3種酶聯免疫吸附試驗試劑檢測丙型肝炎抗體結果分析

趙 姝

（遼寧省本溪市桓仁縣人民醫院檢驗科，遼寧 本溪 117200）

丙型肝炎簡稱為丙肝，是患者肝部受HCV（丙型肝炎病毒）感染而導致一種疾病[1]，感染此種病毒的途徑主要包括輸血、吸毒、針刺傷等[2]，臨床上對于丙型肝炎的治療有著一定的難度，如何提高其治療效果一直是臨床研究的熱點所在，眾所周知，診斷是治療的第一步，有效的診斷方法不僅可以幫助醫師確定患者的病變位置，而且可以幫助醫師為患者制訂針對性的治療計劃。酶聯免疫吸附試驗試劑（ELISA）一直是臨床上常用于檢測丙型肝炎的方法[3-5]，但其方法較多，具體哪種方法的效果最好仍需通過臨床研究進行探討。本次研究選取300例患者的血液標本，研究3種酶聯免疫吸附試驗試劑（ELISA）對丙型肝炎抗體的檢測結果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選取在我院確診為丙型肝炎的患者300例為研究對象，時間為2017年6月至2018年6月，將其血液標本300例作為檢測對象，根據隨機抽簽分組的方法，將300例血液標本平分為了3個組別，即A組、B組和C組，患者一般資料如下。A組：男女患者為48∶52，年齡31～75歲，平均（52.34±1.31）歲；B組：男女患者為50∶50，年齡30～76歲，平均（52.76±1.13）歲；C組：男女患者為49∶51，年齡32～74歲，平均（52.35±1.69）歲。患者、家屬對此次研究知情且同意，3組患者的一般資料比較，P＞0.05，具有可比性。

納入標準：患者均知情并簽署知情同意書。排除標準：①身體有其他嚴重不可逆的并發癥者。②存在電解質紊亂、酸堿平衡失調、心律失常者。③患有獲得性免疫缺陷綜合征者。④嚴重精神疾病或語言溝通有障礙的患者、無人照顧者。⑤患有肝腎功能異常者。⑥在此次研究進行前，服用過會影響此次研究結果類藥物者。⑦患有惡性腫瘤、或預計生存期＜3個月者。⑧在研究過程中對研究存在異議者[3-7]。

1.2 方法 將患者標本分別用試劑A和試劑B行常規抗HCV抗體ELISA初步檢測，對標本進行陰性、陽性的判定，對檢測結果為陽性和弱陽性的標本進行PCR、RIAB檢測，確定標本是否包含HCV，之后同時對標本行3中ELISA試劑進行再次檢查，再與之前的結果進行對比。對血清（1 NCU/mL）進行稀釋處理，倍數為512倍，得9份標本，分別以試劑A、試劑B、試劑C對標本進行平行檢測，并對結果進行對比分析；利用試劑A、試劑B、試劑C 3種試劑對RIBA檢測結果為陽性的標本進行再次檢測，以S/CO值進行比對分析。

1.3 觀察指標 將A、B、C 3組標本檢測的陽性率作為觀察指標。

1.4 統計學處理 本研究所得數據用SPSS20.0統計軟件進行處理，計數資料予以χ2檢驗，數據用[n（%）]表示，計量資料予以t檢驗，數據用（）表示，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

A組標本檢測的陽性例數為58例，陽性率為58%；B組標本檢測的陽性例數為78例，陽性率為78%；C組標本檢測的陽性例數為91例，陽性率為91%，將C組檢測的陽性率與A組、B組進行組間對比，結果顯示P＜0.05。見表1。

表1 檢測結果對比

3 討論

丙型肝炎是臨床上常見的一種感染類疾病，血液傳播、性傳播和母嬰傳播是該疾病常見的傳播途徑，患者的臨床表現為惡心、食欲下降、全身無力等癥狀[8]，臨床統計顯示，丙型肝炎病毒在全球的感染率高達3%，全球約1.8億人患有丙型肝炎，每年新發丙型肝炎患者約有3.5萬例，丙型肝炎是一種全球性流行疾病，會導致患者出現肝臟壞死和肝臟纖維化，嚴重時甚至會導致肝癌，最終威脅患者的生命安全[9-10]，是當下極為嚴重的社會以及公共衛生問題。對于乙型肝炎的治療，診斷是的第一步，有效的診斷方法不僅可以幫助醫師確定患者的病變位置，而且可以幫助醫師為患者制訂針對性的治療計劃，并且可以幫助醫師評價治療的有效性，但是何種檢驗途徑最佳仍需進行進一步的臨床研究。

