張華崇 趙樹琪 閆振華 黃曉莉 戴寶生 李蔚
摘要 赤霉病是小麥主要病害之一,對小麥生產和食品安全構成了嚴重威脅。綜述了小麥赤霉病防控技術的主要研究進展,包括選育抗病品種、化學防控技術和生物防治技術等,旨在為小麥赤霉病的防控提供依據。
關鍵詞 小麥;赤霉病;防控技術;進展
中圖分類號 S435.121.4+5? 文獻標識碼 A
文章編號 0517-6611(2021)11-0020-03
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.11.006
開放科學(資源服務)標識碼(OSID):
Research Progress on the Prevention and Control Technologies of Wheat Scab
ZHANG Hua-chong,ZHAO Shu-qi,YAN Zhen-hua et al
(Huanggang Academy of Agricultural Sciences,Huanggang,Hubei 438000)
Abstract Wheat scab caused by Fusarium graminearum is one of the main diseases of wheat,which poses a serious threat to wheat production and food safety.Main research progresses on the prevention and control technologies on wheat scab were reviewed,including the selection of disease-resistant varieties,chemical control and biological control technologies,in order to provide the basis for the prevention and control of wheat scab.
Key words Wheat;Scab;Prevention and control technology;Progress
赤霉病(fusarium head blight,FHB)是小麥生產中主要的病害之一,對小麥的高產穩產有不利影響,且發病后產生的多種毒素可引起人畜食用后中毒,嚴重威脅食品安全[1]。我國引起小麥赤霉病的病原菌主要是禾谷鐮孢菌[2],主要為害穗部,造成穗腐。在大流行時病穗率為50%~100%,會導致小麥減產10%~40%;中流行時病穗率為30%~50%,會導致小麥減產5%~15%[3]。據統計,2019年小麥赤霉病的發生面積0.1億hm2,近年來在我國逐漸由長江中下游地區向黃淮麥區蔓延。近年來,許多學者采用不同方法防控小麥赤霉病的發生,對病害防控工作開展了大量研究。筆者從選育抗病品種、化學防控技術和生物防治技術等方面綜述了小麥赤霉病的防控技術研究進展。
1 選育抗病品種
抗病品種在小麥赤霉病防治中是最經濟、有效的措施,發掘赤霉病抗原是培育抗病品種的首要工作。20世紀70年代中期成立的全國性小麥赤霉病研究協作組,經鑒定發現了蘇麥3號、望水白2個高抗且抗性穩定的普通小麥種質資源[4]。近年來,許多學者對我國小麥品種進行了抗赤霉病鑒定,發現來自長江中下游地區的小麥品種抗性最強,其次是長江上游地區,而黃淮地區小麥品種的赤霉病抗性最弱,小麥品種赤霉病抗性僅達到中抗水平,抗性普遍較差,且還未發現對赤霉病免疫的品種[5-10]。
