乙肝五項、PreS1Ag及HBV-DNA聯合檢測對乙型肝炎的診斷價值

顏曉芳

山東省單縣中心醫院核醫學科，山東單縣 274300

目前臨床在乙型肝炎診斷上多采用血清標志物（hepatitis B virus marker，HBV-M）進行檢驗，包括表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、表面抗體（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、E抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、E抗體（hepatitis B e antibody，HBeAb）、核 心 抗 體（hepatitis B core antibody，HBcAb）五種模式，組合模式多，且檢驗結果容易受到藥物、病毒變異、檢測方法等的影響，難以充分反映乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）的傳染性，漏診率、誤診率高[1-2]。隨熒光定量（polymerase chain reaction，PCR）技術的發展，乙型肝炎病毒基因（hepatitis B virus-Deoxyribonucleic acid，HBV-DNA）定量檢測在臨床中已經得到了廣泛應用，可通過對患者HBV復制狀態的檢測進行診斷，并已經成為了判斷HBV感染、復制的金標準[3-4]。但PCR技術對儀器要求高，基層醫院難以推廣。前S1抗原（pres1 antigen，PreS1Ag）是檢測HBV感染與復制的重要血清學指標，近年來其應用價值越發受到了臨床重視[5-6]。故本研究以我院2019年1月至2020年6月收治明確診斷的乙型肝炎患者100例為研究對象，探討乙肝五項、PreS1Ag及HBV-DNA聯合檢測的診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2019年1月至2020年6月收治明確診斷的乙型肝炎患者100例。納入標準：①滿足乙型肝炎診斷標準；②對研究知情同意。排除標準：①惡性腫瘤者；②肝腎功能異常者；③合并自身免疫疾病者；④嚴重感染疾病者；⑤血液系統疾病者。本組100例患者中男56例，女44例，年齡21～73歲，平均（36.51±5.17）歲，經乙肝五項檢驗HBsAg陽性71例。本研究已經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

所有患者入院后均完善臨床資料，采集空腹肘正中靜脈血2 ml， 3000轉/min離心5 min后，采集血清保存在-18℃環境中待檢。采用放射免疫分析法進行乙肝五項，使用試劑盒由北京北方生物技術研究所有限公司提供，所有操作嚴格按照說明書進行，以放免儀（西安核儀器廠，XH-6080十探頭全自動γ放射免疫計數器，陜食藥監械生產許20112081號）測定其水平；采用酶聯免疫吸附法（ELISA）進行PreS1Ag的檢測，使用試劑盒為上海阿爾法生物技術有限公司提供，所有操作嚴格按照說明書進行，以酶免儀（澳斯邦生物工程有限公司，E-STAR8CNH全自動酶免分析儀）測定其水 平。以PCR儀（Agilent Technologies Stratagene Mx3000P）檢測HBV-DNA水平，評價感染情況，如檢驗值水平低于5×102Copies/ml，判定為陰性。

1.3 觀察指標

①比較不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBVDNA檢測陽性率，為便于結果評價，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五項血清標志物分別以A、B、C、D、E表示。②分析HBsAg陽性下PreS1Ag陽性組與陰性組HBV-DNA水平分布情況，在HBV-M模式下按照PreS1Ag陽性與陰性分 組，分 析＜5×102、102～104、105～107、＞108四個級別下HBV-DNA水平分布情況。③比較HBsAg陽性下HBeAg陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率。④比較HBsAg陽性下HBV-DNA陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率。

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0統計學軟件處理數據，計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBV-DNA檢測陽性率比較

不同HBV-M模式下PreS1Ag陽性率、HBVDNA陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBV-DNA檢測陽性率比較

2.2 HBsAg陽性下PreS1Ag陽性組與陰性組HBV-DNA水平分布情況

HBsAg陽性模式下PreS1Ag陽性與PreS1Ag陰性組比較，HBV-DNA水平分布情況差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 HBsAg陽性下HBeAg陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率比較

HBsAg陽性樣本中HBeAg陽性組PreS1Ag陽性率高于HBeAg陰性組陽性率，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

