VCC-1在胰腺癌組織中的表達及意義

宋劍鋒　白明輝

【摘要】 目的：探討血管內皮生長因子相關性趨化因子-1（VCC-1）在胰腺癌組織中的表達及意義。方法：應用免疫組織化學方法測定VCC-1在52例胰腺癌及52例對應癌旁正常胰腺組織中的表達情況，并分析VCC-1和胰腺癌臨床相關指標之間的關系。結果：VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽性表達率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽性表達率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結轉移的陽性表達率為91.67%（22/24）高于無淋巴結轉移的64.29%（18/28），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽性表達率為60.71%（17/28），低于腫瘤直徑>2 cm的95.83%（23/24），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在低分化癌中的陽性表達率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽性表達率為87.88%（29/33），在高分化中的陽性表達率為14.29%（1/7），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位無關（P>0.05）。VCC-1陰性表達組PC患者的中位生存期為26.9個月長于陽性表達組的16.3個月，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：VCC-1在胰腺癌組織中呈高表達，VCC-1的表達可能在胰腺癌的發生、發展中起重要作用。

【關鍵詞】 胰腺腫瘤 血管內皮生長因子相關性趨化因子-1 腫瘤標記

Expression and Significance of VCC-1 in Pancreatic Cancer Tissue/SONG Jianfeng， BAI Minghui. //Medical Innovation of China， 2021， 18（23）： -163

[Abstract] Objective： To investigate the expression and significance of VCC-1 in pancreatic cancer tissue. Method： The VCC-1 expressions in 52 specimens of pancreatic cancer tissues and 52 specimens of their adjacent normal pancreatic tissues were determined by immunohistochemical staining， and the relationship between VCC-1 and clinical indicators of pancreatic cancer were analyzed. Result： The positive expression rate of VCC-1

protein in pancreatic cancer tissues was 76.92%， higher than 28.85% in paracancer tissues， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in stage Ⅰ， Ⅱ pancreatic cancer tissues was 69.23% （27/39）， which was lower than 100% （13/13） in stage Ⅲ， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 with lymph node metastasis was 91.67% （22/24）， which was higher than 64.29% （18/28） without lymph node metastasis， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in tumor diameter ≤2 cm was 60.71% （17/28）， which was lower than 95.83% （23/24） in tumor diameter >2 cm， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in low differentiation carcinoma was 83.33% （10/12）， the positive expression rate of VCC-1 in medium differentiation carcinoma was 87.88% （29/33）， and the positive expression rate of VCC-1 in high differentiation carcinoma was 14.29% （1/7）， the difference was statistically significant （P<0.05）. VCC-1 was not associated with age， gender or tumor site （P>0.05）. The median survival time of PC patients in VCC-1 negative expression group was 26.9 months， which was longer than 16.3 months in positive expression group， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The VCC-1 expression is increased in pancreatic cancer and its expression may be closely connected to the occurrence and development of pancreatic cancer.

[Key words] Pancreatic neoplasms VEGF correlated chemokine-1 Tumor markers

First-author’s address： Foresea Life Insurance Guangzhou General Hospital， Guangzhou 511300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.23.039

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）早期癥狀不明顯，且發展快，預后差，其5年生存率為8%，有淋巴結轉移者5年生存率為3%[1-8]。目前PC被診斷時多為中晚期，手術切除是最有效的治療方法，但復發率比較高[9-13]。而導致PC發生和進展是多種基因及因素共同作用的結果[14]。已經有研究表明血管內皮生長因子相關性趨化因子-1（vsacular endothelial growth factor correlated chemokine 1，VCC-1）與乳腺癌、直腸癌及肝細胞癌的發生、發展有關[15]。筆者通過試驗研究VCC-1在PC中的表達及意義，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 選取本院2019年10月-2020年

2月及鄭州大學附屬洛陽中心醫院2011年2月-2019年12月存檔的PC組織蠟塊52例及與其相對應的癌旁正常胰腺組織52例。其中男38例，女14例;年齡32～77歲，平均（56.40±2.02）歲;TNM分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期28例，Ⅲ期13例。病理分級：高分化癌7例，中分化癌33例，低分化癌12例。所有入選的PC患者術前均沒有接受放療、化療及生物治療等，均可以找到完整的臨床病例資料。鼠抗人VCC-1單克隆抗體購自美國R&D Systems公司，兔抗人VEGF單克隆抗體試劑盒和通用型二抗PV-6000購自北京中杉金橋生物技術有限公司。PBS緩沖液，DAB顯色試劑盒及抗原修復液均購自福州邁新生物技術開發有限公司。其他試劑及設備均由鄭州大學附屬洛陽中心醫院提供。

