膝骨性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液和血清脂肪因子Chemerin的檢測(cè)及分析

丁興龍,王怡然,郭繼強(qiáng)△

1.徐州礦務(wù)集團(tuán)總醫(yī)院，江蘇徐州 221006；2.徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，江蘇徐州 221000

膝骨性關(guān)節(jié)炎(KOA)是一種常見(jiàn)的慢性關(guān)節(jié)疾病，以關(guān)節(jié)軟骨退變及滑膜炎為特征[1]，其發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚，有報(bào)道指出肥胖可能是KOA的危險(xiǎn)因素之一[2-3]。肥胖會(huì)促進(jìn)指間關(guān)節(jié)等非承重關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎的發(fā)生，所以肥胖不只是因?yàn)樵黾恿顺兄仃P(guān)節(jié)的負(fù)荷量而增加了發(fā)病率[4]。Chemerin是新發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞因子，Chemerin可介導(dǎo)炎性因子和基質(zhì)金屬蛋白酶的釋放[5],很多學(xué)者猜想其與骨性關(guān)節(jié)炎中的炎性反應(yīng)有關(guān)，但目前相關(guān)研究不多。本研究選取了37例臨床確診的KOA的患者，與非KOA的37例患者進(jìn)行對(duì)比研究，旨在探討KOA患者病情嚴(yán)重程度與關(guān)節(jié)炎和血清脂肪因子Chemerin水平的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 經(jīng)徐州礦務(wù)集團(tuán)總醫(yī)院倫理委員會(huì)同意，選取2017年2月至2019年2月至徐州礦務(wù)集團(tuán)總醫(yī)院行關(guān)節(jié)鏡治療的患者共74例納入研究。其中，臨床確診為KOA的患者37例作為KOA組，非KOA的患者37例作為對(duì)照組。KOA組患者均符合美國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)制定的KOA診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；受試者均同意參與本研究，并能配合試驗(yàn)資料的收集；KOA組影像學(xué)K-L分級(jí)為Ⅱ～Ⅳ級(jí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有自身免疫系統(tǒng)疾病者，如：類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等；(2)合并其他炎癥性關(guān)節(jié)疾病的患者；(3)3個(gè)月內(nèi)使用過(guò)激素類(lèi)或免疫抑制類(lèi)藥物的患者；(4)合并嚴(yán)重心、肝、腎等重要器官病變或精神心理疾病的患者。兩組患者年齡、性別構(gòu)成、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)和病程等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2方法

1.2.1標(biāo)本的收集與保存 血清：采血前1晚禁食禁水，次日晨采集外周靜脈血4 mL于無(wú)菌非抗凝試管中，以3 000 r/min離心15 min，取血清并置于Eppendorf管中，-80 ℃條件下儲(chǔ)存。關(guān)節(jié)液：麻醉滿意后，抽取關(guān)節(jié)液4～5 mL，置于無(wú)菌試管中，2 h內(nèi)進(jìn)行離心，以3 000 r/min離心15 min，取上清液并置于Eppendorf管中，-80 ℃條件下儲(chǔ)存。

1.2.2關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子及血清超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)的檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行Chemerin因子的檢測(cè)：將標(biāo)本置于室溫下解凍，待標(biāo)本溫度完全恢復(fù)至室溫后，取待測(cè)的血清或關(guān)節(jié)液100 μL，加入已包被有單抗的96孔板中，做好標(biāo)記。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行脂肪因子Chemerin水平檢測(cè)，試劑盒為美國(guó)Phoenix Pharmaceuticals CA公司產(chǎn)品。血清hs-CRP水平的檢測(cè)：取血清標(biāo)本置于室溫下，待溫度完全恢復(fù)至室溫后利用速率散射免疫比濁法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3分析的指標(biāo) 兩組患者關(guān)節(jié)液、血清脂肪因子Chemerin水平、血清hs-CRP水平、Outer-bridge軟骨損傷評(píng)分和影像學(xué)Kellgren-Lawrence(K-L)評(píng)分。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平的比較 KOA組關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平的比較

2.2KOA患者Chemerin因子水平與血清hs-CRP水平的關(guān)系 KOA患者關(guān)節(jié)液和血清Chemerin因子水平均與血清hs-CRP水平呈正相關(guān)(r=0.88、0.57，P<0.05)。

