不同炮制方法對草果中揮發性成分的影響

遲玉廣 李中陽 黃愛華

摘要 [目的]研究草果的不同炮制方法對其揮發油的含量及成分的影響，為臨床用藥提供依據。[方法]將草果依法炮制處理后，采用水蒸氣蒸餾法提取揮發油，并利用GC-MS技術分析測定其中揮發性成分及相對含量。[結果]草果生品、炒制品和姜炙品的揮發油提取率分別是0.025 1～0.026 8、0.021 7～0.022 0和0.015 8～0.018 9 mL/g，并分別鑒定出了52、46、47個組分，其中，以1，8-桉油素、香葉醇等5個成分含量較高，占峰面積總和的50%以上;與炮制品相比，生品中1，8-桉油素相對含量較高，而香葉醇在姜炙品的相對含量則明顯高于其他2個樣品。[結論]不同炮制方法對草果揮發油提取率及其主要揮發性成分的相對含量存在一定的影響。

關鍵詞 草果;炮制方法;揮發性成分;GC-MS

Abstract [Objective]To study the effects of different processing methods of Amomum tsao-ko on the content and composition of its volatile oil， to provide the basis for clinical medication.[Method]After the Amomum tsao-ko was processed according to law， the volatile oil was extracted by steam distillation， and the volatile components and relative content were analyzed and determined by GC-MS technology.[Result]The extraction efficiency of Amomum tsao-ko from raw， fried and ginger made were 0.025 1-0.026 8，0.021 7-0.022 0 and 0.015 8-0.018 9 mL/g， and 52， 46， 47 kinds of compounds in three Amomum tsao-ko volatile oils were identified，respectively.Among them， the content of 5 components including 1，8-cineole and geraniol were relatively high， accounting for more than 50% of the total peak area.Compared with processed products，the relative content of 1，8-eucalyptin in raw products was higher.The relative content of geraniol in ginger products was obviously higher than that in other two samples.[Conclusion]Different processing methods have different effects on the extraction efficiency and the relative content of the main volatile components in Amomum tsao-ko.

Key words Amomum tsao-ko;Processing methods;Volatile component;GC-MS

草果又名草果仁、草果子、老蔻，為姜科植物草果Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire的干燥成熟果實。秋季果實成熟時采摘，除去雜質，曬干或低溫干燥，或用沸水燙2～3 min后，再曬干或烘干，主產于云南、廣西、貴州等省。草果味辛、性溫，歸脾、胃經，具有燥濕溫中、截瘧除痰等功效，用于寒濕內阻、脘腹脹痛、痞滿嘔吐、瘧疾寒熱、瘟疫發熱等[1]。

現代藥理研究證明，草果中的揮發油是其最主要活性成分之一，具有多種功效[2]。因此，在《中國藥典》中，測定揮發油總量是評價草果品質的重要指標之一。草果揮發油的成分主要為萜類化合物，包括單萜烯類、含氧單萜類、倍半萜烯烴類及含氧倍半萜類等，其中果仁和果殼揮發油中以1，8-桉油素含量最高[3]。目前國內外關于草果揮發性成分的研究主要集中在成分分析[3-5]、提取方法研究[6-8]、藥理藥效研究[9-10]、檢測方法及指紋圖譜分析[11-12]等方面，而關于不同炮制方法對草果中揮發性成分的影響方面的研究鮮有報道。該研究擬在前人研究的基礎上，將草果運用炒制、姜炙2種傳統炮制方法炮制后，分別用水蒸氣蒸餾法提取其中揮發油，并利用GC-MS聯用技術對草果炮制品和生品中的揮發性成分進行相對含量及成分的比較研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

電子天平（杭州友恒稱重設備有限公司）;TC-15套式恒溫器（海寧市新華醫療器械廠）;KQ-200DE型數控超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）;氣質聯用儀（單四極桿）Agilent7890B-5975A（美國安捷倫科技有限公司）;揮發油提取器一套。