鑒于此,育種專家們開始擴大赤霉病抗原的篩選范圍,發現在小麥近緣種屬中鵝觀草屬、賴草屬、黑麥屬和偃麥草屬等存在一些抗赤霉病種質資源,并成功創制了一批抗赤霉病材料。吳麗芳等[11]通過對普通小麥品種中國春與高鵝觀草雜種回交后代BC2F2-5和BC3F1-4的抗病分析,發現其具有較好的赤霉病抗性。陳佩度等[12]將大賴草抗性導入普通小麥中國春中,對其后代進行了赤霉病抗性鑒定,獲得了一批抗性強于蘇麥3號的材料。周建平[13]用小麥-黑麥單體附加系的染色體工程方法創制并選育出小麥品系R111,進行抗病鑒定,結果表明品系R111具有穩定的、比蘇麥3號更好的赤霉病抗性,且遺傳穩定。陳士強等[14]連續2年于開花期采用單花滴注法對31份中國春-長穗偃麥草的1E和7E染色體附加系和置換系進行了穗部接種抗病鑒定,發現病小穗率均較低。Wang等[15]克隆了來源于長穗偃麥草抗性主效基因Fhb7,并轉移至小麥品種,抗病鑒定發現該基因不僅具有穩定的赤霉病抗性,而且具有廣譜的解毒功能。以上研究表明,可以通過遠緣雜交將小麥近緣種中抗性轉移至普通小麥,創制出抗赤霉病新材料。
近年來,隨著分子生物學的發展,國內外學者發現了抗赤霉病主效基因Fhb1-7,并對其進行了精細定位[16-24],其中Fhb1已被證實是抗性最強且穩定的抗赤霉病基因。朱展望等[25]對229 份小麥品種(系)Fhb1進行溯源分析,結果發現中國小麥品種所含Fhb1 至少有2個來源,分別為蘇麥3號和寧麥9號。張宏軍等[26]利用6個攜帶Fhb1基因的品種(系)分別與高感赤霉病的周麥16矮敗小麥近等基因系雜交和回交,對構建的6個回交群體進行抗赤霉病鑒定,發現攜帶Fhb1基因家系整體抗性達到中感。周淼平等[27]將小麥赤霉病抗原蘇麥3號抗病主效QTL導入小麥品種濟麥22,創制了含蘇麥3號抗赤霉病主效QTL的材料18份,其中4份材料的赤霉病抗性明顯提高。此外,一些學者還開展了抗赤霉病QTL的聚合育種工作。許峰等[28]將抗病主效基因Fhb1、Fhb2、Fhb4和Fhb5導入感病品種矮抗58中,Fhb1、Fhb2、Fhb4和Fhb5聚合后,后代綜合抗性比單個基因更明顯。Miedaner等[29]在性狀優良的德國春小麥品種中導入來自CM-82036(蘇麥3號/Thornbird)的2個抗赤霉病QTL,發現后代有明顯抗性。小麥赤霉病抗性是受多基因控制的數量性狀,而抗性鑒定受外界環境的影響較大,且抗原來源還比較狹窄,因此利用分子技術改良小麥抗性比較可行。因此,今后要在傳統育種的基礎上,綜合運用分子技術來提高小麥的赤霉病抗性。
2 化學防控技術
化學防控仍然是目前防治小麥赤霉病的主要手段。多菌靈等苯丙咪唑類藥劑長期以來在防治小麥赤霉病方面發揮著重要的作用,但長期使用單一藥劑容易導致病原菌抗藥性增強。王建新等[30]于1986—2001年監測了浙江省、江蘇省、上海市和湖北省13個縣(市)共194 91個小麥赤霉病菌株對多菌靈的抗藥性,結果發現小麥赤霉病菌群體中存在不同比例的抗藥性菌株;吳佳文等[31]于2012—2018年監測了江蘇省不同地區小麥赤霉病病菌菌株對多菌靈的抗藥性頻率,結果顯示小麥赤霉病病菌抗藥性頻率呈上升趨勢。
戊唑醇及其復配劑對小麥赤霉病具有很好的防治效果。何慶等[32]于2019年開展了不同時期噴施30%唑醚·戊唑醇懸浮劑的試驗,結果表明其對小麥病穗和病粒的防治效果均在80%以上;王夏軍[33]采用 15% 井岡·戊唑醇懸浮劑對小麥赤霉病開展田間藥效試驗,結果表明在小麥赤霉病重發態勢下,在小麥齊穗期和齊穗后7 d各預防1次,對赤霉病的防效達88.22%。張舟娜等[34]對30% 戊唑醇·福美雙懸浮劑、48%氰烯菌酯·戊唑醇懸浮劑和45%戊唑醇·咪鮮胺可濕性粉劑進行田間防效試驗,結果顯示3種戊唑醇復配劑對小麥赤霉病的病指防效均在70% 以上,增產效果也明顯優于多菌靈。430 g/L戊唑醇懸浮劑(SC)+25%氰烯菌酯SC和430 g/L戊唑醇SC+50%多菌靈可濕性粉劑(WP)噴霧處理對小麥赤霉病的防效分別為82.80%和79.07%[35]。
