女性生殖道人乳頭瘤病毒基因分型與宮頸病變相關性分析

陳新瑤 張 健 丁燕佳 莫煥桐

汕頭大學醫學院附屬潮州市人民醫院中心實驗室，廣東潮州 521011

宮頸疾病是危害我國女性健康的主要婦科疾病，其中以宮頸癌危害性最強，是現階段危害我國女性身體健康的第二大惡性腫瘤，研究證實宮頸癌是由慢性宮頸炎癥、宮頸腫瘤在環境、遺傳、病理性因素等多因素作用下發展而來[1-3]。近年來，宮頸病變與人乳頭瘤病毒（HPV）感染的密切關系成為醫學界的共識，盡管目前臨床預防HPV感染已有四價、九價疫苗，但由于受疫苗稀缺性高、疫苗價格昂貴、宮頸疾病防治意識薄弱等因素影響，目前我國女性HPV疫苗接種率仍較低[2]。盡管疫苗防治在短期內難以實現，但隨著基因診斷技術與設備的不斷進步，方便快捷的HPV基因分型檢測已逐漸應用于各大醫院，有助于臨床對宮頸病變與HPV感染間的關聯性作進一步研究[3]。本研究擬探討HPV基因分型與宮頸病變的相關性，以期為臨床宮頸疾病防治與診斷提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2015年2月～2020年2月汕頭大學醫學院附屬潮州市人民醫院婦產科行宮頸病變篩查的6540例標本中，選取648例女性臨床資料作為研究對象。所有患者行宮頸組織病理活檢，根據病理學診斷結果進行分組：將高度鱗狀上皮內病變（HSIL）患者設置為A組（124例），將低度鱗狀上皮內病變（LSIL）患者設置為B組（308例），將宮頸炎患者設置為C組（216例）。其中A組年齡27～76歲，平均（38.43±4.29）歲，宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅱ52例，CINⅢ42例，宮頸癌30例。B組年齡29～73歲，平均（38.19±4.35）歲，CINⅠ308例。C組年齡26～75歲，平均（38.05±4.29）歲。三組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究獲得汕頭大學醫學院附屬潮州市人民醫院醫學倫理委員會批準，所有患者簽署知情同意書。納入標準：①性生活史均≥3年；②接受過HPV基因分型檢測及陰道鏡下活檢；③病歷、檢查報告、處方等臨床資料完整，無缺失、涂改、丟失。排除標準：①合并有嚴重陰道炎、盆腔炎等其他婦科急性感染性疾病者；②合并有心、肝、腎等臟器功能嚴重損害者；③合并有嚴重血液、內分泌疾病者；④惡性腫瘤晚期患者。

1.2 方法

1.2.1 HPV基因分型檢測 參照《2014年NCCN宮頸癌臨床實踐指南》[4]中HPV分型檢測方法，受檢者檢查前3 d禁止性生活，檢查期間應避開經期，檢查時采用一次性使用無菌陰道擴張器（常州曉春醫療器材有限公司）使受檢者宮頸充分暴露，使用特質毛刷深入受檢者宮頸內，順時針輕旋3～5周收集宮頸口和頸管脫落細胞，將毛刷置于保存液中保存送檢。采用凱普公司生產的HPV分型檢測試劑盒，通過基因擴增技術及導流雜交[聚合酶鏈式反應（PCR）-膜雜交]法進行21種HPV基因型檢測，包括高危型HPV（HRHPV）15種：HPV 68、66、59、58、56、53、52、51、45、39、35、33、31、18、 16；低危型HPV（LR-HPV）6種：HPV 81、44、43、42、11、6。

1.2.2 陰道鏡下活檢 檢查前3 d應禁止性生活，檢查期間避開經期，采用江蘇錦源醫療科技公司JY-2620型電子陰道鏡，擴陰并充分暴露宮頸后將探頭置入受檢者陰道內，操作鏡頭對受檢者子宮頸形態、顏色、有無贅生物等進行詳細檢查，采集受檢者宮頸一小塊組織，待陰道鏡檢查完成后送至實驗室進行病理學檢查，以病理學檢查結果作為診斷金標準。

