子癇前期孕婦孕中期GPⅡb/Ⅲa受體的表達及其對母嬰結局的影響

劉喜娟 陳安兒 程淑清

[摘要] 目的 探討子癇前期（PE）孕中期孕婦血清GPⅡb/Ⅲa受體的表達水平變化及對母嬰預后的影響。 方法 選取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例為PE組，對照組為50例正常妊娠婦女。PE組以GPⅡb/Ⅲa受體表達水平中位數為界，分為高GPⅡb/Ⅲa組和低GPⅡb/Ⅲa組各35例。采用流式細胞儀檢測血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平。記錄和比較各組孕婦的分娩方式、母嬰結局。 結果 PE組GPⅡb/Ⅲa表達顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）;與低 GPⅡb/Ⅲa組、高 GPⅡb/Ⅲa組相比，對照組自然分娩率高，剖宮產率低，差異均有統計學意義（P<0.05）;與低GPⅡb/Ⅲa 組、高 GPⅡb/Ⅲa 組相比，對照組子癇、凝血異常、心功能不全、腎功能損害等不良妊娠發生率均較低，差異均有統計學意義（P<0.05）;低 GPⅡb/Ⅲa 組、高GPⅡb/Ⅲa 組的小早產兒（<34周）、小于胎齡兒發生率高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。 結論 GPⅡb/Ⅲa受體表達水平與母嬰不良結局發生率間有關，對PE患者母嬰結局的預測具有重要參考價值。

[關鍵詞] 子癇前期;血小板膜糖蛋白;GPⅡb/Ⅲa;新生兒

[Abstract] Objective To investigate the changes of expression level of serum GPⅡb/Ⅲa receptor in the second trimester of pre-eclampsia（PE） and its impacts on maternal and infant outcomes. Methods PE patients who were delivered and admitted to our hospital from September 2016 to September 2018 were selected as the PE group（n=70）， and normal pregnant women were selected as the control group（n=50）. Meanwhile， the PE group was divided into the high GPⅡb/Ⅲa group（n=35） and the low GPⅡb/Ⅲa group （n=35）. The expression level of serum GPⅡb/Ⅲa receptor was detected by flow cytometry. The delivery mode and maternal and infant outcomes of pregnant women in each group were recorded and compared. Results The expression of GPⅡb/Ⅲa in the PE group was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. Compared with the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group， the natural delivery rate of the control group was high，the forceps assisted delivery and cesarean section rate were low，and the differences were statistically significant（P<0.05）. Compared with the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group， the incidences of adverse pregnancy events such as eclampsia，abnormal coagulation， cardiac insufficiency and renal function damage in the control group were lower， and the differences were statistically significant（P<0.05）. The incidences of premature infants（< 34 weeks） and infants younger than gestational age in the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion The expression level of GPⅡb/Ⅲa receptor is positively correlated with the impacts of maternal and infant adverse outcomes，which is of important reference value for predicting maternal and infant outcomes for PE patients.

[Key words] Pre-eclampsia; Platelet membrane glycoprotein; GPⅡb/Ⅲa; Newborn

子癇前期（Preeclampsia，PE）是一種由遺傳因素、后天因素和環境因素共同作用導致機體多系統功能障礙的妊娠期特有疾病，表現為高血壓、蛋白尿、高凝血、高纖溶傾向[1]，其在所有妊娠中發生率為3%～7%[2]。免疫不良、胎盤發育不足、滋養細胞浸潤、胎盤缺血、氧化應激和血栓形成是PE發展的關鍵因素[3]，病情嚴重者會發生昏迷、抽搐，甚導致母嬰死亡[4-6]。至今仍無法用一種理論來解釋該病的所有實驗室改變和臨床表現[7]，故尋找簡單、有效的預測不良妊娠結局的臨床和實驗室指標，建立相關的預測模型，也是國內外一直以來研究的難點、重點和熱點[8-10]。本研究旨在通過研究孕婦孕中期GPⅡb/Ⅲa受體的表達及其對母嬰結局的影響，探討GPⅡb/Ⅲa受體與子癇前期的相關性，期望在子癇前期早期預防、臨床治療方面提供一定的指導意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例為PE組，PE組以GPⅡb/Ⅲa受體表達水平中位數為界，分為高GPⅡb/Ⅲa組和低GPⅡb/Ⅲa組，每組各35例。對照組為50例正常妊娠婦女。PE組孕婦年齡25～34歲，平均（28.99±5.02）歲，孕次1次，產次1次，入院時孕齡20～28周，平均（25.93±2.09）周;對照組孕婦年齡25～34歲，平均（27.21±5.32）歲，孕次1次，產次1次，入院時孕齡20～28周，平均（28.56±2.27）周。兩組孕婦的BMI均<28 kg/m2，兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經本院臨床醫學倫理委員會審核批準，且所有入選對象均簽署知情同意書。納入標準：①妊娠20周后出現高血壓（收縮壓≥140 mmHg或舒張壓≥90 mmHg）并伴有蛋白尿≥300 mg/24 h或隨機尿蛋白定性≥（+）者;②孕前血壓及腎功能正常者;③全程無中斷參與者。排除標準：既往有子癇前期病史者;有不良嗜好者;妊娠合并其他疾病者;染色體疾病、生殖道感染性疾病、代謝內分泌疾病及免疫系統性疾病等其他內外科合并癥者。

