骨髓細(xì)胞學(xué)、白細(xì)胞、血清鐵蛋白聯(lián)合檢查對(duì)再生障礙性貧血的診斷價(jià)值

余祖輝

廣西壯族自治區(qū)防城港市防城區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣西防城港 538021

再生障礙性貧血以骨髓造血功能障礙和全血細(xì)胞減少為主要臨床特點(diǎn)，病情嚴(yán)重時(shí)患者可能出現(xiàn)感染或者出血，從而導(dǎo)致死亡[1]。目前，導(dǎo)致人體全血細(xì)胞減少的疾病種類繁多，發(fā)病機(jī)制和病因各異，如何鑒別再生障礙性貧血對(duì)其臨床治療和診斷具有重要意義[2]。骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)是再生障礙性貧血診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]。白細(xì)胞主要分為粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，在機(jī)體免疫和抗感染過程中發(fā)揮重要作用，白細(xì)胞異常與貧血、感染和腫瘤等疾病的發(fā)生密切相關(guān)[4]。鐵蛋白是一種鐵貯存蛋白，是反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況和鐵貯存情況的重要指標(biāo)，在人體造血功能及免疫功能中均起到重要作用，其水平異常與貧血和腫瘤等疾病的發(fā)生密切相關(guān)[5]。目前，骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)能夠直接對(duì)骨髓細(xì)胞的病理學(xué)改變進(jìn)行檢測(cè)，而白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)和鐵蛋白檢測(cè)可以作為再生障礙性貧血潛在的輔助性檢查手段，本研究檢測(cè)再生障礙性貧血患者的WBC和血清鐵蛋白水平，并對(duì)其進(jìn)行骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，旨在探討三者對(duì)再生障礙性貧血的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年2月至2020年6月本院診治的91例再生障礙性貧血患者作為觀察組，另選擇同期在本院進(jìn)行治療的91例非再生障礙性貧血患者作為對(duì)照組，并對(duì)其進(jìn)行回顧性分析。觀察組中，男58例，女33例；年齡23～54歲，平均(37.85±8.75)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為16.5～20.4 kg/m2，平均(18.21±1.12)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合2018年美國(guó)血液學(xué)協(xié)會(huì)制定的再生障礙性貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；(2)入院后行骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)；(3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)入院前接受過抗貧血藥物治療；(2)存在肝腎功能障礙；(3)存在全身性感染性疾病；(4)存在腫瘤；(5)妊娠期及哺乳期。對(duì)照組中，男54例，女37例；年齡20～55歲，平均(38.41±9.53)歲；BMI為16.0～21.1 kg/m2，平均(18.11±1.41)kg/m2；缺鐵性貧血36例，巨幼細(xì)胞性貧血19例，慢性病性貧血24例，溶血性貧血12例。兩組的性別比例和年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1骨髓細(xì)胞學(xué)檢查 對(duì)患者進(jìn)行局部麻醉后，選擇患者的胸骨、髂前骨或髂后骨進(jìn)行穿刺，在嚴(yán)格無(wú)菌操作下取出少量患者骨髓并制作成骨髓涂片，涂片經(jīng)瑞氏染色后進(jìn)行分析。

1.2.2骨髓鐵染色檢測(cè) 對(duì)上述骨髓涂片進(jìn)行鐵染色，使用20%的酸性亞鐵氰化鉀進(jìn)行染色，染色時(shí)間為30 min，染色結(jié)束后使用流水沖洗涂片，干燥后于倒置顯微鏡下觀察。細(xì)胞內(nèi)鐵計(jì)算：觀察100個(gè)紅細(xì)胞，計(jì)算細(xì)胞質(zhì)中存在藍(lán)色鐵粒的細(xì)胞個(gè)數(shù)所占百分比。細(xì)胞外鐵評(píng)級(jí)：無(wú)藍(lán)色鐵粒則為“-”，有少量藍(lán)色鐵粒則為“+”，有較多藍(lán)色鐵粒則為“++”，有很多藍(lán)色鐵粒則為“+++”，有極多藍(lán)色鐵粒則為“++++”[7]。

1.2.3WBC及血清鐵蛋白檢測(cè) 患者入院后采集空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，5 000 r/min離心15 min。收集上清液至另一潔凈離心管中用于后續(xù)檢測(cè)。采用邁瑞全自動(dòng)血液分析儀(型號(hào)：BC-6800)檢測(cè)WBC。采用全自動(dòng)西門子ADVIA Centaur CP化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)血清鐵蛋白水平，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1兩組WBC、血清鐵蛋白水平比較 觀察組WBC、血清鐵蛋白水平明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組WBC、血清鐵蛋白水平比較

2.2兩組患者骨髓細(xì)胞內(nèi)外鐵測(cè)定結(jié)果 觀察組細(xì)胞內(nèi)鐵明顯低于對(duì)照組，而細(xì)胞外鐵明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者骨髓細(xì)胞內(nèi)外鐵測(cè)定結(jié)果