此外,1998年江蘇省農藥研究所研制并合成了鐮刀菌屬專化型殺菌劑氰烯菌酯,其在小麥赤霉病防治上發揮重要的作用。高攀等[36]開展了25%氰烯菌酯SC防治小麥赤霉病的田間藥效試驗,結果發現25%氰烯菌酯SC 1 500~3 000 g/hm2對小麥赤霉病的防治效果良好,病指防效在76%以上,顯著高于藥劑70%甲基硫菌靈WP和80%多菌靈WP的病指防效;孫友武等[37]的試驗也得到類似的結果,25%氰烯菌酯懸浮劑1 500 mL/hm2對小麥赤霉病的防治效果達79.6%;刁亞梅等[38]于2010年在江蘇省進行了25%氰烯菌酯懸浮劑防治小麥赤霉病的大田示范試驗,結果顯示25%氰烯菌酯懸浮劑1 500~2 250 g/hm2對小麥赤霉病的防治效果為80.10%~98.28%,均高于40%多菌靈懸浮劑1 500 g/hm2處理;韋偉等[39]比較了幾種主要殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果,結果顯示25%氰烯菌酯SC 2 250 mL/hm2的病指防效最高,達到81.16%。
丙硫菌唑因其廣譜殺菌特性,被廣泛應用于防治小麥病害,采用田間藥效試驗方法,30%丙硫菌唑675 mL/hm2 2次用藥防效可達92%[34];分別用濃度375、450和525 g/hm2 480 g/L丙硫菌唑懸浮劑處理小麥,結果顯示赤霉病的病指防效分別達到93.62%、94.95%和95.74%,防治效果明顯[40];丙硫菌唑溶解性好,葉片附著性強,可作為飛防藥劑,研究顯示30%丙硫菌唑油基懸浮劑(OD)600 g/hm2和75%丙硫菌唑干懸浮劑(DF)300 g/hm2對小麥赤霉的防效分別為90.91%和93.07%,明顯高于40%多菌靈SC 1 875 g/hm2[41]。
先正達公司最新研制的新型吡啶酰胺類殺菌劑氟唑菌酰羥胺對禾谷鐮孢菌表現出較高的室內活性且田間小麥赤霉病防效較好,可考慮用其作為禾谷鐮孢菌對多菌靈抗性治理的替代藥劑[42]。1 050 mL/hm2氟唑菌酰羥胺處理對小麥赤霉病的防效在80%以上[43];200 g/L氟唑菌酰羥胺SC在小麥揚花期用藥2次,結果發現它不僅能夠有效防治小麥赤霉病,而且對小麥白粉病也具有很好的防治效果[44]。
3 生物防治技術
利用有益微生物防治小麥赤霉病,有利于病害的可持續控制,具有良好的應用前景。國內外相關研究已取得很大的進展。目前具有防治小麥赤霉病功效的生防菌涵蓋了細菌和真菌等多個種屬。陳小潔等[45]從杜仲中分離出104株內生細菌,對其進行拮抗細菌的篩選和鑒定,結果發現芽孢桿菌DZSG23對小麥赤霉菌具有較好的抑菌效果,抑制率達到69.04%。余桂容等[46]從小麥葉片和穗部分離出對小麥赤霉病菌具有強拮抗作用的芽孢桿菌菌株B4和B6,對小麥赤霉病的相對防效分別達 68.4%和68.9%。劉偉成等[47]分離出8株來自中國東北嫩江小麥赤霉病流行地區小麥植株葉面和穗部的具拮抗作用的芽孢桿菌,活體菌懸浮液和滅菌后的發酵液田間防效為59.5%~65.9%,且其發酵液熱穩定性好。楊洪鳳等[48]從樟樹健康葉片中分離獲得了內生細菌解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens CC09),發酵液灌根處理小麥,對小麥赤霉病的防效高達90.7%。李正輝等[49]在川麥107分離鏈霉菌屬L16菌株,其對小麥赤霉病菌、番茄灰霉病菌、油菜菌核病菌和炭疽病菌等都具有拮抗作用,其發酵液在室外條件下仍保持良好的抑菌活性。管章玲等[50]從多種植物體內及其根表土壤中分離出具拮抗效果的5株放線菌菌株NS-QCT、NS-GWCG-X、N-WM-G、N-BoCY26和N-LJG2,溫室盆栽試驗發現菌株NS-QCT對赤霉病菌具有明顯的抑制作用。
翟梅枝等[51]從核桃和黑核桃莖、葉和青皮中篩選到60株真菌,對小麥赤霉病菌具有抑制作用的有51株;Khan等[52]發現從小麥花藥上分離的1株隱球酵母(Cryptococcus)菌株OH182.9對赤霉病菌具有抑制作用,抑菌率高于770%;Dal Bello等[53]從小麥根際篩選出52株細菌和6株木霉屬菌株(Trichoderma spp.),其對小麥赤霉病菌均具有防治作用,其中1株哈茨木霉對赤霉病菌具有較強的抑制作用。
