稻田常用農藥對臺灣泥鰍的急性毒性比較試驗

劉羽清　王俊鵬　姜川藍　成慧中　張龍崗　楊玲

摘要：在水溫為（25.3±2.4）℃條件下，采用靜水試驗法，進行了四種稻田常用農藥（虱螨脲、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、氰氟草酯和五氟磺草胺）對體質量為（16.2±0.6）g的臺灣泥鰍（Paramisgurnus dabryanus spp.）幼魚的急性毒性試驗。結果顯示：四種試驗藥物對臺灣泥鰍幼魚的96 h半致死濃度和安全質量濃度分別為：虱螨脲（712.7 mg/L，168.7 mg/L）、甲維鹽（39.4 mg/L，12.3 mg/L）、氰氟草酯（26.1 mg/L，11.0 mg/L）、五氟磺草胺（25.2 mg/L，9.3 mg/L）。四種試驗藥物毒性大小依次為五氟磺草胺>氰氟草酯>甲維鹽>虱螨脲。試驗結果表明，四種農藥安全質量濃度均高于日常用量，可安全使用。

關鍵詞：臺灣泥鰍（Paramisgurnus dabryanus spp.）;急性毒性;半致死濃度;安全濃度

中圖分類號：S966.4

臺灣泥鰍（Paramisgurnus dabryanus spp.）又名臺灣龍鰍、臺灣鰻鰍等，是由臺灣、大陸及東南亞地區的泥鰍品種進行種間雜交、選育，培育出的泥鰍新品種，取名為“TW-6臺灣龍鰍”，屬于大鱗副泥鰍的改良養殖新品種[1]。隸屬于鯉形目（Cypriniformes）、鰍科（Cobitidae）、花鰍亞科（Cobitinae）、副泥鰍屬（Paramisgurnus），具體分類地位不明確[2-3]。近年來，隨著“稻漁綜合種養模式”在全國范圍掀起的發展熱潮[4]，“水稻+臺灣泥鰍”的養殖模式也得到了大力推廣。該模式是在稻田四周開挖環溝，或者在稻田中開挖“十”字、“井”字溝，利用稻田水系中天然餌料生物，并投喂少量的泥鰍專用配合飼料來養殖臺灣泥鰍[5]。水稻種植期間需要定期噴灑農藥來除草和殺蟲，農藥的劑量和使用時機如有不當，將嚴重威脅稻田中臺灣泥鰍的存活和產量。因此，摸清稻田幾種常用農藥對臺灣泥鰍的毒性效應和安全濃度，是“水稻+臺灣泥鰍”養殖模式能否成功的重要前提。目前，關于農藥對水產養殖動物的毒性效應研究較少，僅見在泥鰍[5-8]、大鱗副泥鰍[9]、黃河鯉[10]、羅非魚[11]等品種上有報道，而關于農藥對臺灣泥鰍的急性毒性研究尚未見報道，本試驗選擇兩種稻田常用殺蟲劑和兩種常用除草劑對臺灣泥鰍進行急性毒性試驗，用以評價4種常用藥物的安全質量濃度和毒性等級，以期達到稻鰍養殖模式中安全養殖臺灣泥鰍的目的。

1材料和方法

1.1材料

試驗所用臺灣泥鰍取自濟寧大啟發泥鰍養殖專業合作社，選取體質健康、無病無傷、規格一致的臺灣泥鰍幼魚進行試驗。泥鰍體長為（14.4±1.1） cm，體質量為（16.2±0.6） g。試驗前，將臺灣泥鰍置玻璃鋼水池中暫養一周，暫養水為地下深井水，充氣泵充氣，水溫23～28 ℃，每天上午投食1次臺灣泥鰍專用配合飼料（蛋白含量36%），以飽食為準（80%個體離開投餌區），于試驗開始前24 h停止投食。

試驗所用藥物分別為稻田用殺蟲劑：虱螨脲和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（以下簡稱甲維鹽）;除草劑：氰氟草酯和五氟磺草胺，均購買自濟寧當地的農藥商店，具體規格和生產廠家見表1。試驗藥液配置方法為先配成一定濃度的母液，再根據試驗需要，逐步按比例用水稀釋成試驗所需濃度藥液，所有藥液現用現配。

1.2試驗條件

試驗用水為地下深井水，經曝氣后，加入規格為60 cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱中，每箱加水30 L，水溫（25.3±2.4）℃，pH值為8.0±0.4，溶解氧（4.7±0.6）mg/L，水質符合漁業水質標準（GB 11607-1989）。每箱放入臺灣泥鰍10尾，每天測量1次水溫、pH值、溶解氧。

