]。

Klotho蛋白主要為成纖維細胞生長因子23（fibroblast growth factor23，FGF23）結合蛋白。FGF為垂體和下丘腦分泌的一種多肽,可促進干細胞生成，產生大量紅細胞及白細胞，增加左心室厚度及心肌彈性，還可減少體內LDL含量，并防止脂質沉積于血管壁，減少血栓形成[11,12]。本研究結果顯示，兩組患者年齡、飲酒、梗死范圍上有顯著差異，說明以上因素可作為缺血性腦卒中致VD的高危因素。hs-CRP為血漿中的一種C反應蛋白，對心血管等疾病具有指導意義。有研究表明，hs-CRP水平與梗死面積及神經功能缺損程度相關。Hcy是一種含巰基的氨基酸,為蛋氨酸與半胱氨酸代謝的中間產物。Hcy可直接或間接導致血管內皮組織細胞的損傷，并能促進血管平滑肌增殖，減少LDL的氧化，使血小板聚集，促進血栓形成[13,14]。本研究結果顯示,兩組患者體內hs-CRP、Hcy水平有明顯差異,且癡呆組水平明顯高于非癡呆組；兩組患者體內Klotho蛋白水平有明顯差異，且癡呆組明顯低于非癡呆組，說明VD患者體內hs-CRP、Hcy水平高于未發病者，Klotho蛋白水平低于未發病者。

綜上所述，Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致VD密切相關,可作為缺血性腦卒中后預測VD的標志物，Klotho蛋白的低表達可導致血管內皮功能障礙，使腦白質灌注不足，腦神經細胞損傷。