草果藥材（產品批號：160501，產地：云南）;蒸餾水;生姜汁（自制）;無水乙醚（分析純）;無水硫酸鈉（分析純）。

1.2 草果的加工與炮制

稱取3份80～90 g的草果，除雜，按照文獻[13-15]方法炮制，重復3次，具體方法如下：

①生品。取一份除雜后的草果，去殼和隔膜，取仁，打成粗粉，密封保存備用。②炒制。取一份除雜后的草果，放入熱鍋內，用武火炒至外表黑褐，發泡，有香氣時取出，放涼，篩去灰屑，去殼和隔膜，取仁，打成粗粉，密封保存備用[13-14]。③姜炙。取一份除雜后的草果，去殼取仁，加入6 g姜汁拌勻，稍悶潤，待姜汁被吸盡后，置炒制容器內，用文火加熱，炒至深黃色而姜汁微干，取出晾涼，打成粗粉，密封保存備用。

1.3 揮發油提取

依照2015版《中國藥典》四部通則2204，揮發油提取方法如下：取“1.2”項下3組樣品粉末各50.0 g，加400 mL 蒸餾水浸泡1.5 h，用揮發油提取器按常規水蒸氣蒸餾法提取5 h，讀取揮發油量后用無水硫酸鈉干燥，封裝備用。

1.4 揮發油檢測

對提取的草果揮發油利用GC-MS分析，檢測方法如下。

1.4.1

氣相色譜條件。HP-5MS毛細管色譜柱，30 m×250 μm×0.25 μm;進樣口溫度250 ℃;進樣量1 μL;分流比為50∶1;汽化溫度為 250 ℃;溶劑延遲3.0 min;柱初始溫度80 ℃，保持3 min，以6 ℃/min升至180 ℃保持2 min;載氣為He，流速為1.0 mL/min。

1.4.2

質譜條件。電離方式EI（70 eV）;離子源溫度為230 ℃;四級桿溫度為150 ℃;接口溫度為280 ℃;質量掃描范圍50～550 amu。

2 結果與分析

2.1 草果不同炮制品揮發油物理性狀及提取率

揮發油提取器中提取液分上下兩層，上層液均為橙黃色油狀液體，香味辛辣濃烈;下層液均為白色渾濁液體，氣味淡，草果生品與炮制品的揮發油物理性質無明顯差異。測量上層橙黃色油相體積，計算揮發油提取率，結果得出生品、炒制品和姜炙品草果揮發油提取率分別為0.025 1～0.026 8、0.021 7～0.022 0和0.015 8～0.018 9 mL/g。

2.2 草果不同炮制品主要揮發性成分分析

利用上述方法分別對生品、炒制品和姜炙品揮發油樣品進行GC-MS分析，得總離子流圖，具體結果見圖1。所得各組分經NIST數據庫檢索確定其化學成分，并使用面積歸一化法，計算各化學成分在揮發油中的相對含量。結果顯示（表1），草果生品、炒制品和姜炙品的揮發油中分別鑒定出了52、46、47個組分，分別占其揮發油總量的99.90%、99.98%和99.99%。其中，以1，8-桉油素、香葉醇、2-異丙基苯甲醛、α-松油醇和（E）-檸檬醛5種成分含量較高，占峰面積總和的50%以上。

2.3 炒制和姜炙工藝對草果揮發油提取率及成分的影響

揮發油提取率測定結果顯示，炮制過后的各樣品揮發油含量明顯減少，其中以姜炙品最為明顯，數據經單因素方差分析顯著性差異明顯（P=0.002）。可能是由于姜炙過程中，果仁經液體悶潤，又加熱揮干液體，導致了揮發油的損失。而炒制過程中，果仁不直接接觸熱源，果殼在其中起到了緩沖作用，使揮發油損失較少。

