不同樣本類型對于CK-MB mass、CKMB 和CK 生化 檢測項目檢驗結果一致性的影響

胡詠梅

(廣州市荔灣區人民醫院，廣東 廣州 510370)

0 引言

分析前質量保證是臨床實驗室質量保證體系中最重要的環節之一，樣本的正確采集是分析前質量保證的一個主要內容。而選用什么樣的采血管是分析前樣本采集中保證檢驗結果準確性的關鍵環節。

肌酸激酶(CK) 廣泛存在人體組織中，其大部分分布在骨骼肌、心肌，CK 包括CKBB、CKMM 和CKMB 三種同工酶，其中CKMB 主要分布在心肌中，CKMB 升高是心肌損害的特異性指標之一，對早期急性心肌診斷價值高，已廣泛運用于臨床診斷。但由于CKMB 酶活性存在不穩定性，且抵抗干擾能力弱，對患者的真實水平反映不夠靈敏、準確和穩定。CKMB 質量測定(以下簡稱CKMBmass)，可以不受CKBB、巨CK 以及腺苷酸激酶等的干擾[1]，特異性大大提高；胸痛發作的最初6 小時內，敏感性明顯優于CKMB 酶活性測定法；檢測CKMB 的質量濃度比檢測CKMB 的酶活性更加適合心肌梗死患者[2]，對微小心肌梗死的診斷價值明顯優于傳統的活性檢測。

CKMBmass 是心肌類疾病生化項目的新方法學[3]，本文旨在研究CKMBmass 分析前樣本采血管的應用與選擇，同時比較和討論CKMB 和CK 分析前樣本采血管的應用與選擇，正確選用適合CKMBmass、CKMB 和CK 檢測的采血管，讓檢測結果更接近人體的真實水平，為臨床醫生呈現檢測者準確無誤的機體指標水平。

本文采用促凝管、枸櫞酸鈉抗凝管、肝素抗凝管和EDTA-K2抗凝管檢測CK-MB mass(酶質量)、CKMB(酶活性)和CK 酶活性)，并對檢測結果進行兩兩比較，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機抽取本院 2020 年1-10 月健康體檢人員160 例為對照組，其中男78 例，女82 例，年齡22-62 歲，45(34.0，51.7)歲。納入標準：意識清晰，積極配合，肝腎功能正常。排除標準：合并嚴重感染性疾病患者；凝血功能障礙患者；先天性心臟病患者；近期接受藥物相關治療者等等。抽取本院臨床上有血脂異常、肝病、腎病、心肌損傷疾病、血糖異常患者為疾病組(共160 例)，其中男75 例，女85 例，年齡24-72 歲，51.5(39，59)歲。為了本研究正常值水平和異常值水平的3 個指標不同水平濃度數值，故設對照組和疾病組。

1.2 儀器與試劑

選用東芝120-RF 生化儀，CKMBmass(膠乳免疫比濁法，北京九強生物技術股份有限公司)，CKMB 和CK(DGKC 優化比色法，上海執誠生物科技有限公司)，采血管選用促凝、枸櫞酸鈉、肝素和EDTA-K2 4種采血管(均為成都瑞琦醫療科技有限責任公司生產)。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集與檢測

同時收集同一患者或體檢人員的4 種采血管樣本。將不同的樣本在相同的條件下同時按照相關SOP 文件置生化儀檢測。

1.3.2 統計學方法

采用 SPSS 23.0 進行統計分析。采用Shapiro—Wilk 方法判斷數據是否為正態分布，非正態分布的數據用中位數P50(P25，P75)來表示；組間數據采用非參數多個相關樣本比較的 Friedman M 檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

對照組和疾病組中各樣本類型的中位數結果如表1所示。

表1 不同抗凝管血液樣本檢測結果的比較中位數P50(P25，P75)

各組的數值差異兩兩比較結果如表2 所示，具體表述如下：

表2 組間數據兩兩比較差異，以P＜0.05 為差異有統計學意義

(1)每個兩兩比較組與生化指標對應的對照組和疾病組的結果P值均為一致性，即對照組和疾病組的結果均P值＞0.05 或P值＜0.05；

(2)CKMBmass 檢測結果在枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管中存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異；

(3)CKMB 檢測結果在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組均存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異；

(4)CK 檢測結果在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組均存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異。

3 討論

不同采血管分離的血液標本大致分為三類，分別為血清、血漿和全血，這三種標本有著明顯的區別，血清是血液發生凝固后血凝塊發生回縮析出的淡黃色透明液體，血漿是血液加抗凝劑后離心所得的無細胞上清液[4]。

血清經過凝固后，其原本含有的凝血因子、纖維蛋白原及少量參與血凝的其他血漿蛋白質會被消耗，并且凝固過程中可能對血細胞產生擠壓，使細胞內的物質釋放出來，還增添了少量血凝時由血小板釋放出來的物質，從而影響檢測結果。

肝素是一種含有硫酸基團的黏多糖，它和抗凝血酶Ⅲ相結合，促進其對凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、X 和凝血酶活性的抑制作用，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用[5]；EDTA 鹽和枸櫞酸鹽可以和血液中鈣離子結合形成螯合物，從而使鈣離子失去凝血作用，阻止血液凝固；從以上分析原理可以得知，肝素與其余2 種抗凝劑的抗凝機制完全不同。

本文研究顯示，CKMBmass 在血清(促凝)和肝素管中的檢測結果無差異，CKMBmass 為免疫比濁法，說明肝素基本上不干擾免疫比濁法的CKMB 質量檢測；有報道稱肝素可能對 CK、CKMB 測定有干擾，由于CKMB 采用免疫抑制法，其原理是用抗體結合CK 分子的M 亞基后測定B 亞基的活性，即認為是由于肝素干擾了此項測定方法，或是對B 亞基也造成抑制現象[6]。也有研究報道，在低濃度CK、CKMB 下，添加了肝素的樣本顯現出干擾效應，即由于采血困難及采血量不夠等多種原因，使肝素鋰濃度達到或超過31.25U/mL 時可使CK 及CKMB 結果嚴重偏低產負擾[7]。本研究未見肝素干擾CK 或CKMB 的檢測；目前國內報道肝素對CK 或CKMB 的影響情況不一，王倩[8]等研究顯示肝素對CK 檢測有影響，張佳昌[9]與吳燕琴[10]等研究表明肝素對CK 無影響。

本研究顯示，枸櫞酸鈉管中CKMB 和CK 的結果與其它3種采血管的結果有差異，這與2019 年賴巧斌[11]的報道相符，原因可能為枸櫞酸鈉容易使血液堿化，從而影響檢測結果。

綜上所述，本研究探討4 種不同的采血管對CKMBmass、CKMB 及CK 檢測結果的影響，結果的差異性與對照組和疾病組的分組無關。檢測結果顯示，CKMBmass 檢測結果在枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管中均存在差異，不建議采用枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管檢測CKMBmass；CKMBmass 檢測結果在促凝管和肝素管中均無差異，可使用促凝管和肝素管檢測CKMBmass；CKMB 和CK 檢測結果均在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組存在差異，不建議采用枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管檢測；CKMB 和CK 檢測結果在促凝管和肝素管中均無差異，可使用促凝管和肝素管檢測CKMB 和CK。