1.3試驗方法

試驗參考《水生生物毒性試驗方法》[12]，采用96 h靜水法，試驗期間保持充氧但不投餌。

1.3.1預試驗首先進行預試驗，確定最小全致死以及最大零致死濃度。試驗持續96 h，每天2次記錄各箱內臺灣泥鰍的死亡數量，及時撈出死魚。

1.3.2正式試驗根據預試驗結果，按照等對數間距設置5個濃度梯度組和1個空白對照組，每個質量濃度組設2個平行，由預試驗得到的4種藥物質量濃度見表2。將試驗藥液稀釋至設定濃度后，隨機撈取暫養的10尾臺灣泥鰍迅速放入各塑料箱中，所有試驗魚在30 min內完成分組。

試驗開始后分別于24 h、48 h、72 h和96 h觀察試驗魚的中毒反應和死亡情況，在試驗過程中及時撈出死亡個體，記錄其死亡時間。并計算各試驗組24 h、48 h、72 h和96 h的死亡率。對受試泥鰍的死亡判斷為呼吸停止，用鑷子夾住其尾部30 s后依然毫無反應[6]。

1.4數據處理

采用改良后的寇氏法[13-14]，進行急性毒性試驗的數據統計及計算，得出四種農藥對臺灣泥鰍的半致死濃度（LC50）以及安全濃度（SC）。計算公式如下：

lgLC50=Xm-i（Σp-0.5）???????????????????????? 式（1）

SC=LC50（48 h）×0.3/[LC50（24 h）/LC50（48 h）]2??????????????????????? 式（2）

式中：LC50為半致死質量濃度，mg/L;Xm為最大處理濃度的對數值;i為相鄰兩處理組濃度對數差值;∑p為各處理組死亡率總和;p為死亡率（以小數表示）。

2結果與分析

2.1試驗觀察結果

整個試驗過程中，對照組的臺灣泥鰍沒有發現死亡個體，即死亡率為0。四種藥物對臺灣泥鰍的急性毒性試驗結果見表3。

臺灣泥鰍在虱螨脲藥液中的中毒癥狀表現為：在低質量濃度虱螨脲藥液（500、609 mg/L）中起初無明顯中毒反應，隨后逐漸出現中毒癥狀，反應遲緩，身體逐漸失去平衡，最后死于塑料箱底。在高質量濃度組（741.3、903.6、1 100 mg/L）時，反應較為激烈，狂躁不安。死亡的臺灣泥鰍體色變淺、發白，魚體僵硬，體表黏液增多，當質量濃度為1 100 mg/L時，臺灣泥鰍約于4 h出現中毒癥狀，48 h死亡率達100%（表3）。

臺灣泥鰍在甲維鹽藥液中的中毒癥狀表現為：初期急劇狂游，并撞擊塑料箱，之后聚集于塑料箱一角，隨時間的延長，身體逐漸失去平衡，直至最后死亡。死亡后的魚體體表無潰瘍和腐爛，體色變白。試驗結果表明，臺灣泥鰍在低質量濃度（30 mg/L）試驗組中96 h的死亡率為20%，而在高質量濃度（180 mg/L）試驗組在24 h時死亡率為90%，而48 h和96 h時死亡率均為100%（表3）。

臺灣泥鰍在氰氟草酯藥液中的中毒癥狀表現為：反應激烈，竄游不安，頭部時常露出水面，初期能對外界環境刺激作出反應，后期逐漸出現中毒癥狀，身體失去平衡并沉于箱底。死亡魚體僵直，鰓蓋張開。結果表明，臺灣泥鰍在低濃度試驗組（20 mg/L）24 h死亡率為0，而在高質量濃度組（90 mg/L）的24 h、48 h死亡率分別為70%、80%，96 h死亡率為100%（表3）。

臺灣泥鰍在五氟磺草胺藥液中表現為：焦躁不安，來回游竄，不時把頭伸出水面游動，和在氰氟草酯中的中毒癥狀基本一致。死亡后的臺灣泥鰍魚體僵硬，體表一層白色黏液。當在低質量濃度組（20 mg/L）時，魚體24 h死亡率為0，而在高質量濃度試驗組（50 mg/L）48 h、96 h死亡率分別為60%和100%（表3）。