2.3WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的結(jié)果比較 選擇WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵的平均值作為臨界值，其中WBC<5.21×109/L為陽(yáng)性，反之為陰性。血清鐵蛋白<65.64 μg/L為陽(yáng)性，反之為陰性。細(xì)胞內(nèi)鐵<28.14%為陽(yáng)性，反之為陰性。WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的符合率分別為79.12%、85.71%、81.32%和93.41%，見表3。

表3 WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血結(jié)果比較(n)

2.4WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)比較 WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)均高于WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)檢測(cè)，見表4。

表4 WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)比較

2.5WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的診斷價(jià)值分析 WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的ROC曲線的AUC值分別為0.785、0.820、0.902和0.977(P<0.05)，漸進(jìn)95%CI分別為0.729～0.832、0.771～0.874、0.845～0.962、0.754～0.869、0.921～0.998。見圖1。

圖1 WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷再生障礙性貧血的價(jià)值分析

3 討 論

造血干細(xì)胞功能障礙、免疫功能異常及造血微環(huán)境紊亂是再生障礙性貧血的主要發(fā)病機(jī)制，有研究結(jié)果顯示，遺傳因素也與再生障礙性貧血的發(fā)病密切相關(guān)[8]。而再生障礙性貧血的治療方式包括粒細(xì)胞輸注、免疫抑制治療及促造血治療等，這些治療方式對(duì)早期再生障礙性貧血患者具有較好的臨床治療效果，而對(duì)于重型再生障礙性貧血患者的治療效果不佳[9]。因此，探究與再生障礙性貧血發(fā)病密切相關(guān)的生理生化指標(biāo)，并將其應(yīng)用于再生障礙性貧血的診斷和治療中具有重要意義。

再生障礙性貧血以全血細(xì)胞減少為主要臨床特征，其中造血干細(xì)胞異常是造成全血細(xì)胞減少的重要因素[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，再生障礙性貧血患者的WBC明顯下降，表明WBC減少可能與再生障礙性貧血的發(fā)病相關(guān)，究其原因可能是由于再生障礙性貧血患者體內(nèi)的造血干細(xì)胞和WBC大量凋亡所致。已有研究報(bào)道顯示，再生障礙性貧血患者體內(nèi)的中性粒細(xì)胞及骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞周期停滯在G1期，且細(xì)胞凋亡水平增加，有部分患者出現(xiàn)造血功能異常[11]。進(jìn)一步在細(xì)胞模型中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，骨髓組細(xì)胞的分化能力存在缺陷且端粒長(zhǎng)度下降，進(jìn)而導(dǎo)致再生障礙性貧血的發(fā)生[12]。鐵蛋白是體內(nèi)鐵元素的重要貯存方式，在貧血患者中均能夠檢測(cè)到鐵蛋白水平的下降。本研究也檢測(cè)到再生障礙性貧血患者的血清鐵蛋白水平明顯下降，與已有研究報(bào)道結(jié)果一致[13]。分析其原因可能是由于鐵元素是體內(nèi)氧氣運(yùn)輸?shù)闹匾d體，鐵蛋白水平下降會(huì)導(dǎo)致血液系統(tǒng)功能紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致貧血癥狀的出現(xiàn)。細(xì)胞外鐵主要存在于機(jī)體的骨髓小粒中，而細(xì)胞內(nèi)鐵主要分布于紅細(xì)胞、晚幼紅細(xì)胞及早幼紅細(xì)胞中，兩者水平異常與貧血的發(fā)生密切相關(guān)[8]。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，再生障礙性貧血患者的細(xì)胞內(nèi)鐵減少，而細(xì)胞外鐵增多，目前對(duì)再生障礙性貧血細(xì)胞內(nèi)外鐵變化的分子機(jī)制仍然缺乏了解，需要后續(xù)深入探究。

本研究發(fā)現(xiàn)，WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的符合率、特異度、靈敏度、約登指數(shù)及AUC值均明顯高于3項(xiàng)單獨(dú)檢測(cè)，表明三者聯(lián)合檢測(cè)在再生障礙性貧血的臨床診斷中應(yīng)用價(jià)值更高。分析其原因可能是由于單純檢測(cè)WBC值很難將再生障礙性貧血與感染性疾病和過敏性疾病區(qū)分開[14]，而單純檢測(cè)血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵則很難將其與其他類型貧血疾病區(qū)分開[15]，導(dǎo)致單獨(dú)檢測(cè)會(huì)出現(xiàn)較大程度的誤檢率，而將三者聯(lián)合檢測(cè)能夠有效提高診斷的特異度和靈敏度，使得聯(lián)合檢測(cè)對(duì)再生障礙性貧血的診斷價(jià)值更高。

綜上所述，再生障礙性貧血患者WBC、血清鐵蛋白水平、細(xì)胞內(nèi)鐵下降，而細(xì)胞外鐵升高，WBC、血清鐵蛋白和細(xì)胞內(nèi)鐵聯(lián)合檢測(cè)對(duì)再生障礙性貧血的診斷價(jià)值明顯高于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)。