1.2 方法 免疫組化采用Elivision二步法，將蠟塊制成3 μm厚度的切片，常規脫蠟、脫水;室溫放置10 min以滅活內源性酶;加pH=6.0的檸檬酸鹽緩沖液中檔微波處理10 min;加1滴3%的H2O2阻斷內源性過氧化物酶10 min;加一抗（1︰100稀釋）室溫孵育2 h;PBS沖洗;加親和素1滴，室溫孵育2 h;PBS沖洗;加羊抗兔IgG二抗，室溫孵育2 h;DAB顯色5 min;蘇木素復染2 min;脫水、透明，封片，閱片。

1.3 結果判定 每張切片隨機取5個視野，每個視野計數100個左右細胞，在相同放大倍數（×400）及光強度等的條件下由兩位經驗豐富的病理科醫師閱片判定。將細胞膜或細胞質出現棕黃色顆粒定義為陽性。根據陽性細胞數及染色強度進行綜合判定。

1.4 統計學處理 采用SPSS 20.0軟件對所得數據進行統計分析，計數資料以率（%）表示，比較采用χ檢驗;采用log-rank的統計檢驗比較VCC-1陰性組和陽性的中位生存期;采用GraphPad Prism繪制生存曲線。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 VCC-1在PC組織及癌旁組織中的表達 陽性顆粒為棕黃色，位于細胞質或細胞膜中，VCC-1在胰腺癌組織中的表達比在癌旁組織中強，見圖1、2。VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽性表達率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統計學意義（χ=24.12，P<0.05），見表1。

2.2 VCC-1表達與PC臨床相關指標的關

系 VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽性表達率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結轉移的陽性表達率為91.67%（22/24）高于無淋巴結轉移的64.29%（18/28），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽性表達率為60.71%（17/28），低于在腫瘤直徑>2 cm中的95.83%（23/24），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在低分化癌中的陽性表達率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽性表達率為87.88%（29/33），在高分化中的陽性表達率為14.29%（1/7），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位均無關（P>0.05）。見表2。

2.3 VCC-1表達與PC患者的遠期預后的關系 在40例VCC-1陽性表達的PC患者隨訪中失訪2例，在12例VCC-1陰性表達的PC患者隨訪中失訪1例。VCC-1陰性表達組PC患者的中位生存期為26.9個月，長于陽性表達組的16.3個月，差異有統計學意義（χ=7.62，P<0.05）。見圖3。

3 討論

VCC-1基因編碼119個氨基酸，有6個半胱氨酸殘基，其中有4個分別位于2個CXC結構域，其包括4個外顯子，15 kb大小，位于人19q11染色體上[16-17]。研究表明，VCC-1通過上調VEGF-A表達，來參與新生血管的形成，進而促進腫瘤的轉移及進展[17]。

本研究結果顯示，VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽性表達率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統計學意義（P<0.05）。說明VCC-1可能作為一種促癌基因導致了PC的發生。VCC-1在低分化癌中的陽性表達率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽性表達率為87.88%（29/33），在高分化中的陽性表達率為14.29%（1/7），差異有統計學意義（P<0.05）。說明VCC-1參與了PC的增殖及分化。VCC-1在VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽性表達率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結轉移的陽性表達率為91.67%（22/24）高于無淋巴結轉移的64.29%（18/28），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽性表達率為60.71%（17/28），低于在腫瘤直徑>2 cm中的95.83%（23/24），差異有統計學意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位無關（P>0.05）。提示VCC-1促進了PC的發展、侵襲及轉移。研究已經證實，VEGF與多種惡性腫瘤的發生、發展及侵襲有關[18-20]。筆者推測VCC-1的高表達上調了VEGF的表達，進而導致腫瘤新生血管的形成，來促進腫瘤的發展、侵襲及轉移。VCC-1陰性表達的胰腺癌患者的中位生存期長于陽性表達患者，差異有統計學意義（P<0.05）。說明VCC-1是PC患者預后的一個獨立危險因素。

綜上所述，VCC-1在PC的發生、發展、侵襲中發揮著重要作用。在PC患者中VCC-1的陽性表達提示預后不良。

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（收稿日期：2020-09-15） （本文編輯：張明瀾）