徐西彬,韓紅星,王志鵬,張 恩*
(1.北京師范大學認知神經科學與學習國家重點實驗室,北京 100875;2.中國科學院生物物理研究所腦與認知科學國家重點實驗室,北京 100101)
靈長類動物的生物學特征(如組織結構、解剖學、生殖和微觀生物學等)與人類最為接近,是與人的大腦在功能和結構上最為接近的可用實驗動物[1]。獼猴有發達的大腦皮層和復雜的認知能力,特別是大腦中樞視覺系統,利用獼猴這一特殊的實驗動物可以用來研究幾乎所有的認知活動,比如決策、情緒、知覺、學習與記憶、睡眠與覺醒等。因此,經過特殊訓練并能完成特定任務的獼猴是認知科學研究領域最理想的測試模型[2,3]。
獼猴的隔離檢疫和疾病控制等直接關系到工作人員和動物的安全,關系到科研實驗原始數據的真實可靠、完整可追溯。本文對獼猴檢疫和疾病控制的科學管理和倫理進行了概括性介紹,通過加強對實驗獼猴的福利保障,以保證實驗動物高質量的健康狀態和工作人員的安全,從而將實驗動物的使用量降到最低程度,用一定數量的獼猴獲取更多實驗數據或者使用更少量的獼猴獲得同樣多的數據,提高認知研究結果的可靠性,為相關應用研究提供指導。
實驗平臺成立了實驗動物管理和實驗動物倫理委員會,委員會成員由從事實驗動物科研研究的專業技術人員、實驗動物方面專家、專職獸醫、實驗動物管理人員等組成,委員會制定了詳細規范的實驗動物管理制度,通過制定各類應急預案以防突發事件的發生。動物倫理委員會定期召開相關會議確保動物福利和生物安全保障措施等。
實驗室配備經過專業訓練的飼養人員和獸醫。2名獸醫都具有本科以上動物醫學專業學歷,都有執業獸醫師資格證書且具有豐富的實踐經驗,有較強的責任心。獸醫主要負責疾病防治工作,履行相應的巡查職責。飼養人員熟練掌握飼養基本操作規程,具有較強的責任心,且取得實驗動物上崗證書方可上崗。
實驗室嚴格遵照《北京市實驗動物管理條例》等規定進行管理和飼養實驗動物。動物房的飼養間專門設有緩沖觀察室以備飼養員和獸醫隨時觀察和記錄獼猴狀態。猴籠要有足夠的空間,動物房或者猴籠內設置棲息架和玩具等,供動物攀爬和玩耍等,為其提供自由空間和舒適環境,從而保證獼猴的福利。猴籠內有控制水閥(或定容的飲水瓶),獼猴可自由飲水。
動物房每日8點由飼養人員清掃沖洗糞便和清除墊料,每天定期消毒,保持動物房內衛生,為獼猴提供一個舒適的生活環境。動物房內設有通風換氣設備,溫度設置18~25℃,濕度設置40%~60%,維持動物房空氣流暢。應保持冬暖夏涼,尤其注意夏天要防止動物中暑,動物房要有一定的降溫除濕裝置。
新進獼猴首先要建立科學飼養管理和嚴格的隔離檢疫制度,新引進的獼猴不能直接放入飼養室,必須要在檢疫房進行1~2個月的隔離檢疫,檢疫項目主要包括細菌學檢查、病毒學檢查和寄生蟲檢查等。然后在檢疫隔離期內檢疫合格的獼猴,再經過1~2個月適應飼養期才可放入飼養室。
一是接觸動物的工作人員須穿工作服,戴好一次性醫用手套、帽子、口罩,對新進獼猴觀察和檢查獼猴毛發、精神狀態、體表有無外傷,口咽部是否有水皰以及潰瘍,檢查頜下、腋下及腹股溝淋巴結是否有發熱腫大現象。
二是對新進的獼猴進行細菌檢測、B病毒檢測、微生物、體外寄生蟲等檢查。
三是隔離觀察處于正常狀態的動物,進行至少3次結核菌素TB試驗,每次間隔2周。將結核菌素OT原液1 500國際單位(0.1 ml)接種于眼瞼,以72 h的結果判定為最終標準。如果眼瞼出現一定程度的發紅,水腫明顯,則判定為陽性;如果眼瞼水腫很嚴重,甚至出現閉合現象,則判定為強陽性。結果為陽性獼猴需要再次復檢。當復檢再次出現陽性反應,獼猴接種眼瞼有腫脹、發紅和化膿等癥狀,應立即處死,尸體必須無害化處理,所使用的物品等須高壓鍋消毒。
動物房的獼猴應實行定期檢疫,每年至少2次,上半年和下半年分別1次。動物房管理負責人統一安排年度檢疫事宜,并在檢疫前一周通知獸醫和飼養員等做好準備。
年度檢疫項目包括獼猴體重、獸醫觸診檢查、B病毒檢測、結核菌素試驗和細菌、體外寄生蟲檢查。
年度檢疫出不符合檢測標準(微生物和寄生蟲等)的獼猴,應及時進行隔離觀察,待治療后符合檢疫標準后才能放回原猴籠。結核菌素試驗結果為陽性的獼猴應及時處死,同時對此猴所在的動物房徹底消毒,該動物房的全部獼猴須進行至少3次結核菌素試驗,連續3次檢測結果都為陰性的獼猴才能視為健康猴。
年度檢疫結果記入檔案,由獸醫出具年度檢疫總結報告。