夾心法試劑C是時下一種檢測丙型肝炎抗體的酶聯免疫吸附試驗試劑，可作為抗丙型肝炎病毒篩查試劑對相關人員予以篩查以及患者的早期診斷。在本次實驗之中，設了不同類別的實驗，對有關指標進行平行檢測，用以與間接法酶聯免疫吸附試驗試劑的檢測結果進行對比分析，實現對于夾心法試劑C的客觀評價。在間接法酶聯免疫吸附試驗之中，由于間接法酶聯免疫吸附試驗用酶標記抗人免疫球蛋白G作為第二抗體用以檢測血清之中是否存在丙型肝炎病毒免疫球蛋白G抗體，而免疫球蛋白G抗體出現于體內的時間要遠遠晚于免疫球蛋白M，這就容易導致不少獻血者在感染早期采集血液時出現漏檢的現象。此外，為了避免血清之中諸如類風濕因子或非特異性抗體所帶來的干擾，該試驗的首要工作即是降低檢測樣本量以及稀釋樣本來控制反應的值。此外，在間接法酶聯免疫吸附試驗過程中，較為容易遭受非特異性抗體所帶來的影響，如非特異性免疫球蛋白G抗體的吸附或是類風濕因子的干擾等，導致結果呈假陽性。從這一現象來說，間接法酶聯免疫吸附試驗試劑的檢測敏感度不高，同時存在特異性差的問題。

近些年來，在全球范圍內丙肝抗體的診斷試劑實現了由間接法向夾心法的轉移。因丙肝重組抗原的活性更加依賴于空間構象，因此，夾心法試劑的研究重點與難點則是抗原結構的穩定性與進行酶標記時所造成的影響。當前，影響抗丙型肝炎病毒試劑盒質量的主要因素是其包被的丙型肝炎病毒抗原。目前，我國血站多是采用不同廠家的間接法酶聯免疫吸附試驗試劑來對獻血對象的丙型肝炎抗體進行初步篩查，其目的就是避免因不同廠家包被的抗原片段不同而引發漏檢的問題。間接法酶聯免疫吸附試驗試劑的試劑盒靈敏度相對較高，不過結合本次實驗數據來看，不同廠家間接法酶聯免疫吸附試驗檢測試劑的使用也有導致假陽性增加的可能，進一步加重血液篩查工作的壓力以及成本。有關數據報告，在血液篩查工作之中應用夾心法試劑能夠大幅提高抗丙型肝炎病毒陽性標本的檢出率，降低假陽性率，能夠為血液篩查工作提供便利以及更高的精準度。而這一論述與本次實驗所得結果基本一致，可作為參考。

目前，對于丙型肝炎病毒感染標志物與檢測方法主要有以下兩種：首先是上文所提到的，應用不同廠家所生產的酶聯免疫吸附試驗試劑來檢測丙型肝炎病毒抗體；其次則是采用一種酶聯免疫吸附試驗試劑檢測丙型肝炎病毒，再使用另一種試劑來檢測乙型肝炎病毒核酸。目前，在歐美等發達國家之中，核酸檢測在獻血者血液篩查工作之中得到了較為廣泛的應用，在我國部分地區也有采供血機構應用這一方法，并做出了大量的實踐摸索。總得來說，在選擇丙型肝炎病毒感染標志物檢測試劑及其方法時，應對夾心法酶聯免疫吸附試驗試劑、間接法酶聯免疫吸附試驗試劑以及丙型肝炎病毒核算試劑進行妥善配伍，用以提高丙型肝炎感染標志物陽性標本的檢出率，降低假陽性率，為血液篩查工作提供便利的同時，也進一步促進了目前無償獻血工作的可持續發展。

本研究結果顯示：A組陽性例數58例，陽性率為58%；B組陽性例數78例，陽性率為78%；C組陽性例數91例，陽性率為91%，將C組檢測的陽性率與A組和B組分別進行組間對比，P＜0.05，差異顯著。結果提示，對于丙型肝炎抗體的臨床檢測來說，通過夾心法的酶聯免疫吸附試驗試劑（ELISA）的檢查方法有著較好的效果，陽性率更佳。本次實驗所得結果與過往文獻資料所得研究結果基本一致，具有一定的參考性。不過囿于樣本偏少以及外界因素影響等問題，數據結果在精密性上可能有所欠缺，需待日后擴大實驗樣本數予以進一步研究分析。

綜上所述，在丙型肝炎抗體檢測之中，應用夾心法的酶聯免疫吸附試驗試劑（ELISA）的檢查方法檢測效果最優優異，臨床價值突出，可予以推廣應用。