1.2 方法

1.2.1 血清GPⅡb/Ⅲa受體表達? 入院后各組研究對象均抽取靜脈血2 mL（加肝素抗凝劑），具體方法：①取2 mL血標本，送流式細胞儀檢測各組血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的水平。試劑包括異硫氰酸標記的抗血小板活化GPⅡb/Ⅲa的單克隆抗體PAC-1-FITC、藻紅蛋白標記的抗GPⅡb的單克隆抗體CD41-PE及IgM同型對照抗體。取流式管3根，分別為對照管和測定管1和測定管2。對照管各加入10 μL的IgM同型對照抗體和CD41-PE作為血小板射門對照檢測，測定管1加入10 μL的CD62p-PerCP和CD41-PE，測定管2加入10 μL的PAC-1-FITC和CD41-PE。各管加PBS磷酸鹽緩沖液400 μL，抗凝全血5 μL，加入4℃預冷的1%多聚甲醛1 mL，4℃冰箱保存，固定15 min后上機檢測。具體實驗步驟按相關實驗操作標準及相關儀器說明書嚴格執行，并記錄血小板GPⅡb/Ⅲa表達陽性率（%）。

1.2.2追蹤臨床資料? 記錄各研究對象的分娩方式（自然分娩、產鉗助娩、剖宮產）。分娩前后產婦及圍產兒不良結局包括母親（子癇、凝血異常、心功能不全、腎功能損害）;圍產兒[Apgar評分<7分、新生兒呼吸窘迫、小早產兒（<34周）、小于胎齡兒]。

1.3統計學分析

采用SPSS 11.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用獨立樣本t檢驗;計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平

對照組孕中期孕婦血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平為（0.43±0.11）%，PE組孕婦血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平為（2.55±0.63）%，對照組孕中期血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平顯著低于PE組，差異有統計學意義（P<0.001）。GPⅡb/Ⅲa受體表達水平與母嬰結局相關性明顯，故以PE組孕中期GPⅡb/Ⅲa受體表達水平中位數（1.98±0.13）%為界，將該組孕婦進一步分為高GPⅡb/Ⅲa組和低GPⅡb/Ⅲa組，每組各35例。

2.2各組分娩方式比較

各組間自然分娩及剖宮產率比較，差異有統計學意義（P<0.05）。低GPⅡb/Ⅲa組、高GPⅡb/Ⅲa組的自然分娩率低于對照組，剖宮產率高于對照組，差異均有統計學意義（χ2：高GPⅡb/Ⅲa組vs.對照組=29.580、7.066;χ2：低GPⅡb/Ⅲa組vs.對照組=11.053、7.017，P<0.05）;低GPⅡb/Ⅲa組自然分娩率高于高GPⅡb/Ⅲa組，剖宮產率低于高GPⅡb/Ⅲa組，差異均有統計學意義（χ2：低GPⅡb/Ⅲa組vs.高GPⅡb/Ⅲa組=5.714、4.058，P<0.05），各組間產鉗助產率比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.3 各組母體不良結局比較

各組間孕婦母體不良結局比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。與低GPⅡb/Ⅲa組、高GPⅡb/Ⅲa組相比，對照組的母體不良結局中子癇、凝血異常、心功能不全、腎功能損害等發生率均較低，差異均有統計學意義（P<0.05）;高GPⅡb/Ⅲa組的子癇、凝血異常、腎功能損害發生率高于低GPⅡb/Ⅲa組，差異有統計學意義（χ2=4.158、4.480、4.503，P<0.05）。高GPⅡb/Ⅲa組與低GPⅡb/Ⅲa組心功能不全發生率比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

