免疫熒光法在微生物快速檢驗中的應用研究

劉占剛

聊城臨清市人民醫院,山東 聊城 252600

免疫熒光技術是指應用將抗原和抗體相結合的生物反應與形態學相結合的原理,把血清學特異性、熒光色素的敏感性和顯微鏡檢查法融為一體。在采用這種檢測方法中有檢測速度快優點，同時還有靈敏度高和特異性強的優點，可以應用在醫療的診斷中。特別是在目前的上呼吸道感染病毒檢測，該種感染是由多種病毒感染引起，為了幫助患者采用針對性治療方法，需要使用準確的診斷手段。而采用免疫熒光法診斷，可以實現對多種類病毒診斷，以此來確定患者病癥感染的來源?；诖?，本組研究上呼吸道感染患者中采用免疫熒光法檢測，觀察免疫熒光法檢測效果[1]。

1 一般資料與方法

1.1一般資料 將我院在2019年1月--2019年12月收治的220例上呼吸道感染患者作為觀察對象，患者總共病毒感染有193例，其中男性患者124例，女94例，平均年齡在49.93±7.15歲?；颊卟“Y類型中，咽部感染患者有119例，鼻部感染患者101例。

1.2研究方法

1.2.1檢測試劑 在本次檢測中總共使用了5種檢測試劑，其中有流感病毒A檢測試劑，流感病毒B檢測試劑；副流感病毒檢測試劑；還有兩種檢測試劑分別是合胞病毒檢測試劑與腺病毒檢測試劑[2]。

1.2.2檢測方法 樣本的收集和處理：

(1)用吸附劑1:10稀釋患者樣本,離心5分鐘(2000rpm，室溫)。(2)將加樣板放在泡沫板上，按順序分別滴加30μl稀釋后血清至加樣板的每一反應區，避免產生氣泡。(3)將載片覆有生物薄片的一面朝下，蓋在加樣板的凹槽里，反應立即開始。確保每一樣品均與生物薄片接觸且樣品間互不接觸。室溫(18-25°C)溫育30分鐘。(4)用燒杯盛PBS吐溫緩沖液流水沖洗載片，然后立即將其浸入裝有PBS吐溫緩沖液的洗杯中浸泡至少5分鐘。(5)滴加25μl FITC標記的抗人球蛋白(熒光二抗)至潔凈加樣板的反應區，完全加完所有的熒光二抗方可進行下一步室溫(18-25°C)溫育30分鐘。(6)用燒杯盛PBS吐溫緩沖液流水沖洗載片，然后立即將其浸入裝有PBS吐溫緩沖液的洗杯中浸洗至少5分鐘。(7)將蓋玻片直接放在泡沫板的凹槽里。滴加甘油/PBS至蓋玻片：每一反應區約10μl。從PBS吐溫緩沖液中取出一張載片，用吸水紙擦干背面和邊緣的水分，注意不要擦拭反應區間隙。將載片覆有生物薄片的一面朝下放在已準備好的蓋玻片上，立即查看并輕輕調整使蓋玻片嵌入到載片的凹槽里。

結果判讀：

顯微鏡下觀察熒光模型。觀察感染細胞用20×物鏡，觀察細胞基質用40×物鏡。

激發濾片：488nm，分光濾鏡：510nm，阻擋濾鏡：520nm。光源：100W汞燈。

2 結 果

對220例上呼吸道患者檢查中，病毒性感染陽性患者193例，感染率為87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率為37.30%，其次是腺病毒，感染率為26.94%，再次是副流感病毒，感染率為21.76%，最后是合胞病毒，感染率為13.98%。

表1 對193例上呼吸道感染病毒種類統計

3 討 論

隨著人們的生活環境改變，容易導致上呼吸道感染病癥的發生。上呼吸道感染病癥發生后，如果為細菌性感染，或者是病毒性感染，這些感染都會有一定的傳播性，引起大面積群體性病癥。對于上呼吸道感染病癥傳染控制中，需要對患者病癥原因進行診斷，并且采用針對性方法避免，以此來減少傳播性。在目前的上呼吸道感染病癥診斷中，主要使用免疫熒光檢測方法，該種方法其診斷準確率高，可以實現對診斷后，采用不同方法治療病毒感染引起的上呼吸道病癥。而且隨著免疫熒光檢測方法的不斷應用，臨床上檢測人員需要不斷研究該種方法，使其更好的在檢測臨床上使用，以此來提高臨床檢查效果[3]。

在本組研究中，采用免疫熒光法檢測上呼吸道病毒感染患者，對220例上呼吸道患者檢查中，病毒性感染陽性患者193例，感染率為87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率為37.30%，其次是腺病毒，感染率為26.94%，再次是副流感病毒，感染率為21.76%，最后是合胞病毒，感染率為13.98%。從上述的數據中分析采用免疫熒光檢測方法，可以對上呼吸道感染多種病毒進行有效檢測，以便對病毒性感染的種類進行區分。在采用免疫熒光檢測上呼吸道感染病癥中，不僅僅有著檢測正確率高的優點。該種檢查方法還有著操作簡單優點，基本上可以在基層醫院開展檢查，只需要對操作人員進行簡單的培訓，就可以開展檢測工作。同時采用免疫熒光檢測方法，還有檢測費用低廉優點，可以在臨床上普遍使用。最后是免疫熒光檢測方法的速度快，一般開展檢查工作有兩個小時能夠完成確診，減少患者等待確診時間，也減少患者對病癥的影響，提高上呼吸道感染患者治療效果。

綜上所述，在上呼吸道感染診斷中，由于免疫熒光檢測方法應用多年，有著成熟的技術，并且在臨床上使用證明，該種檢查正確率高，操作簡單和診斷速度快，可以在上呼吸道感染病癥檢測中應用免疫熒光法，以此來提高檢測效果。