2.2半致死濃度和安全質量濃度

由式（1）和式（2）得到四種藥物的半致死質量濃度和安全質量濃度見表4。四種藥物的24 h、48 h、96 h半致死質量濃度均為24 h>48 h>96 h，四種農藥的半致死質量濃度由高到低依次為虱螨脲>甲維鹽>氰氟草酯>五氟磺草胺。四種藥物的安全質量濃度大小依次為虱螨脲（168.7 mg/L）>甲維鹽（12.3 mg/L）>氰氟草酯（11.0 mg/L）>五氟磺草胺（9.3 mg/L）。

3討論

3.1四種藥物對臺灣泥鰍的毒性評價

半致死質量濃度（LC50）用來衡量藥物對試驗魚毒性的大小，其值越小則藥物毒性越高，其值越大則藥物毒性越低[15-16]。以96 h為魚類急性毒性分級標準，分為極高毒（<1 mg/L）、高毒（1～10 mg/L）、中毒（>10～100 mg/L）、低毒（>100 mg/L）4個等級[17]。本試驗中四種藥物對臺灣泥鰍的96 h半致死質量濃度依次為虱螨脲>甲維鹽>五氟磺草胺>氰氟草酯，四種藥物對臺灣泥鰍的毒性大小依次為氰氟草酯>五氟磺草胺>甲維鹽>虱螨脲。試驗結果表明，甲維鹽、五氟磺草胺、氰氟草酯是中毒藥物，虱螨脲是低毒藥物。

稻田其他常用殺蟲劑主要有吡蟲啉、殺蟲單、毒死蜱、氯氰菊酯、溴氰菊酯、二硫代磷酸酯、高效氯氟氰菊酯等。已有研究結果表明：菊酯類農藥對魚類的安全濃度都比較小，氯氰菊酯對箭尾魚和羅非魚96 h的LC50分別為13.43 μg/L和3.82 μg/L，均為極高毒[11]。溴氰菊酯對箭尾魚和羅非魚96 h的LC50分別為6.81 μg/L和3.04 μg/L，均是高毒農藥[11];高效氯氟氰菊酯對大鱗副泥鰍的96 h的LC50為14.11 μg/L，毒性為極高毒[18];高效氯氰菊酯對泥鰍的24 h和48 h的LC50僅為0.8 μg/L和0.4μg/L[6]，泥鰍對這類農藥敏感，應避免在稻田使用。吡蟲啉和殺蟲丹對泥鰍96 h的LC50分別為 40.975、12.994 mg/L，均為高毒[8]，而毒死蜱對大鱗副泥鰍的96 h的LC50為193.20 μg/L ，毒性為極高毒[9]，二硫代磷酸酯對泥鰍屬于中毒[5];而本試驗所用兩種殺蟲劑虱螨脲和甲維鹽的96 h的LC50分別為712.7 mg/L和39.4 mg/L，毒性分級上屬于低毒和中毒，毒性均小于其他常用農藥。稻田常用除草劑對水產動物的毒性研究較少：其中，宋穩成等[19]的研究表明二氯喹啉酸對湘云鯽96 h的LC50為149.14 mg/L，屬于一種低毒農藥;邢躍楠等[5]的研究結果同樣表明二氯喹啉酸對泥鰍也是一種低毒農藥。很多研究結果表明丁草胺對魚類是一種高毒農藥，其中對泥鰍48 h的LC50為1.41 mg/L[5]，而對鮭、翻車魚、鯉、鯰和牙鲆96 h的LC50分別為：0.52、0.44、0.32、0.14 mg/L和0.002 mg/L，毒性均屬于極高毒[20]。而本試驗所用兩種除草劑五氟磺草胺和氰氟草酯96 h的LC50分別為25.2 mg/L和26.1 mg/L，屬于中等毒性的農藥。

四種農藥對臺灣泥鰍的半致死質量濃度呈24 h半致死質量濃度>48 h半致死質量濃度>96 h半致死質量濃度（表4），說明隨暴露時間的延長，四種農藥對臺灣泥鰍幼魚的毒性效應逐漸增加。

3.2四種藥物對臺灣泥鰍的用藥安全

虱螨脲為昆蟲的生長調節劑，有抑制幾丁質合成的作用，主要作用于昆蟲幼蟲，阻止幼蟲蛻皮過程，具有胃毒和觸殺作用，適用于防治對擬除蟲菊酯和有機磷等農藥產生抗性的害蟲，是當前農業害蟲綜合防治中的理想藥劑[21]。本試驗中，虱螨脲對臺灣泥鰍的安全質量濃度為168.7 mg/L，高于常用劑量，且其在毒性分級標準中屬于低毒，因此在臺灣泥鰍養殖過程中可采用該藥物進行水稻的病蟲害防治。

