甲狀腺良惡性鑒別中應用冰凍切片及石蠟切片病理檢查的價值

陳海敏 江沂 劉婉 江桂英

（廣州醫科大學附屬中醫醫院病理科 廣東廣州 510000）

甲狀腺腫瘤是臨床常見的頭頸部腫瘤，雖然絕大部分為良性病變，但仍存在惡性病變的可能性[1]。影像學檢查對一些病變不典型及病灶較小的病變難以明確診斷, 當發現甲狀腺結節性病變還需要通過手術進行明確診斷。目前臨床常用的治療方法是甲狀腺腫瘤切除術，并對切除的病變進行病理檢查，確定良惡性，以便術中選擇合適的手術范圍及術后相應的治療措施。冰凍切片和石蠟切片是當前主要的病理診斷方式，兩者各有優劣，石蠟切片準確率高，是診斷腫瘤良惡性的金標準，但檢查時間較長，而冰凍切片檢查過程快捷，但診斷準確性低于石蠟切片[2]。甲狀腺惡性腫瘤中，甲狀腺乳頭狀癌的發病率較高，而其中的微小甲狀腺乳頭狀癌由于體積較小，在取材和制片過程中，容易漏檢，從而對冰凍切片診斷符合率造成影響。本文為了探究冰凍切片和石蠟切片病理檢查在甲狀腺良惡性鑒別中的應用價值，收集整理我院126 例行甲狀腺切除術并進行了冰凍切片和石蠟切片病理檢查的病例進行研究，現總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2019 年1 月～2020 年12 月我院126 例行甲狀腺組織切除術的患者作為研究對象，其中男性22 例，女性104例；年齡21～87 歲，平均（51.32±14.26）歲；雙側甲狀腺病變83 例，單側甲狀腺病變43 例；所有患者均進行冰凍切片（冰凍組）和石蠟切片（石蠟組）病理檢查。

1.2 方法

患者術中切除的甲狀腺組織均進行冰凍切片及石蠟切片病理檢查，并進行良惡性鑒別，具體步驟如下：（1）病理組織采集：取材時選取甲狀腺可疑病變組織1～2 塊。（2）冰凍切片病理檢查：將取好甲狀腺組織放在滴有OCT 包埋劑的托頭上，迅速放入溫度為-20 ℃的徠卡CM1950 冰凍切片機中，用冰凍錘壓平冰凍15～30s，放在切片架上，粗修組織，待需要觀察的切面全切出，再細切成厚度為5～6um 的切片,用常溫玻片貼取組織切片，立即用乙醚乙醇固定液快速固定60 s，進行快速HE 染色、梯度酒精脫水、透明、固封，診斷醫師用光學顯微鏡鑒別其良惡性。（3）石蠟切片病理檢查：將已制作冰凍的組織及剩余的甲狀腺組織用10%中性緩沖福爾馬林固定，取材醫生進行充分取材后，把標本放進徠卡ASP300S脫水機進行常規脫水、浸蠟；然后對組織進行包埋，用徠卡RM2245 切片機將其切成厚度為4μm 的切片，用電熱恒溫鼓風干燥箱以65℃的溫度烤片15min，再進行脫蠟、常規HE染色、梯度酒精脫水、透明、封片，診斷醫師用光學顯微鏡鑒別其良惡性。

1.3 評價指標

以石蠟切片結果為最終良惡性診斷金標準，對比分析冰凍切片鑒別良惡性的準確率。其中將冷凍切片結果分為確診、誤診和延遲確診三類：①確診。冷凍切片與石蠟切片良惡性一致；②誤診。冰凍切片與石蠟切片良惡性診斷不一致；③延遲確診。冷凍切片不能明確診斷良惡性，需要等待石蠟切片結果明確診斷。

1.4 統計學處理

使用統計學軟件SPSS21.0 處理和分析本文所涉及的數據，計量資料以（）表示，t 檢驗，計數資料以[n(%)]表示，X2檢驗；數據P＜0.05 表示差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 兩組甲狀腺組織良惡性的鑒別結果

冰凍組良性病變確診92 例，延遲確診1 例；惡性病變確診27 例，誤診3 例，延遲確診3 例；石蠟組檢查無誤診,無延遲確診；冰凍組良性診斷率為98.92%，惡性診斷率為81.82%；總體良惡性鑒別準確率為94.44%，低于石蠟組（X2=7.200，P=0.007）。如表1 所示。