2.3KOA患者Chemerin因子水平與Outer-bridge軟骨損傷評(píng)分的關(guān)系 KOA患者關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平與Outer-bridge軟骨損傷評(píng)分均呈正相關(guān)(r=0.37、0.28，P<0.05)。

2.4KOA患者Chemerin因子水平與K-L分級(jí)的關(guān)系 KOA患者中，K-L分級(jí)Ⅳ級(jí)的患者血清和關(guān)節(jié)液Chemerin因子水平均高于K-L分級(jí)Ⅲ級(jí)的患者(P<0.05)，而K-L分級(jí)Ⅲ級(jí)的患者也均高于Ⅱ級(jí)的患者(P<0.05)。Spearmen相關(guān)性分析顯示，關(guān)節(jié)液和血清Chemerin因子水平與K-L分級(jí)均呈正相關(guān)(r=0.91、0.97，P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同K-L分級(jí)患者關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平的比較

3 討 論

骨關(guān)節(jié)炎是一種老年退行性關(guān)節(jié)疾病，國(guó)內(nèi)發(fā)病率約為10%，但在65歲以上人群中發(fā)病率可達(dá)50%，嚴(yán)重影響了老年人的生活質(zhì)量[7]。隨著社會(huì)老齡化現(xiàn)象的加重，KOA的發(fā)病率也會(huì)增加，會(huì)給社會(huì)和家庭帶來(lái)巨大的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[8]。人們對(duì)KOA的病因和發(fā)病機(jī)制并不完全清楚，尚缺乏有效的治療手段[9]。有研究報(bào)道，減輕體重可緩解KOA的癥狀，而且肥胖人群中KOA的發(fā)病率較普通人群高，這可用肥胖人群中膝關(guān)節(jié)負(fù)重多，容易損傷來(lái)解釋[10]。但是也有研究發(fā)現(xiàn)，肥胖人群中指間關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率也較高[11]，這說(shuō)明肥胖導(dǎo)致的骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病率增高不僅與負(fù)重有關(guān)，還可能與內(nèi)分泌物質(zhì)有關(guān)。

脂肪細(xì)胞因子中瘦素、脂聯(lián)素、內(nèi)脂素和抵抗素等已被證實(shí)，確實(shí)可通過(guò)炎癥免疫反應(yīng)，影響骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展[12-14]。CONDE等[15]研究發(fā)現(xiàn)，人軟骨細(xì)胞中可表達(dá)Chemerin因子及其受體，而且Chemerin因子的表達(dá)可被促炎性因子，如腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素1β及白細(xì)胞介素6等上調(diào)[16]。也有研究證實(shí)，Chemerin可刺激體外培養(yǎng)的人軟骨及滑膜細(xì)胞產(chǎn)生上述炎性因子，在降低Chemerin水平后，這些炎性因子表達(dá)也隨之下降[17-19]，這都充分說(shuō)明了Chemerin與多種炎性因子的表達(dá)相關(guān)，所以其也很可能在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用[20]。

本研究中，KOA組關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平均高于對(duì)照組；KOA患者關(guān)節(jié)液和血清Chemerin因子水平與血清hs-CRP水平呈正相關(guān)，其中關(guān)節(jié)液Chemerin因子水平與hs-CRP水平關(guān)系更密切；KOA患者關(guān)節(jié)液、血清Chemerin因子水平與Outer-bridge軟骨損傷評(píng)分呈正相關(guān)，其中關(guān)節(jié)液Chemerin因子水平與Outer-bridge評(píng)分關(guān)系更密切。上述結(jié)果與馬軍等[21]的研究結(jié)果相符，說(shuō)明軟骨損傷可能會(huì)導(dǎo)致Chemerin因子高表達(dá)，而且是由關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨直接表達(dá)，并影響關(guān)節(jié)炎性反應(yīng)。進(jìn)一步研究顯示，血清和關(guān)節(jié)液Chemerin因子水平與影像學(xué)K-L分級(jí)均呈正相關(guān)，預(yù)示著Chemerin因子水平有望成為評(píng)估KOA嚴(yán)重程度的指標(biāo)。

綜上所述，脂肪因子Chemerin可影響KOA的炎性反應(yīng)，其水平與關(guān)節(jié)損傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，所以筆者推測(cè)Chemerin因子可能會(huì)成為一個(gè)新的骨性關(guān)節(jié)炎診斷和用于嚴(yán)重程度判斷的生物學(xué)標(biāo)志。