甲維鹽作為一種生物殺蟲殺螨劑，因其具有超高效、低毒、低殘留、無公害等特性，主要用于去除水產養殖生物中的寄生性橈足類以及多種農作物的害蟲。已有報道表明，甲維鹽能對蝦類、橈足類、魚類等多種海洋生物造成影響[22]。范仁俊等[23]評價了甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對斑馬魚的毒性和藥效。試驗表明，在96 h的試驗期間，斑馬魚游動減緩，側翻失衡，甲維鹽對斑馬魚的96 h半致死濃度為27.01 mg/L。本試驗中，甲維鹽對臺灣泥鰍的96 h半致死濃度為39.4 mg/L，安全質量濃度為12.3 mg/L，其在毒性分級標準中屬于中毒，因此在臺灣泥鰍養殖過程中該藥物應慎用。由于生產中水稻田噴灑劑量為330～390 mL/hm2，劑量遠低于該安全質量濃度，因此，該殺蟲劑可限量地用于水稻田病蟲害防治。

氰氟草酯又名千金，最早由美國陶氏公司開發研制，屬芳氧苯氧基丙酸酯類除草劑，是唯一對水稻具有高度安全性的品種，具有高效的內吸傳導作用，在國內外應用相當廣泛。朱麗珍[24]對斑馬魚的毒性試驗表明，氰氟草酯對斑馬魚成魚的96 h半致死濃度為4.05 mg/L，對斑馬魚成魚的急性毒性屬于中毒。本試驗中，氰氟草酯對臺灣泥鰍的安全質量濃度為11.0 mg/L，其在毒性分級標準中也是屬于中等毒性藥物，但是生產中一般常用劑量為750～1 050 mL/hm2，遠低于該安全濃度，該除草劑可限量地用于水稻田除草。

五氟磺草胺是由美國陶農科公司（Dow Agro Sciences）所開發的一種三唑并嘧啶磺酰胺除草劑，在芽前使用，并通過抑制乙酰乳酸合成酶（ALS）而起作用，具有廣譜性，可有效除去稻田中的多種雜草。亓蒙[25]研究了四種農藥對泥鰍和大鱗副泥鰍的毒性，結果表明，五氟磺草胺對泥鰍的96 h半致死濃度為26.993 9 mg/L，安全濃度為8.246 7 mg/L;對大鱗副泥鰍的96 h半致死濃度為28.964 1 mg/L，安全濃度為9.400 1 mg/L，大鱗副泥鰍對藥物的耐受性略高于泥鰍。本試驗中，五氟磺草胺對臺灣泥鰍的96 h半致死濃度為25.2 mg/L，安全質量濃度為9.3 mg/L，96 h半致死濃度略低于泥鰍和大鱗副泥鰍，但是安全濃度略高于泥鰍，低于大鱗副泥鰍。從毒性分級標準上看屬于中等毒性。因生產中一般常用劑量為495～1 500 mL/hm2，遠低于該安全濃度，因此，該除草劑可限量地用于水稻田除草。

參考文獻：

[1] 李艷華，胡佳.如何看待當前臺灣泥鰍的繁養殖熱潮[J].科學養魚，2016（3）：4-5.

[2] 戴璐怡.大鱗副泥鰍和臺灣泥鰍的形態學研究和線粒體基因組全序列分析[D].舟山：浙江海洋學院，2015.

[3] 邱楚雯，王韓信，陳迪虎，等.臺灣泥鰍人工繁殖及早期發育的研究[J].水產科技情報，2014，41（6）：284-289.

[4] 王祖峰.發展稻漁綜合種養打造綠色生態循環農業典范[J].中國水產，2018（9）：43-45.

[5] 邢躍楠，胡建民，趙鑒，等.4種稻田常用農藥對泥鰍的急性毒性研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫，2012（12）：142-143.

[6] 江輝，陳開健，劉建波，等.4種農藥對泥鰍的急性毒性及敏感性研究[J].水利漁業，2005，25（2）：74-78.

[7] 于淑池，郭雯雅.精喹草除靈對泥鰍的急性毒性及血清同工酶的影響[J].水生態學雜志，2013，34（5）：82-86.

