GPR37在肺腺癌中的表達及其臨床意義

郭 靜 尤劍彬 曹鵬駒 陳發林▲

1.福建醫科大學省立臨床醫學院，福建福州 350001；2.福建省龍巖市第三醫院檢驗科，福建龍巖 364000；3.福建省立醫院檢驗科，福建福州 350001

從世界衛生組織對全球肺癌的最新統計數據來看，2018年全年新發肺癌病例約占癌癥的11.6%，因肺癌死亡人數約占因癌癥死亡人數的18.4%，肺癌已經成為當今世界上發病率和死亡率最高的腫瘤[1]。大部分患者發現時已屬于中晚期，故尋找有效的早期診斷和指導預后的指標對于肺癌的治療尤為重要。

G 蛋白偶聯受體（G protein-coupled receptor，GPCR）包含7 個跨膜結構域，是迄今為止發現的最大的細胞膜受體，通過與各種不同的配體結合來傳遞來自細胞外環境的反應，是藥物研發的一個重要領域[2]。研究表明，GPCR 在癌癥的發生和轉移中同樣起關鍵作用[3-4]。G 蛋白偶聯受體37（G protein-coupled receptor 37，GPR37）也稱為帕金森相關內皮素受體樣受體（parkin-associated endothelin receptor-like receptor，Peal-R），于1997年首次從人腦中克隆出來，定位于染色體7q31-33[5]。是一種罕見的GPCR，主要表達在小腦、胼胝體、殼核、尾狀核、黑質和海馬體等神經系統區域[6]。

本研究通過分析癌癥基因組圖譜公共數據集（the cancer genome stlas，TCGA），探討GPR37 在肺腺癌中的表達及其臨床病理特征的相關性。

1 材料與方法

1.1 TCGA 數據下載

在TCGA（https：//cancergenome.nih.gov/）搜索并下載數據庫中肺腺癌相關RNAseq 數據，在排除缺失生存資料和臨床參數的病例后，共納入510 例肺腺癌組織（腫瘤組）及對應的肺腺癌患者臨床數據，其中癌和配對的癌旁組織56 例。

1.2 對GPR37 表達與臨床預后的關系進行分析

利用已有數據，分析在總體510 例肺腺癌和56例癌旁組織中GPR37 的表達差異，進一步利用癌和癌旁配對數據對GPR37 的臨床表達進行分析，采用COX邏輯回歸分析評估肺癌患者預后的獨立危險因數，采用Log Rank 檢驗對不同GPR37 表達水平肺腺癌患者進行分析，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

1.3 統計學方法

采用SPSS 23.0 統計學軟件對數據進行統計分析，使用Graph-Pad Prism v6 進行圖片繪制。兩組間均數比較采用t檢驗，方差不齊采用非參數檢驗，多組間均數比較采用方差分析，單因素及多因素分析采用COX邏輯回歸分析，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者GPR37 表達水平的比較

510 例肺腺癌樣本中，腫瘤組中GPR37 的表達水平高于癌旁對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（圖1A，見封三）。56 例癌旁正常組織和腫瘤組織配對檢測數據顯示在腫瘤組中GPR37 的表達量多于癌旁對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（圖1B，見封三）。圖1均摘自TCGA 數據庫。

2.2 GPR37 表達水平與肺腺癌患者預后關系的分析

采用TCGA 對GPR37 表達與肺腺癌患者預后關系進行生存預后分析，結果顯示，GPR37 表達水平與肺腺癌患者預后有顯著相關性，差異有統計學意義（P＜0.05）（圖2，見封三）。

2.2.1 GPR37 的表達水平的單因素分析 單因素COX邏輯回歸分析顯示，GPR37 的表達水平與性別、年齡以及M 分期無關，差異無統計學意義（P＞0.05），與Stage 分期中T 分期、N 分期有關，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 單因素COX 邏輯回歸分析

2.2.2 GPR37 的表達水平的多因素分析 多因素COX風險比例模型結果顯示，高GPR37 表達水平、Stage分期是肺癌患者預后差的獨立危險因素（P＜0.05）（表2）。

表2 多因素COX 邏輯回歸分析

3 討論

肺癌按照癌細胞組織來源可分為大細胞肺癌、小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）、腺癌（lung adenocarcinoma，LUAD）、鱗癌（lung squamous cell carcinoma，LSCC）等類型，肺腺癌目前已成為最常見的肺癌病理類型[7-8]。并且肺癌已經成為當今世界上發病率和死亡率最高的腫瘤。大部分患者發現時已屬于中晚期，五年預后率相對較低，對社會和家庭造成了極大的損失。所以尋找有效的早期診斷和指導預后的指標對于肺癌的治療尤為重要。腫瘤微環境時刻影響著腫瘤細胞的發生發展，而GPCR 是細胞與外部的信息交換不可或缺的組成部分。研究證實GPR37 是Parkin的底物，在常染色體隱性青少年帕金森病中異常積累，導致內質網應激和多巴胺能神經元死亡。GPR37還參與構成路易小體的核心結構，表現為更廣泛地參與帕金森病病理。此外，GPR37 還參與調節多巴胺轉運體和多巴胺D2 受體的功能，刺激多巴胺神經傳遞[9]。研究表明GPR37 可在發育過程中對少突膠質細胞分化和髓鞘形成發揮作用，推測GPR37 是治療多發性硬化等脫髓鞘疾病的潛在藥物靶標[10]。Fève 等[11]發現GPR37 在腦膠質瘤患者膠質瘤組織分離出的膠質瘤干細胞中高表達，從而推測GPR37 可能與膠質瘤的發生發展相關。以上結果表明GPR37 在中樞神經系統疾病中發揮著重要作用，但研究表明GPR37 還參與了其他腫瘤的發生發展，Wang 等[12]發現GPR37 可參與促進胃癌細胞的轉移，而下調GPR37 表達會促進肝癌細胞的增殖并提高細胞周期中S 期的比例[13]。同時資料顯示GPR37 的其他同源物質也與腫瘤密切相關，Yan 等[14]證實GPR87 可促進肝癌細胞中CD133+干細胞的生長和轉移。GPR56 作為一種黏附受體，在急性淋巴白血病、膠質瘤、黑素瘤、等多種腫瘤細胞中呈高表達[15-17]。本研究結果顯示，GPR37 在肺腺癌中的表達高于癌旁正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。單因素COX邏輯回歸分析顯示，GPR37的表達水平與性別、年齡以及M分期無關，差異無統計學意義（P>0.05），與T 分期及N 分期有關，差異有統計學意義 （P＜0.05）。生存預后分析結果顯示，GPR37 表達水平與肺腺癌患者預后有顯著相關性，差異有統計學意義（P＜0.05），表達越高，預后越差。多因素COX風險比例模型結果顯示，高GPR37 表達水平、Stage 分期是肺腺癌患者預后差的獨立危險因素。

綜上所述，本研究通過TCGA 數據庫可知GPR37在肺腺癌中高表達，且與臨床特征密切相關，推測GPR37 可能通過多種途徑參與到肺腺癌的發生發展過程，從而影響肺腺癌患者的預后。因此，GPR37 可作為肺腺癌潛在治療靶點或診斷標志物。

圖1 兩組患者的GPR37 表達水平（下轉第113頁）

圖2 GPR37 表達水平與肺腺癌患者預后的關系（下轉第113頁）