2.4 HBsAg陽性下HBV-DNA陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率比較

HBsAg陽性樣本中HBV-DNA陽性組PreS1Ag陽性率高于HBV-DNA陰性組陽性率，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表2 HBsAg陽性下PreS1Ag陽性組與陰性組HBV-DNA水平分布情況

表3 HBsAg陽性下HBeAg陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率比較[n（%）]

表4 HBsAg陽性下HBV-DNA陽性組與陰性組PreS1Ag陽性率比較[n（%）]

3 討論

HBV感染已經成為全球性公共衛生問題，據WHO統計世界范圍內乙型肝炎攜帶者已達3.5億[7]。我國是乙型肝炎流行高發區，乙型肝炎患者以及病毒攜帶者多，及時診斷、預防、治療對乙型肝炎控制有顯著價值[8]。HBV為雙鏈環裝DNA病毒，前S1蛋白存在于Dane顆粒、管形顆粒中，主要對病毒的裝配、復制以及感染等過程產生作用[9-10]。前S1蛋白的21～27位肽段能夠介導病毒黏附肝臟細胞，和細胞膜受體進行結合，也可結合IL-6識別位點[10-11]。且該蛋白有肝細胞膜受體，具有較高免疫原性，在病毒入侵肝臟細胞中也發揮了重要作用[12-13]。

本研究中，對乙型肝炎患者進行乙肝五項、PreS1Ag及HBV-DNA檢測發現，HBsAg陽性血清標本中HBV-DNA與PreS1Ag的陽性率均較高，而陰性標本中陽性檢出率偏低，故可認為該抗原檢出主要在HBsAg陽性模式中，考慮與前S1蛋白基因編碼與HBsAg基因均處在HBV開放閱讀框S區相關[13-14]。而在A-組中，仍然存在部分HBV-DNA檢出，提示HBsAg陰性并不代表病毒轉錄、復制停止，僅代表著病毒復制能力的降低。HBeAg是判定HBV復制活躍性以及傳染能力的重要指標，如出現HBeAb則說明病毒復制能力與傳染性降低，本研究中HBsAg陽性標本中HBeAg陽性組PreS1Ag陽性率為74.65%，高于陰性組陽性率的17.24%，差異有統計學意義（P＜0.05），提示HBeAg陽性組PreS1Ag陽性率更高，而兩者同時陽性時，病毒處在高度活躍狀態，能夠反映出病毒的復制情況以及傳染能力。王碧玉等[15]研究中，HBeAg陽性組PreS1Ag陽性率為81.8%，高于陰性組的50.8%，差異有統計學意義（P＜0.05），與本研究一致，也佐證了本研究。另本研究中，HBsAg陽性樣本中HBV-DNA陽性組PreS1Ag陽性率為94.64%，高于陰性組陽性率的58.82%，差異有統計學意義（P＜0.05），由此可認為HBV-DNA陽性組PreS1Ag陽性率更高。馮變瑩等[16]研究中，HBV-DNA陽性組（60～69歲）PreS1Ag陽性率為93.3%，高于陰性組的76.7%，差異有統計學意義（P＜0.05），也說明HBV-DNA水平與PreS1Ag水平存在一定關聯。此外，本研究中HBsAg陰性患者中也存在PreS1Ag陽性與HBV-DNA陽性檢出情況，考慮為HBsAg前C區啟動區變異，導致變異病毒和原生病毒同時存在相關。

綜上所述，乙肝五項能夠反映感染HBV后的免疫狀態，但不能反映HBV復制情況，通過HBVDNA定量測量，可了解病毒感染、復制情況，而PreS1Ag不光可反映HBV復制情況，也能夠彌補由于病毒變異而導致的HBeAg無法檢出的問題，由此乙肝五項、PreS1Ag及HBV-DNA聯合檢測可有效檢出患者并全面了解患者病情，可為臨床診斷與治療提供可靠的依據，可在后續推廣應用。考慮基層醫院PCR檢測普及難度大，故考慮推廣聯合PreS1Ag進行檢測，以提高基層醫院檢測的準確性。