此外，通過對2種不同炮制品和生品草果揮發油主要化學成分的比較發現，3個揮發油樣品中共有成分數量較多，共有40個，分別占生品、炒制品、姜炙品揮發油總量的96.16%、98.12%、97.69%。而通過對各樣品特有成分分析發現，各樣品特有成分數量相對較少，且相對含量偏低，其中，生品草果揮發油特有成分有7個，占其揮發油總量的1.22%;炒制草果揮發油特有成分有2個，占其揮發油總量的0.69%;姜炙草果揮發油特有成分有2個，僅占其揮發油總量的0.38%。由此說明，炒制和姜炙2種炮制工藝對草果揮發油中的化學成分種類無顯著性影響。

2.4 不同炮制品中5種主要成分的相對含量差異分析

從圖2可以看出，3個揮發油樣品中均以1，8-桉油素含量最高，是草果揮發油中的最主要有效成分。其中，在生品草果中，1，8-桉油素相對含量最高，達26.99%，炒制品次之，姜炙品中相對含量最低，僅為22.89%，與揮發油提取率呈現相同規律。此外，除1，8-桉油素外，其他4種成分相對含量在生品草果中基本持平，而在2種炮制品中，香葉醇則較其他3種成分含量明顯提高，其中以姜炙品中最為明顯。

3 結論

（1）草果不同炮制品的揮發油提取率存在一定差異，經過炮制后揮發油提取率與生品相比有所下降，其中以姜炙品最為明顯，由此推測姜炙后草果的辛燥之性有所緩和。

（2）3個揮發油樣品中共檢出58個化合物，其中以1，8-桉油素、香葉醇、2-異丙基苯甲醛、α-松油醇和（E）-檸檬醛5種成分相對含量較高。

（3）在5種主要揮發性成分中，1，8-桉油素的相對含量遠高于其他成分，是草果中的最主要揮發性成分，且其在生品中相對含量明顯高于2種炮制品，該結果說明生品草果的抗菌殺蟲、截瘧除痰的功效應當優于炮制品。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2015：239.

[2]代敏，彭成.草果的化學成分及其藥理作用研究進展[J].中藥與臨床，2011，2（4）：55-59.

[3]何俏明，覃潔萍，黃艷，等.草果果仁及果殼揮發油化學成分的GC-MS分析[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（14）：112-117.

[4]張琪，黃燕，楊揚.草果揮發油的研究進展[J].時珍國醫國藥，2014，25（4）：931-933.

[5]閔勇，張薇，姚立華，等.云南省不同產地草果葉中揮發油化學成分研究[J].安徽農業科學，2011，39（6）：3298-3300.

[6]萬紅焱，顧麗莉，劉文婷，等.超臨界流體萃取草果揮發油的工藝研究及成分分析[J].現代化工，2015，35（12）：96-100.

[7]閔勇，張薇，樊愛萍，等.微波輔助提取草果揮發油工藝研究[J].食品工業科技，2011，32（6）：238-240.

[8]李付惠，李正權，王昌健.草果揮發油提取最佳工藝的研究[J].安徽農業科學，2014，42（13）：3850，3853.

[9]時海榮，楊揚.草果揮發油聯合環磷酰胺對肝癌細胞增殖的影響[J].山東醫藥，2017，57（41）：31-33.

[10]徐航，龍娜娜，林琳，等.草果油抗MRSA體外活性研究[J].成都醫學院學報，2017，12（3）：241-246.

[11]沈勇，吳靜，熊嬌，等.GC法測定草果揮發油中α-蒎烯、桉油精和香葉醇的含量[J].中國藥師，2014，17（8）：1426-1428.

[12]丁艷霞，崔秀明，李雪玲，等.草果揮發油的GC-MS指紋圖譜[J].光譜實驗室，2006，23（1）：141-144.

[13]龔千鋒.中藥炮制學[M].3版.北京：中國中醫藥出版社，2012：240-241.

[14]冉懋雄，郭建民.現代中藥炮制手冊[M].北京：中國中醫藥出版社，2002：555-557.

[15]魯文慧，尼亞孜艾力，崔蘭沖，等.草果姜制工藝的多指標綜合評分-正交試驗優選[J].時珍國醫國藥，2018，29（6）：1358-1360.