骨關節置換術后切口感染的病原菌分布及血清TLR-4，MCP-1，IL-12的變化

何其濂 呂文強 張曉敏

(1.西安國際醫學中心醫院關節科，陜西 西安 710075；2.西安高新醫院骨科，陜西 西安 710075)

股骨粗隆間骨折為臨床中常見的骨折類型且好發于老年人群體，目前臨床上針對該疾病最為有效的方式為人工關節置換術，假體周圍感染是人工關節置換術后最嚴重的的并發癥，若術后感染則需將假體全部取出，進行二次植入。近年來，隨著無菌技術的進步，預防性抗生素的使用還有人工關節置換術技術的提高，國外文獻[1]報告骨關節置換術發生術后感染率從10%～15%降至現在的2%～5%。目前臨床上用來判斷患者是否發生感染以及受感染的程度的指標中較為常見的為TLR-4、單核趨化蛋白(MCP-1)、白細胞介素(IL-12)，可通過其在患者體內的含量水平來判斷患者是否受到感染以及受到感染的嚴重程度。本文主要探討骨關節置換手術術后切口感染的病原菌分布及血清TLR-4，MCP-1，IL-12水平的變化意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年9月至2020年9月在我院接受骨關節置換手術后且術后并發生感染的40例患者作為觀察組，其中男22例，女18例，年齡22～78歲，平均(56.8±9.4)歲，另選擇同期在本院接受相同手術治療且未發生術后感染的患者38例作為對照組，其中男20例，女18例，年齡18～76歲，平均(57.2±8.6)歲，包括髕骨關節置換36例，人工骨頭置換23例，全膝表面置換18例。納入患者均經X線檢查明確確診為骨關節炎、類風濕性關節炎、骨頭壞死癥、髖部骨折等疾病，且均為第1次實行人工關節置換術；患者臨床信息資料完整，且知情同意。

1.2方法 收集觀察組和對照組兩組成員的臨床病例資料，詳細準確的記錄所有受試成員的基礎信息和一般資料，包括抗菌藥物的使用、感染病史、年齡、肥胖、營養狀況、類風濕關節炎、是否長期飲酒、是否長期服用激素等可能與術后發生感染所有相關性因素。

1.3觀察指標 按照衛生部2001年《醫院感染診斷標準》[2]進行診斷,主要指標：病原菌感染種類，TLR-4；MCP-1；IL-12指標水平。采用酶聯免疫法(ELISA)檢測MCP-1；IL-12的水平，ELISA試劑盒購自于上海篤馬生物科技有限公司，采用流式細胞術測定血漿白細胞表面TLR-4濃度。抗人TLR4單克隆抗體購自Abcam公司，具體操作方法按照說明書進行。ELISA法操作步驟：清晨采集所有受試成員的肘靜脈血5 mL，注入EDTA抗凝管中，離心10 min，轉速為轉速：2 000～3 000 r/min，分離血清與血漿；分裝后保存在-20℃冰箱內待檢；用酶標儀檢測OD值并計算相應指標的濃度。流式細胞術的操作步驟：制備高活性的細胞懸液，加入50 μL(1∶20)(用DPBS稀釋)滅活正常兔血清，在-4℃下儲存30 min,洗滌后離心(1 000 r/min)5 min，棄去上清液，加入工作濃度的兔抗鼠熒光標記物50 μL，振搖充分后加1 mL固定液，即可檢測。

2 結 果

2.1感染病原菌分布 觀察組40例患者體內共分離出病原菌60株，其中包括革蘭陽性菌34株(56.7%)，革蘭陽性菌中以金黃色葡萄球菌為主，占33.3%，革蘭陰性菌22株(36.7%)，革蘭陰性菌中以銅綠假單胞菌為主，占20%，真菌占6.7%。見表1。

表1 病原菌分布和構成比

2.2IL-12、TLR-4；MCP-1的表達水平比較 感染組的IL-12、TLR-4；MCP-1水平均高于對照組(P<0.05)，觀察組患者接受12周治療后，三種指標水平均有明顯下降。見表2。

表2 兩組患者血液中IL-12、TLR-4、MCP-1表達水平的比較

2.3相關因素分析 結果顯示，年齡、手術時間、合并癥感染、高血壓、糖尿病、長期服用激素類藥物、肥胖、淤血阻滯、風寒濕痹是發生感染的影響因素(P<0.05)。見表3。

表3 骨關節置換術后切口感染的單因素分析

3 討 論

目前臨床上治療老年骨關節炎的最佳方法為人工關節置換術[3]，然而，人工置換術易發生術后感染，本實驗通過Logistic多因素回歸分析發現，患者的年齡、基礎疾病(糖尿病、高血壓)、并發癥感染個數、服用激素類藥物以及一些中醫證候均是發生術后感染的獨立危險因素。由于患者多為老年人，老年人免疫力降低[4]，器官活動能力降低，容易被病原菌侵入，老年人活動能力下降，消化能力弱，營養補給不足，切口愈合慢，術后恢復緩慢，另外，手術時術野范圍暴露在外，無菌條件不足時會增加病原菌與切口接觸的機會，引發感染[5]。本文結果表明，感染的病原菌有革蘭陽性菌占總比的56.7%，革蘭陽性菌中以金黃色葡萄球菌為主(33.3%)，革蘭陰性菌占總比的36.7%，革蘭陰性菌中以銅綠假單胞菌為主(20%)，其他還有真菌類(6.7%)。

本文結果顯示，觀察組的外周血TLR-4，MCP-1，IL-12水平顯著高于對照組，治療后，觀察組的這種指標水平均有明顯下降趨勢，TLR-4，MCP-1，IL-12的指標水平在機體發生炎癥反應時會有明顯變化，此外，TLR-4與機體炎性水平密切相關，當機體發生感染或遭受創傷時，TLR4可誘導炎性介質和炎性因子的釋放，嚴重破壞機體的免疫平衡狀態，因此聯合檢測這三種指標在炎癥反應中的水平變化具有一定的臨床價值[6-7]。通過實驗中的Logistic多因素回歸分析結果，對預防術后發生切口感染提出一些預防措施[8-10]：(1)實施人工關節置換的患者在手術前應做好充分的全身清潔工作，特別注意手術部位的皮膚清潔，防止手術過程中發生感染；(2)手術條件達到無菌要求；(3)盡量縮短手術時間，減少手術過程出血量；(4)患者及醫護人員應做好術后護理工作。