1.3 觀察指標

對比三組的高感染率HPV亞型分布及HR-HPV、LR-HPV感染情況，具體如下。①HR-HPV亞型分布：結合HPV基因分型檢測結果，統計出感染率前10位的HPV亞型進行比較。②高低危型HPV感染情況：根據HPV基因分型檢測結果，進一步對三組受檢者感染HPV亞型進行分類比較，將感染15種HR-HPV及6種LR-HPV進行對比；同時比較兩組單亞型及多亞型HPV感染情況，感染兩種或以上HPV亞型則為多亞型感染。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，正態分布的計量資料采用均數±標準差（±s）表示，非正態分布的計量資料轉化后采用均數±標準差（±s）表示，三組間的比較采用單因素方差分析，任意兩組比較采用LSD-t檢驗，計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用多元Logistic回歸分析對HPV基因分型結果與宮頸病變的相關性進行分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 高感染率HPV亞型分布

HPV基因分型檢測結果顯示，納入研究的648例患者中HPV陽性105例，HPV陽性率為16.20%。其中A組HPV陽性數41例；B組陽性數53例；C組陽性數11例。感染率最高的HPV亞型依次為HPV 52、16、81、58、68、53、33、18、39，其中僅HPV 81為LRHPV，其余均為HR-HPV（表1）。

表1 高感染率HPV亞型分布[n（%）]

2.2 各組HPV分型檢測結果的比較

三組間HPV陽性率、HR-HPV陽性率、多亞型感染比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；其中A組HPV陽性率、HR-HPV、多亞型感染率均高于B組、C組，B組HPV陽性率、HR-HPV、多亞型感染率高于C組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。三組間LR-HPV、單亞型感染比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表2）。

表2 各組HPV分型檢測結果的比較[n（%）]

2.3 宮頸癌與HPV感染的相關性

多因素分析結果提示，HPV感染（β=0.053，OR=1.763，95%CI=1.332～2.245）、HR-HPV感染（β=0.078，OR=2.452，95%CI=1.502～3.547）是宮頸癌的危險因素（P＜0.05）（表3）。

表3 宮頸癌與HPV感染的相關性分析

3 討論

宮頸疾病包括宮頸炎、宮頸損傷、宮頸腫瘤、宮頸癌前病變及宮頸癌等，是危害我國女性健康的主要婦科疾病，其中宮頸癌以高危害性、高致死率及低治愈率成為危害女性身體健康與生命安全的第二大惡性腫瘤性疾病[5-9]。近年來，越來越多研究證實了宮頸病變與HPV感染間存在關聯性，在宮頸癌患者中HPV感染率更是高達90%[6-7]。由于宮頸病變與HPV間的密切關聯，臨床預防宮頸癌等宮頸病變主要以預防HPV感染為主，雖然目前已有效果良好的HPV感染預防疫苗，如最常見的四價疫苗可預防HPV 6、11、16、18等四種HPV亞型感染引發的宮頸疾病，而九價疫苗更是將預防范圍擴大到了HPV 6、16、11、18、31、33、45、52、58等九種HPV亞型，但現階段HPV疫苗較稀缺且價格較昂貴，難以滿足廣大女性的接種需求[8-9]。隨著基因診斷技術與設備的不斷進步，方便快捷的HPV基因分型檢測方法逐漸應用于臨床，不僅大大提高了臨床對HPV感染引起的宮頸病變的診斷效率，而且有助于對患者的宮頸病變歷程及預后水平作出更加科學準確的評估[10-12]。

從各組受檢者HPV基因分型檢測結果來看，A組HPV陽性數大于B組和C組，差異有統計學意義（P＜0.05），即從A組到C組隨著受檢者宮頸病變程度的逐漸減輕，各組HPV陽性率呈下降趨勢，與王晴等[13]的結果相似，提示HPV陽性率與宮頸病變程度間呈正相關，宮頸病變程度越嚴重則HPV陽性率越高。不僅如此，本研究結果顯示，A組HR-HPV陽性率也高于B組和C組，差異有統計學意義（P＜0.05），與石丹麗等[14]的結果相符，表明HR-HPV感染與宮頸病變程度間呈正相關，HR-HPV或可加重患者宮頸病變程度及臨床癥狀，提示臨床應對HR-HPV感染患者盡早診斷并進行重點監護，采取積極高效的治療以降低患者病情加重風險，提高治療效果及預后水平。本研究結果顯示，各組間LR-HPV感染率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），與麥雄燕等[15]的結果相似，提示LR-HPV可能不是加重患者宮頸病變程度的主要影響因素。

綜上所述，HPV感染可增加女性宮頸病變發生風險，且HR-HPV可進一步增加患者宮頸病變程度，提高宮頸癌發病率，臨床應盡早診斷并給予積極治療，以降低患者疾病風險。