[8] 朱元宏，李平，薛建德.吡蟲啉和殺蟲單對泥鰍的急性毒性效應研究[J].科學養魚，2016（1）：54-56.

[9] 夏曉華，張林霞，趙炫超，等.毒死蜱對大鱗副泥鰍的急性毒性和生理毒性研究[J].湖北農業科學，2013，52（9）：2116-2118.

[10] 張彎彎，賈永芳，梁婷婷，等.4 種農藥對黃河鯉胚胎和仔魚的急性毒性研究[J].河南農業科學，2016，45（9）：135-139

[11] 龐世勛，魏泰莉，賴子尼，等.三種菊酯類農藥對劍尾魚、羅非魚的毒性研究[J].淡水漁業，2004，34（4）：15-16

[12] 周永欣，章宗涉.水生生物毒性試驗方法[M].北京：農業出版社，1989.

[13] 張毓琪，陳敘龍.環境生物毒理學[M].天津：天津大學出版社，1993：257-258.

[14] 惠秀娟.環境毒理學[M].北京：化學工業出版社，2003：270-271.

[15] 李代金，黃輝，譚德清.6種常用漁藥對厚頜魴魚苗的急性毒性試驗[J].水生態學雜志，2009，2（6）：25-29.

[16] 中國獸醫協會.2011年執業獸醫資格考試應試指南（水生動物類）[M].北京：中國農業出版社，2011：282-301.

[17] 國家環境保護總局編.水和廢水監測分析方法[M].4版.北京：中國環境科學出版社，2006：777-781.

[18] 張林霞，夏曉華.高效氯氟氰菊酯對大鱗副泥鰍急性毒性和生理毒性的影響[J].四川動物，2013，32（4）：560-567.

[19] 宋穩成，楊仁斌，郭正元，等.二氯喹啉酸對湘云鯽的急性毒性及對魚鰓、肝臟ATP酶活性的影響[J].農村生態環境，2002，18（2）：44-46.

[20] 殷立成，郭華榮，張士璀，等.利用牙鲆和牙鲆鰓細胞（ FG）檢測除草劑丁草胺的急性毒性和遺傳毒性[J].中國海洋大學學報（自然科學版），2007（37）：167-171.

[21] 宋國春，于建壘，李瑞娟，等.虱螨脲在甘藍和土壤中的殘留及安全性評價[J].江蘇農業科學，2013，41（11）：334-335.

[22] 潘潔紅，劉光興.甲維鹽對安氏偽鏢水蚤（Pseudodiaptomus annandalei）攝食、呼吸、發育和生殖的影響[J].海洋與湖沼，2019，50（1）：181-187.

[23] 范仁俊，王振，張潤祥，等.甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑安全性研究[J].農業技術與裝備，2001（1B）：51-53.

[24] 朱麗珍.兩種芳氧苯氧基丙酸酯類除草劑對斑馬魚毒性效應及作用機制研究[D].北京：中國農業大學，2016：12-15.

[25] 亓蒙.四種水稻除草劑對兩種泥鰍的毒性效應[D].新鄉：河南師范大學，2015.

Acute toxicity of pesticides in rice field to Paramisgurnus dabryanus spp.

LIU Yuqing， WANG Junpeng， JIANG Chuanlan，CHENG Huizhong， ZHANG Longgang， YANG Ling

（Shandong Freshwater Fisheries Research Institute，Shandong Provincial Key Laboratory of Freshwater Genetics and Breeding，Jinan 250117，China）

Abstract：The acute toxicity of four pesticides （lufenuron，emamectin benzoate，cyhalofop-butyl and penoxsulam）to Paramisgurnus dabryanus spp. with body weight of （16.2±0.6）g were studied at water temperature of （25.3±2.4）℃ by? hydrostatic test method.The results showed that the LC50（96 h）and the SC of lufenuron，emamectin benzoate，cyhalofop-butyl and penoxsulam in Paramisgurnus dabryanus spp. were（712.7 mg/L，168.7 mg/L），（39.4 mg/L，12.3 mg/L），（26.1 mg/L，11.0 mg/L） and （25.2 mg/L，9.3 mg/L）respectively. The toxicity of the four pesticides with order as penoxsulam>cyhalofop-butyl >emamectin benzoate>lufenuron.According to the results，the four chemicals were safe in rice disease control.

Key words：Paramisgurnus dabryanus spp.;acute toxicity;median-lethal concentration;safe concentration

（收稿日期：2021-03-30）