在認知研究中,疾病會直接影響實驗獼猴的生長發育和質量品質,甚至會影響實驗結果。因此,對獼猴的疾病預防和診治具有十分重要的價值和意義。獼猴常見疾病有外傷、脫肛、細菌性痢疾、傳染性肺炎和體外寄生蟲病等[4]。建立正確的疾病檢測和預防治療體系是防治獼猴各種疾病的關鍵。應對獼猴加強飼養管理,飼養室和檢疫室要定期消毒,保持環境衛生以及食物營養成分的合理搭配,只有獼猴抵抗能力增強,疾病的發生率才能降低。本文主要介紹幾種常見病的病因、治療護理和疾病控制等。
群養的獼猴主要是發生撕咬、抓傷等現象,導致身體各部位受傷,比如四肢毛皮大面積撕裂,有的下巴被撕裂。實驗室飼養的動物所引起的外傷主要有籠具毛刺或設計不合理對動物造成的損傷、動物逃逸與其他動物打鬧被動咬傷及手術等方面。輕傷猴首先給予止血處理,止血可采取壓迫、結扎、使用止血藥物等。用3%的雙氧水清洗創面,同時清除血凝塊和異物等。為預防感染,除了肌注抗菌消炎藥外,還要補充營養,認真治療、精心護理,以保證弱勢獼猴的健康生存。
為了防止獼猴外傷,可以將病猴飼養在單籠環境中,在放入前將猴籠消毒,并保持猴籠的衛生整潔,減少傷口感染。動物房要保持良好的通風和光照,安靜無噪音,同時避免人為因素影響獼猴休息,造成傷口恢復緩慢[5]。
獼猴脫肛是較常見的疾病之一,脫肛是由于獼猴后段直腸、肛管等黏膜層或者直腸全層向下位移脫出肛門,直腸壁部分或全層全部脫出肛門則為直腸脫。人為捕捉受到驚恐、劇烈的腹瀉(如痢疾和腸炎)可以導致脫肛,一般體弱的老年獼猴或幼年動物易發生。
動物保定后,以溫生理鹽水沖洗脫出部分,小心清除腸壁上所粘附的污物,用0.1%高錳酸鉀液對脫出的腸管及肛門周圍進行反復沖洗。對脫出時間較長、出現充血水腫的,可針刺水腫黏膜,輕輕擠出水腫液,使腸管變軟再清洗。在脫出的腸管壁上涂抹紅霉素軟膏等,再把脫出的腸管還納腹腔。倒提獼猴來回輕微晃動,有助腸管復位[6]。對于反復脫出的病猴,可以對肛門進行荷包縫合,收口適度,要留有可通過糞便的口徑;嚴重壞死的要進行切除,對患猴的腸管施行斷端吻合術,腸管縫合后還納入腹腔,注射抗生素控制感染。
猴細菌性痢疾是由志賀氏菌屬引起的消化道傳染病,常見于新引進的猴群中,任何季節均可發生,癥狀為口渴拒食,部分有嘔吐,精神萎靡不振,嚴重的患猴出現濃血便。該病死亡率較高且易復發,若不及時采取積極有效措施,患猴很容易死亡,不但嚴重影響實驗動物的品質,而且可能會影響科研實驗結果[7]。
對脫水比較明顯、糞便呈排水樣的患猴,可以采用左氧氟沙星滴注,劑量為100 ml(0.2 g)靜脈滴注,對于危重病猴,靜脈注射10%葡萄糖氯化鈉溶液,一并注射頭孢哌酮0.5 g及維生素C 0.5 g,給液劑量一般控制在50 ml以內,以不增加心臟負擔為目的。總之,細菌性痢疾需要采取預防、抗菌、補液、補營養等綜合治療措施,同時獸醫應每天多次仔細觀察獼猴的飲食、糞便等,一旦發現可疑病猴,及時對其隔離治療,同時補充維生素C,在腸道恢復的同時提高病猴的免疫力,從而提高病猴的治愈率[8]。
該病多見于營養不良以及體質虛弱的獼猴,癥狀主要是精神萎靡、臉部尤其是唇部發紺、咳嗽、呈喘式呼吸、鼻翼異常煽動,體溫升高到39.5~40.3℃。
對發病獼猴進行隔離治療。癥狀嚴重的獼猴以恩諾沙星按50 g/kg體重進行輸液,同時輔以5%葡萄糖注射液100 ml、地塞米松注射液和維生素C等,迅速達到抗感染、抗休克以及保護心功能的作用。癥狀較輕的獼猴肌肉注射慶大霉素、阿托品,同時口服復方維生素口服液[9]。
流行季節時,采取提高飼料品質、隔離帶菌獼猴、預防性藥物治療及環境消毒綜合性防治措施,更有效地預防和控制疾病。
阿米巴痢疾是內阿米巴屬中的溶組織內阿米巴原蟲引起的傳染性腸道疾病,且感染后不產生保護性抗體,易重復感染。癥狀主要為腹部不適,腹痛腹瀉,寒顫,高熱行動遲緩,消瘦,排黃色或褐黃色稀便,有些排濃血便,糞便腥臭,嚴重者肛門括約肌松弛,直腸脫出,臨床表現為水性腹瀉。可采取以下措施進行治療和預防。一是消滅鼠、蒼蠅和蟑螂。二是加強獼猴營養,增強獼猴的抵抗力,以加大獼猴的活動量,促使其食欲增強,進而提高抵抗力。三是對患病獼猴進行靜脈注射或口服特效藥甲硝唑。在飼料中添加甲硝唑和白糖,可起到預防和治療的作用[10]。
建立正確的隔離檢疫制度和科學管理體系是監測和控制各種獼猴疾病發生的關鍵,工作人員須有較強的責任心以及技術能力。此外,應定期對獼猴進行細菌學檢查、病毒性檢查和寄生蟲學檢查,同時注重環境消毒,杜絕病毒細菌的繁殖與傳播。