4 討論
小麥赤霉病是世界范圍內廣泛流行的小麥病害,近年來由于全球氣候變暖和耕作方式的變化,每年受赤霉病危害的麥區逐漸擴大,同時小麥赤霉病的流行頻率也逐漸增加,也增加了病害的防治難度。目前病害防治堅持“預防為主,綜合防治”方針,要嚴密關注麥區的天氣變化情況,明確重點防控區域、關鍵防治田塊和最佳防控時間,準確發布預報預警信息,做好病害預測和預防工作。在小麥赤霉病的防治中,以選育抗病品種為基礎,綜合化學藥劑和生物防治等措施。目前,我國小麥品種抗性普遍較差,還未發現對赤霉病免疫的品種,雖然在小麥近緣種屬發現一些抗病種質資源,但被育種利用的抗赤霉病小麥種質材料還較少,且赤霉病抗性好的材料大多有高稈、晚熟、穗小等不良農藝性狀,因此還需要進一步擴大抗病材料的篩選范圍。近年來,通過分子技術定位了7個抗赤霉病主效基因,利用分子技術將主效基因導入小麥中,獲得了一批抗病性改良材料。因此,利用分子技術與傳統育種相結合的育種手段,將在今后小麥抗病育種中發揮重要作用。化學防治主要選用氰烯菌酯、戊唑醇、丙硫菌唑和氟唑菌酰羥胺等藥劑及其復配制劑,堅持適期用藥,重視交替使用不同作用機理的藥劑,延緩病菌抗藥性的產生,但化學藥劑的長期使用存在污染環境的風險,尋找新的病害防治技術和手段已經成為迫切需求。利用生防菌防治小麥赤霉病的措施越來越受到重視,雖然已有研究從多種植物或土壤中分離篩選出可有效防治小麥赤霉病的生防菌,但生防菌存在對施藥環境要求高、藥效穩定性差等問題,更早地研制開發出環境友好、高效穩定、多功能的生防菌對于最終有效控制小麥赤霉病的發生與持續流行發揮著重要作用。
參考文獻
[1]BAI G H,PLATTNER R,DESJARDINS A,et al.Resistance to Fusarium head blight and deoxynivalenol accumulation in wheat[J].Plant breeding,2001,120(1):1-6.
[2] 全國小麥赤霉病研究協作組.我國小麥赤霉病穗部鐮刀菌種類、分布及致病性[J].上海師范學院學報,1984,13(3):69-82.
[3] 張潔,伊艷杰,王金水,等.小麥赤霉病的防治技術研究進展[J].中國植保導刊,2014,34(1):24-28,53.
[4] 陸維忠,程順和,王裕中.小麥赤霉病研究[M].北京:科學出版社,2001:78-170.
[5]李娟,王文立,王峭,等.2009-2018年陜西省小麥區試品種(系)抗主要病害趨勢分析[J].麥類作物學報,2019,39(12):1443-1449.
[6] 張彬,李金秀,王震,等.黃淮南片麥區主栽小麥品種對赤霉病抗性分析[J].植物保護,2018,44(2):190-194,198.
[7] 王震,李金秀,張彬,等.河南省大面積種植小麥品種赤霉病抗性鑒定及品質分析[J].河南農業科學,2018,47(4):64-70.
[8] 朱展望,楊立軍,佟漢文,等.湖北省小麥品種(系)的赤霉病抗性分析[J].麥類作物學報,2014,34(1):137-142.
[9] 朱展望,朱偉偉,佟漢文,等.湖北小麥品種赤霉病抗性及其在生產中的應用[J].麥類作物學報,2015,35(12):1733-1738.
[10] 閆震,張昊,VANDER LEE T A J,等.中國不同生態區129個小麥品種赤霉病抗性與毒素積累[C]//中國植物保護學會.中國植物保護學會2019年學術年會論文集.北京:中國農業科學技術出版社,2019:42.
[11] 吳麗芳,汪杏芬,翁益群,等.普通小麥與鵝觀草雜種回交后代的赤霉病抗性及細胞遺傳學研究[J].安徽農業科學,1997,25(1):7-10.