2.4各組圍生兒不良結局比較

各組圍生兒不良結局發生率比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。高GPⅡb/Ⅲa組Apgar評分<7分、新生兒呼吸窘迫、小早產兒（<34周）、小于胎齡兒等發生率高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;高GPⅡb/Ⅲa組小早產兒（<34周）、小于胎齡兒發生率高于低GPⅡb/Ⅲa組，差異均有統計學意義（P<0.05）。低GPⅡb/Ⅲa組小早產兒（<34周）、小于胎齡兒發生率高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

妊娠子癇前期是一種具有家族傾向的且與人種、種族和環境因素相關的多系統復雜疾病，目前該疾病的發病機制尚未明確，因此探尋其具體發病機制，以制訂有效的臨床防治新方案，已成為當前產科領域急需解決的難題之一。妊娠子癇前期是一種嚴重的妊娠并發癥，孕婦多臟器功能受到損傷。若得不到及時診斷和預測妊高征患者的高風險，母嬰隨時可能發生嚴重的并發癥。因此，研究妊娠高血壓綜合征的病理過程，分析判斷可能出現的嚴重并發癥，是于恰當時機終止妊娠及減輕圍生兒并發癥的重要條件[11-12]。已有研究發現，血小板聚集形成血栓，在子癇前期及子癇的發生、發展及預后過程中具有重要調節功能。當各種因素使血小板激活后，最終的共同通路都是通過GPⅡb/Ⅲa受體與纖維蛋白原“橋聯”黏聚成團，促使血小板聚集，最后導致血栓形成。GPⅡb/Ⅲa受體是血小板膜上含量最豐富的糖蛋白，只存在于血小板及其前體巨核細胞中。國內外多項研究表明[13-15]，GPⅡb/Ⅲa蛋白介導的血小板聚集、血栓形成在子癇前期的發生、發展及預后方面起到關鍵性調節作用[16]。但在健康孕婦中的表達是否影響母嬰結局的研究較少，還缺少大樣本數據。本研究結果顯示，PE患者自然分娩率大幅降低，剖宮產率顯著上升，這與臨床現狀吻合;與高GPⅡb/Ⅲa組比較，低GPⅡb/Ⅲa組自然分娩率升高，剖宮產率降低但較對照組仍偏高，提示剖宮產率上升與GPⅡb/Ⅲa受體表達水平升高有關。PE病情持續進展時全身小動脈收縮、血壓上升，加上妊娠期循環容量增加、心臟負荷加劇，機體無法代償時，將發生心功能不全甚至心衰[17]。部分患者隨著PE進展可出現血小板及凝血因子水平降低，觸發DIC發生，甚至子癇發作[18]。

本研究結果顯示，與對照組相比，PE組患者子癇、凝血異常、心功能不全、腎功能損害等不良結局發生率較高，與既往文獻報道結果一致;提示PE患者中GPⅡb/Ⅲa受體表達可預示母體不良結局發生。母體不良妊娠直接影響圍生兒結局。對照組、低GPⅡb/Ⅲa組、高GPⅡb/Ⅲa組三組相比，隨著GPⅡb/Ⅲa受體表達升高，如Apgar評分<7分、新生兒呼吸窘迫、小早產兒（<34周）、小于胎齡兒等圍生兒不良結局發生率較高，提示高GPⅡb/Ⅲa受體表達是圍生兒不良結局發生的高危因素，可能與PE患者母體小動脈收縮有關，小動脈收縮導致胎盤供給胎兒的營養和氧氣不足，最后對圍生兒產前、產時、產后生長發育產生不利影響[19-22]。故通過對高GPⅡb/Ⅲa受體表達患者進行針對性的干預可以優化圍生兒結局。

綜上所述，GPⅡb/Ⅲa受體表達水平與母嬰不良結局發生率間有關，所以在關注PE患者的血壓及尿蛋白變化的同時，應及時關注血清GPⅡb/Ⅲa受體表達水平是輔助診斷PE的可靠指標，對指導、監測應用抗凝治療具有重要意義。

[參考文獻]

[1] Noura AJ，Farah AK，Mohammad FK，et al.A brief overview of preeclampsia[J].Clin Med Res，2014，6（1）：1-7.

