一例雞葡萄球菌病的診治報告

孟凡亮，高繼鋒

吉林省農安縣農業農村局農業綜合行政執法大隊，吉林農安 130200

雞葡萄球菌病是由金黃色葡萄球菌引起的一種重要的雞的急性或慢性細菌性傳染病。該病一年四季均可發生，是目前危害我國養雞業最常見的細菌性傳染病之一。隨著我國養雞業的集約化、規模化發展，該病的發生呈現出不斷上升的趨勢。由于該病的病原-金黃色葡萄球菌在自然界廣泛分布，一旦雞體免疫機能下降或養殖環境較差時容易導致該病的發生，給養殖場帶來較大的經濟損失。現將一例雞葡萄球菌病的診治情況報告如下。

1 發病情況和臨床癥狀

我縣某養雞場飼養蛋雞6 000只，45日齡的蛋雞突然發病，病雞臨床表現為精神萎靡、食欲不振、縮頭呆立、嗜睡、羽毛蓬亂沒有光澤，部分雞只發生下痢，排出黃綠色糞便；同時病雞胸部、腹部以及大腿內側皮膚呈青紫色并伴有皮下水腫，有血樣滲出液，嚴重的病雞發病后2～3 d死亡，病死雞只達40余只。

2 剖檢變化

病死雞經剖檢后，胸、腹部皮下可見出血、充血，肌肉組織有出血斑，心包內有渾濁滲出液，呈黃紅色，肝臟嚴重腫大，表面可見點狀白色壞死灶，脾臟腫大充血，有大小不一的壞死灶。

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離及鏡檢

實驗室無菌操作取病死雞的肝臟、脾臟以及心包液，接種于胰蛋白胨大豆肉湯瓊脂培養基（TSA），置于37 ℃恒溫培養箱中培養20 h后觀察結果，在TSA瓊脂培養基上可見邊緣整齊、光滑濕潤的黃白色菌落。取上述培養基上的單菌落進行革蘭氏染色、鏡檢，可見圓形、成對或成典型的葡萄串狀排列的革蘭氏陽性球菌。

3.2 生化試驗

取分離純化的菌株接種細菌微量生化反應管，置于37 ℃恒溫培養箱內反應24 h后觀察結果，結果顯示該分離株能夠分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖、甘露醇，產酸但不產氣，凝固酶和觸酶試驗均為陽性。根據生化試驗結果對照《伯杰氏細菌鑒定手冊》發現，該分離菌的生化特性與金黃色葡萄球菌的相符合。

3.3 PCR菌種鑒定

為了進一步鑒定該分離菌，利用16S rRNA測序的方法對分離菌株的種屬進行準確鑒定。通過水煮法提取分離菌株的基因組制備PCR反應模板，利用16S通用引物[27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’)和1492R(5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)]進行PCR擴增，成功獲得預期大小的DNA片段，對擴增產物進行膠回收處理以及Sanger測序分析。測序數據良好，無套峰，成功獲得分離菌的16S rRNA核苷酸序列。利用NBCI數據庫中的BLAST在線工具對獲得的核苷酸序列進行對比分析，結果顯示該分離菌株16S rRNA序列與數據庫中金黃色葡萄球菌的對應序列相似度高達100%，可以確定該分離菌株為金黃色葡萄球菌，與鏡檢和生化試驗的結果相一致。

3.4 藥敏試驗

采用K-B紙片法對分離鑒定的金黃色葡萄球菌進行藥敏試驗，參照美國CLSI標準對藥敏結果進行判讀，結果顯示，該株金黃色葡萄球菌對恩諾沙星、慶大霉素、多西環素、氨芐西林敏感，對大觀霉素、鏈霉素、青霉素、阿莫西林、頭孢他啶、四環素、克林霉素、氟苯尼考、紅霉素呈現不同程度耐藥。

4 診斷

綜合發病情況、臨床表現、剖檢變化以及實驗室檢驗結果可以判斷該養殖場的雞群發生了由金黃色葡萄球菌引起的葡萄球菌病。

5 治療

首先對病死雞采取無害化處理，對發病雞只進行隔離，并對雞舍進行全面清掃消毒。根據藥敏試驗結果，對病雞選用恩諾沙星添加至飲水中，用量為50 mg/L，連用3～5 d。同時，飲水中適量的補充電解多維。用藥治療5 d后，發病雞群狀態顯著好轉，采食、飲水恢復正常。

6 小結

雞葡萄球菌病是目前養雞業中較為常見的細菌性疾病，作為條件性疾病，該病的發生與養殖場的飼養管理水平與雞群的飼養環境密切相關。養殖人員應加強飼養管理，對雞舍進行及時的清理，保持雞舍環境衛生，經常通風換氣，保持雞舍干燥，控制雞群飼養密度，減少環境應激。此外，為預防該病的發生，雞群可以按照合理的免疫程序適時進行疫苗免疫接種，接種葡萄球菌多價滅活疫苗，對該病的發生具有一定的預防效果。吉