[12] 陳佩度,王兆悌,王蘇玲,等.將大賴草種質轉移給普通小麥的研究Ⅲ.抗赤霉病異附加系選育[J].遺傳學報,1995,22(3):206-210.
[13] 周建平.攜載抗赤霉病基因的小麥-黑麥小片段易位的分子細胞學檢測[D].雅安:四川農業大學,2004.
[14] 陳士強,黃澤峰,張勇,等.中國春背景下長穗偃麥草抗赤霉病相關基因的染色體定位[J].麥類作物學報,2012,32(5):839-845.
[15] WANG H W,SUN S L,GE W Y,et al.Horizontal gene transfer of Fhb7 from fungus underlies Fusarium head blight resistance in wheat[J].Science,2020,368(6493):1-7.
[16] WALDRON B L,MORENO-SEVILLA B,ANDERSON J A,et al.RFLP mapping of QTL for Fusarium head blight resistance in wheat[J].Crop science,1999,39(3):805-811.
[17] 郜忠霞.小麥抗赤霉病主效基因Fhb1的精細定位[D].南京:南京農業大學,2013.
[18] LIU S Y,ANDERSON J A.Targeted molecular mapping of a major wheat QTL for Fusarium head blight resistance using wheat ESTs and synteny with rice[J].Genome,2003,46(5):817-823.
[19] CUTHBERT P A,SOMERS D J,BRUL-BABEL A.Mapping of Fhb2 on chromosome 6BS:A gene controlling Fusarium head blight field resistance in bread wheat(Triticum aestivum L.)[J].Theoretical and applied genetics,2007,114(3):429-437.
[20] QI L L,PUMPHREY M O,FRIEBE B,et al.Molecular cytogenetic characterization of alien introgressions with gene Fhb3 for resistance to Fusarium head blight disease of wheat[J].Theoretical and applied genetics,2008,117(7):1155-1166.
[21] XUE S L,LI G Q,JIA H Y,et al.Fine mapping Fhb4,a major QTL conditioning resistance to Fusarium infection in bread wheat(Triticum aestivum L.)[J].Theoretical and applied genetics,2010,121(1):147-156.
[22] XUE S L,XU F,TANG M Z,et al.Precise mapping Fhb5,a major QTL conditioning resistance to Fusarium infection in bread wheat(Triticum aestivum L.)[J].Theoretical and applied genetics,2011,123(6):1055-1063.
[23] CAINONG J C,BOCKUS W W,FENG Y,et al.Chromosome engineering,mapping,and transferring of resistance to Fusarium head blight disease from Elymus tsukushiensis into wheat[J].Theoretical and applied genetics,2015,128(6):1019-1027.
[24] GUO J,ZHANG X L,HOU Y L,et al.High-density mapping of the major FHB resistance gene Fhb7 derived from Thinopyrum ponticum and its pyramiding with Fhb1 by marker-assisted selection[J].Theoretical and applied genetics,2015,128(11):2301-2316.
[25] 朱展望,徐登安,程順和,等.中國小麥品種抗赤霉病基因 Fhb1 的鑒定與溯源[J].作物學報,2018,44(4):473-482.
[26] 張宏軍,宿振起,柏貴華,等.利用 Fhb1 基因功能標記選擇提高黃淮冬麥區小麥品種對赤霉病的抗性[J].作物學報,2018,44(4):505-511.
[27] 周淼平,姚金保,張平平,等.黃淮麥區小麥抗赤霉病新種質的創制和篩選[J].麥類作物學報,2018,38(3):268-274.
[28] 許峰,李文陽,閆素輝,等.小麥抗赤霉病主效QTL的聚合效應分析[J].麥類作物學報,2017,37(5):585-593.
[29] MIEDANER T,WILDE F,STEINER B,et al.Stacking quantitative trait loci(QTL) for Fusarium head blight resistance from non-adapted sources in an European elite spring wheat background and assessing their effects on deoxynivalenol(DON) content and disease severity[J].Theoretical and applied genetics,2006,112(3):562-569.
[30] 王建新,周明國,陸悅健,等.小麥赤霉病菌抗藥性群體動態及其治理藥劑[J].南京農業大學學報,2002,25(1):43-47.
