免疫組化技術在制作病理組織切片中的應用價值分析

李博

大慶油田總醫院,黑龍江 大慶 163001

在惡性腫瘤診斷中組織病理診斷一直是金標準[1]，也是主要方式，在病理組織切片制作過程中，免疫組化技術就是主要的一種，是通過染色反應，對細胞內抗原或組織進行定位，在惡性腫瘤診斷、鑒別、預后判定等方面被廣泛應用。有著操作簡單、標本保存時間長、定位準確等優點[2]。為了進一步確定其應用價值本院進行了此次研究，詳情如下：

1 資料和方法

1.1一般資料 將90例2019年9月-2020年9月在本院做病理組織檢驗患者的病理組織標本作為本次研究對象，并利用數字表法分組，隨機分成各45片(例)。對照組患者35～65歲，中間值(49.62±5.58)歲，男女比例20:25，標本來源：8例胃癌、7例乳腺癌、12例肺癌、18例肝癌。研究組患者37～68歲，中間值(43.71±5.26)歲，男女比例21:24，標本來源：9例胃癌、6例乳腺癌、13例肺癌、17例肝癌。比較兩組標本及患者的基礎信息無顯著差異(P>0.05)，不會對研究結果產生影響。

1.2方法

1.2.1對照組 在病理組織切片制作過程中采用傳統方法，①病理組織離體后30分鐘內固定處理，放到低溫環境中或是放在固定液中保存。之后將其放到10%中性緩沖甲醛溶液內，處理8～24小時[3]。②經過處理的標本通過熱修復法，修復和引導抗原，抗原修復時間為3～15分鐘，修復液pH值7.5～8.5，修復溫度大于100℃。③根據病理組織切片制作流程規范操作，為了防止發生邊緣效應，要均勻添加試劑、劑量充足，脫蠟時間充足，試劑面積比切片組織大0.05～0.35cm。

1.2.2研究組 在病理組織切片制作過程中采用免疫組化技術，①在室溫環境中，進行常規脫蠟切片操作，之后在3%雙氧水中浸泡組織標本20分鐘，再對組織切片反復沖洗三次，沖洗液為磷酸鹽緩沖液，每次沖洗時長為5分鐘，共沖洗15分鐘[4]。②在1000mL燒杯中放入pH值為6的檸檬酸緩沖液(700mL)，加熱到沸騰狀態，將組織切片放入其中，繼續加熱15分鐘取出，所有切片滴加一抗后進行過夜孵育，冰箱溫度為40℃。③取出組織切片，使用磷酸鹽緩沖液反復沖洗三次，每次5分鐘[5]。④在室溫狀態下，所有切片滴加二抗，進行15分鐘的孵育，之后再次使用磷酸鹽緩沖液反復沖洗三次，每次5分鐘。⑤把組織切片放到顯色劑中5～10分鐘，取出后用蘇木精襯染、水洗，再用脫水透明樹膠封固。

1.3觀察指標 對兩組病理組織切片制作質量做評估，顯微鏡下不容易觀察，對比不明顯，氣泡或褶皺較多、組織結構受損、編號不清，則為差質片；顯微鏡下比較容易觀察，沒有脫片、非特異性著色等情況，無氣泡或污染，褶皺少，無組織結構受損，則為良質片；顯微鏡下非常容易觀察，染色明顯，可見清晰的細胞形態、沒有裂痕損害情況，薄厚均勻，組織結構完整，則為優質片。

1.4統計學分析 借助SPSS22.0軟件處理研究數據，x2檢驗定數資料，用百分比描述，統計學意義成立時P<0.05。

2 結 果

研究組差質片2片(4.44%)、良質片16片(35.56%)、優質片27片(60.00%)，制片優良率為95.56%；對照組差質片12片(26.67%)、良質片18片(40.00%)、優質片15片(33.33%)，制片優良率為73.33%，統計學意義成立(P<0.05)。

3 討 論

在惡性腫瘤病理組織學診斷中，免疫組化技術是主要技術，有著較高的準確率[6]。所謂免疫組化，主要是定位、定性、定量分析病理組織中的抗原，從根本上講，免疫組化顯色屬于酶催化作用，在與抗原抗體復合物中的過氧化物、底物、堿性磷酸酶產生反應過程中，產生的復合物帶有相應的顏色，同時在組織、細胞抗原中沉淀，所以可以體現出組織病理的陽性表達情況。細胞標本、石蠟切片是兩種常用的病理組織標本，后者應用率更高[7]。與傳統的制作病理組織切片的技術相比較，免疫組化技術不僅準確性高，而且敏感性好、反應時間短，能鑒別腫瘤細胞屬性、確定腫瘤分期、判定腫瘤性質。另外，有研究表明[8]，在未分化的惡性腫瘤分類診斷中，免疫組化技術也有著良好的效果。

在此次研究中，利用免疫組化技術的研究組，制片優良率為95.56%，利用傳統制片技術的對照組僅為73.33%，統計學意義成立(P<0.05)。充分說明，免疫組化技術的運用有助于改善病理組織制片質量，染色明顯，組織結構完整不容易受損，不容易產生氣泡或褶皺，細胞形態清晰可見，在顯微鏡下更容易觀察。

總而言之，在制作病理組織切片中免疫組化技術有著較高的應用價值，制片質量更高，有助于提高病理檢驗水平，值得深入推廣應用。