表1 兩組甲狀腺組織良惡性的鑒別結果

2.2 兩組在甲狀腺惡性病變的鑒別結果

冰凍組甲狀腺微小乳頭狀癌確診18 例，誤診3 例，延遲確診3 例，診斷符合率為75.00%，誤診率為12.50%，延遲確診率為12.50%；甲狀腺乳頭狀癌確診7 例，無誤診及延遲確診；甲狀腺髓樣癌確診1 例，無誤診及延遲確診；甲狀腺低分化癌確診1 例，無誤診及延遲確診。

3 討論

由于人們生活方式的改變，甲狀腺腫瘤的發病率不斷上升，雖多為良性病變，但仍有小部分為惡性病變。甲狀腺乳頭狀癌是最常見的一種甲狀腺癌，惡性程度低，預后較好。石蠟切片是當前臨床診斷甲狀腺腫瘤的金標準，具有極高的準確率，但檢查時間過長，無法在術中進行病理檢查[3]。冰凍切片是在低溫條件下快速冷凍組織至一定硬度后切片并行病理檢查的一種方式，相比如石蠟切片，制作過程更為方便，可以在30 min 內獲得診斷結果，可以在手術中為手術醫師提供有效的病理參考[4]。但冰凍切片的診斷結果受制作時間和制作方法、取材數量和大小局限以及診斷醫師的經驗和病理技術員的操作等影響較大，所以取材醫師要注意全面觀察標本，選取可疑的病變組織，病理技術員在制片過程中要注意組織的完全切出，特別是微小的病變部位，以及染色均勻等，以提高診斷準確性。本次研究發現：冰凍組良惡性鑒別準確率為94.44%，低于石蠟組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。這與洪麗華[5]的研究相反，其研究以石蠟切片結果為最終甲狀腺良惡性診斷金標準，分析了甲狀腺組織冰凍切片的診斷準確率，發現冰凍切片的診斷準確率為97.18%，與石蠟切片病理診斷準確率無明顯差異。造成兩者研究差異的原因可能是本次研究的本院的126 例病例中以甲狀腺微小乳頭狀癌為主，占了總惡性病例的72.73%。本次研究的石蠟組診斷為惡性病變33 例，其中微小乳頭狀癌24 例，乳頭狀癌7 例；而冰凍組確診為微小乳頭狀癌18 例，誤診3 例，延遲確診3 例，診斷符合率為75.00%，誤診率為12.50%，延遲確診率為12.50%。石蠟組微小乳頭狀癌和乳頭狀癌共占惡性病變總數的93.94%，微小乳頭狀癌占惡性病變75.00%，占誤診病例及延遲確診病例的100.00%。與徐國新[6]的研究結果相近，其微小乳頭狀癌的冰凍切片診斷準確率為76.67%?？梢娂谞钕傥⑿∪轭^狀癌與乳頭狀癌在甲狀腺惡性病變中所占比例最高，也是最易漏診和延遲診斷的惡性病變。微小乳頭狀癌（直徑≤1.0cm 的乳頭狀癌）是臨床常見疾病，其病變灶微小，善于隱匿，不容易被發現，因此常會出現漏診誤診的情況[7]。冷凍切片由于制片時間短，組織沒有經過脫水處理，細胞體積比石蠟切片中的細胞大，乳頭狀結構更加擁擠密集，結構也更加不好辨認[8]。在冰凍切片中，微小乳頭狀癌的診斷困難，甲狀腺乳頭狀癌的病理診斷主要依據核的特征，而冰凍切片不出現毛玻璃樣核，還會存在人工假象[9]。所以，診斷醫師需要熟練掌握甲狀腺乳頭狀癌鏡下結構特征及其核特征，病理技術員在制片過程中也多注意經驗的積累，以提高微小乳頭狀癌的確診率。

表2 兩組在甲狀腺惡性腫瘤的鑒別結果

由此可見，雖然冰凍切片鑒別甲狀腺良惡性的準確率較高，但仍低于石蠟切片，尤其是在微小乳頭狀癌的診斷中，由于受多種因素影響仍有一定誤診及延遲診斷，故切除的組織標本在術后仍需進行石蠟切片病理診斷，為臨床醫生提供更加準確的診斷結果，更好地指導臨床治療。