[2] Stillman IE，Karumanchi SA.The glomerular injury of preeclampsia[J].Am Soc Nephrol，2007，18（8）：2281-2284.

[3] Sircar M，Thadhani R，Karumanchi SA.Pathogenesis of preeclampsia[J].Current Opinion in Nephrology & Hypertension，2017，24（2）：131-138.

[4] 郭雪晶，倪鑫，黃鷹，等.妊娠中期子宮動脈切跡與子癇前期發病風險及血清內皮損傷、胎盤灌注不足的相關性研究[J].海南醫學院學報，2016，22（20）：2455-2458.

[5] 崔世紅，李園園，李根霞，等.早發型和晚發型重度子癇前期患者臨床指標及其與圍產兒結局的關系[J].中國臨床研究，2015，28（6）：720-722.

[6] 顧夢薇，孫麗洲.子癇前期再發與初發的臨床特點及妊娠結局的研究[J].現代婦產科進展，2016，25（8）：578-581.

[7] 趙群，孔祥.子癇前期的病因學研究進展[J].醫學研究雜志，2012，41（3）：17-19.

[8] 楊孜.生物學標記結合臨床風險推動子癇前期預測更上一層樓[J].中華圍產醫學雜志，2011，14（7）：385-389.

[9] Bolin M，Wikstrom AK，Wiberghzel E，et al.Prediction of preeclampsia by combining serum histidine-rich glycoprotein and uterine artery doppler[J].Am J Hypertens，2012， 25（12）：1305-1310.

[10] Akolckar R，Syngelaki A，Sarquis R，et al.Prediction of early，intermediate and late preeclampsia from maternal factors，biophysical and biochemical markers at 11-13 weeks[J].Prenat Diagn，2011，3l（8）：66-74.

[11] Stupin JH，Arabin B.Overweight and obesity before，during and after pregnancy：Part 2：Evidence-based risk factors and interventions[J].Geburtshilfe Frauen-heikd，2014，74（7）： 639-645.

[12] 孫秀杰.重度子癇前期孕婦終止妊娠時機選擇對新生兒結局的影響[J].內蒙古醫學雜志，2016，48（12）：1440-1442.

[13] Redman CW，Sargent IL.Circulating microparticles in normal pregnancy and pre-eclampsia[J].Placenta，2008， 29（Suppl A）：73-77.

[14] Salomon O，Katz BZ，Dardik R，et al.The relationship between levels of circulating microparticles，complications of pregnancy and resistance of blood flow in the feto-maternal circulation[J].Thromb Res，2007，119（Suppl 1）：114.

[15] 鄭明陽，馬曉艷，廖琪，等.子癇前期患者聯合檢測血小板膜糖蛋白及凝血酶原的臨床意義[J].中國微循環，2009，13（4）：297-299.

[16] Polat M，Biberoglu E，Guler I，et al.Coexistence of preeclampsia and inherited thrombophilia in Turkish pregnant women[J].Turkish Journal of Medical Sciences，2016，46（4）：1094-1100.

[17] 李麗紅，黃素靜，肖澤蘭，等.子癇前期及子癇患者中血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及血清D-二聚體表達變化及其臨床意義[J].實用預防醫學，2017，24（7）：879-881.

[18] 杜二球，高霞，李詠梅，等.早發型重度子癇前期患者心臟構型和功能及其與腦鈉肽濃度的相關性研究[J].實用婦產科雜志，2016，32（9）：709-712.

[19] 王美玲，李燕，羅丹，等.早發型重度子癇前期合并胎兒生長受限期待治療的妊娠結局分析[J].中國婦幼保健，2016，31（14）：2810-2812.

[20] Fred A English，Louise C Kenny，Fergus P McCarthy，et al.Risk factors and effective management of preeclampsia[J].Integr Blood Press Control，2015，8（1）：7-12.

[21] 劉玉芳，孫斌，王云芳，等.重度子癇前期對早產兒心肌損傷及腦損傷的影響[J].中國生育健康雜志，2013，24（1）：457-459.

[22] 李霞，陳徐，宋倪媛，等.重度子癇前期對早產新生兒脂蛋白代謝和免疫功能的影響[J].現代免疫學雜志，2016， 2（1）：109-112.

（收稿日期：2020-06-02）