[31] 吳佳文,楊榮明,楊紅福,等.江蘇省小麥赤霉病病菌對多菌靈抗藥性發展及其治理對策研究[J].中國植保導刊,2019,39(12):51-54,78.
[32] 何慶,田坤發.30%唑醚·戊唑醇懸浮劑不同時期預防小麥赤霉病效果研究[J].現代農業科技,2020(7):104,106.
[33] 王夏軍.15%井岡·戊唑醇懸浮劑控制小麥赤霉病田間藥效試驗[J].現代農業科技,2020(7):112,114.
[34] 張舟娜,李阿根.4種殺菌劑不同施藥時間對小麥赤霉病的防效[J].浙江農業科學,2020,61(3):478-480,483.
[35] 范志業,曹永周,沈海龍,等.不同殺菌劑對小麥葉銹病和赤霉病的防治效果比較[J].農藥,2020,59(2):140-142.
[36] 高攀,王濤,李婷.25%氰烯菌酯SC防治小麥赤霉病田間藥效試驗[J].現代農藥,2018,17(6):52-53.
[37] 孫友武,蔣山,高礦.25%氰烯菌酯懸浮劑防治小麥赤霉病大田示范[J].安徽農學通報,2013,19(9):93,150.
[38] 刁亞梅,陳培紅,許德華,等.25%氰烯菌酯懸浮劑防治小麥赤霉病大田示范試驗[J].現代農藥,2012,11(3):44-46,50.
[39] 韋偉,夏海生,孫善教,等.幾種主要殺菌劑對小麥赤霉病防治效果比較[J].安徽農學通報,2018,24(11):58-59.
[40] 施坤,石洲云.多種藥劑防治小麥赤霉病田間藥效試驗[J].安徽農學通報,2020,26(4):94-95.
[41] 王維國,尹維松,馮曉霞,等.丙硫菌唑對小麥赤霉病的田間防效試驗[J].安徽農學通報,2019,25(19):63-64.
[42] 向禮波,楊立軍,薛敏峰,等.禾谷鐮孢菌對氟唑菌酰羥胺敏感性基線的建立及藥劑田間防效[J].農藥學學報,2018,20(4):445-451.
[43] 張倩倩,許甫金,楊永明,等.氟唑菌酰羥胺防治小麥赤霉病試驗[J].浙江農業科學,2020,61(3):414-415.
[44] 楊美,王同歲,唐興龍.200g/L氟唑菌酰羥胺SC防治小麥赤霉病田間藥效試驗[J].安徽農學通報,2019,25(18):82-83.
[45] 陳小潔,王其,張欣悅,等.杜仲內生細菌拮抗小麥赤霉病菌研究[J].浙江農業學報,2019,31(5):766-776.
[46] 余桂容,張敏,葉華智.小麥赤霉病的生物防治研究Ⅰ.拮抗芽孢桿菌的分離、篩選、鑒定和防病效果[J].四川農業大學學報,1998,16(3):314-318.
[47] 劉偉成,潘洪玉,席景會,等.小麥赤霉病拮抗性芽孢桿菌生防作用的研究[J].麥類作物學報,2005,25(4):95-100.
[48] 楊洪鳳,余向陽,薛雅蓉,等.內生解淀粉芽孢桿菌CC09在小麥根部定殖的電鏡觀察及防病效果[J].中國生物防治學報,2014,30(6):839-844.
[49] 李正輝,向晶晶,陳婧鴻,等.小麥赤霉病拮抗菌的分離與鑒定[J].麥類作物學報,2007,27(1):149-152.
[50] 管章玲,辛海峰,李建宏,等.小麥赤霉病拮抗菌的篩選及應用[J].江蘇農業學報,2012,28(2):309-313.
[51] 翟梅枝,問小強,劉楓,等.核桃屬植物內生真菌的分離及其抑菌活性研究[J].西北林學院學報,2009,24(3):144-147.
[52] KHAN N I,SCHISLER D A,BOEHM M J,et al.Selection and evaluation of microorganisms for biocontrol of Fusarium head blight of wheat incited by Gibberella zeae[J].Plant disease,2001,85(12):1253-1258.
[53] DAL BELLO G M,MNACO C I,SIMN M R.Biological control of seedling blight of wheat caused by Fusarium graminearum with beneficial rhizosphere microorganisms[J].World journal of microbiology and biotechnology,2002,18(7):627-636.