化學發光微粒法檢測孕婦抗TP抗體的復檢范圍探討*

齊結華，張春利，吳守樂，宦 宇，陳 宇，樂江漫，蔡徐山

上海市嘉定區婦幼保健院檢驗科，上海 201821

梅毒是由梅毒螺旋體(TP)引起的性傳播疾病，傳播途徑有性接觸、輸血和垂直傳播[1]。全球每年大約有1 000 000例孕婦感染TP[2]，2014-2018年女性梅毒和先天性梅毒的發病率分別上升了172%和185%[3]。由于不能在體外培養TP，梅毒的診斷主要基于血清學試驗[4]，血清學試驗可分為非特異性類脂抗原試驗和特異性密螺旋體抗體試驗兩大類[5]，臨床上通常通過檢測抗TP特異性抗體來診斷TP感染，雅培ARCHITECT i2000SR化學發光微粒法(CMIA)檢測抗TP抗體，具有靈敏度高、檢測周期短、高通量、操作簡便等優勢，成為實驗室常用的篩查方法，但隨著其靈敏度的提高，該方法存在一定假陽性[6]。免疫印跡法(WB)的靈敏度、特異度均較高，是目前國際公認的梅毒確證方法[7]，但由于其沒有高通量的檢測設備，價格昂貴，不適合大批量標本檢測。鑒于孕婦人群的特殊性，在進行孕婦TP篩查時，為了保證結果的準確性，有必要建立一個孕婦抗TP抗體S/CO的復檢范圍。本研究擬以WB為確證試驗，對CMIA檢測孕婦抗TP抗體進行評價，從而建立CMIA檢測孕婦抗TP抗體的復檢范圍。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年8月至2019年9月在上海市嘉定區婦幼保健院經科美Chemclin CLIA系統篩查抗TP抗體S/CO≥1.0的548例孕婦血清標本(標本均進行重名篩選)，分離血清2 mL，-80 ℃保存待檢。

1.2儀器與試劑 雅培i2000SR全自動CMIA分析儀及其配套試劑(美國雅培公司產品)。德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司生產的抗TP抗體檢測試劑盒。

1.3方法

1.3.1抗TP抗體篩查試驗 采用CMIA進行檢測，檢測結果S/CO≥1.0為抗TP抗體陽性反應，<1.0為陰性反應。

1.3.2抗TP抗體驗證試驗 采用WB結果進行驗證。

1.4統計學處理 采用SPSS19.0軟件進行數據處理及統計分析。計數資料以頻數表示；采用受試者工作特征(ROC)曲線評估CMIA的檢測性能。

2 結 果

2.1CMIA檢測抗TP抗體與WB確認結果比較 548例孕婦標本經CMIA檢測呈陽性反應490例，陰性反應58例，對S/CO≥1.0的490例孕婦標本進行WB檢測，結果為陽性483例，不確定2例，陰性5例，符合率為98.9%(483/488)；對S/CO<1.0的58例孕婦標本進行WB檢測，結果為陽性11例，不確定9例，陰性38例，符合率為77.6%(38/49)。見表1。

表1 CMIA檢測抗TP抗體與WB確認結果比較(n)

2.2以WB檢測結果為標準評估CMIA檢測孕婦抗TP抗體的性能

2.2.1以WB檢測結果為標準評估CMIA S/CO<1.0的檢測性能 去除WB結果為“不確定”的標本，以WB結果為標準繪制ROC曲線。結果顯示，CMIA檢測孕婦抗TP抗體的曲線下面積為0.984，約登指數最大時(0.921)，CMIA S/CO最佳截斷值為0.22，靈敏度為100.0%，特異度為92.1%，見表2、圖1。

表2 CMIA(S/CO<1.0)不同截斷值的檢測性能

圖1 CMIA(S/CO<1.0)的ROC曲線分析

2.2.2以WB檢測結果為標準評估CMIA S/CO≥1.0的檢測性能 去除WB結果為“不確定”的標本，以WB結果為標準繪制ROC曲線。結果顯示，CMIA檢測孕婦抗TP抗體的曲線下面積為0.986，約登指數最大時(0.979)，CMIA S/CO比值最佳截斷值為2.31，靈敏度為97.9%，特異度為100.0%，見表3、圖2。

表3 CMIA (S/CO≥1.0)不同截斷值的檢測性能

圖2 CMIA(S/CO≥1.0)的ROC曲線分析

3 討 論

梅毒的流行在世界范圍內對公共衛生產生了嚴重威脅[8]。妊娠梅毒危害極大，可導致自發性流產、胎兒窘迫、非免疫性水腫、胎兒宮內死亡、死產及新生兒圍生期死亡，或導致分娩出有嚴重后遺癥的新生兒，直接危害下一代的健康，給社會造成沉重的負擔[9]。大多數孕婦TP感染是潛伏性、無癥狀的，但超過50%的病例會出現不良妊娠結局[2]，通過對孕婦進行篩查及對梅毒檢測結果呈陽性的孕婦進行及時治療可預防由妊娠梅毒感染引起的圍生期不良后果[10]。因此，妊娠梅毒的早診斷、早治療尤為重要。

CMIA檢測抗TP抗體已在國內廣泛應用，對于CMIA的復檢范圍研究結果差異較大，童明宏等[11]研究表明，CMIA檢測抗TP抗體的S/CO最佳截斷值為4.25；黃文彩等[5]研究建議將CMIA檢測抗TP抗體的S/CO灰區設置為1.000～6.815；張薇等[6]研究表明，CMIA檢測抗TP抗體的S/CO為1.00～10.99時需要復查；但以上報道均沒有針對特定的人群。本研究在原有研究的基礎上[12]，擴大標本量，選擇應用廣泛的CMIA進行孕婦抗TP抗體的篩查。本研究結果顯示，CMIA檢測孕婦抗TP抗體S/CO≥1.0的標本490例，與WB的符合率為98.9%，ROC曲線分析結果顯示，CMIA檢測抗TP抗體S/CO最佳截斷值為2.31，與曾健等[13]報道的雅培i2000SR檢測抗TP抗體的最佳截斷值3.02比較接近；CMIA檢測孕婦抗TP抗體S/CO<1.0的標本58份，與WB的符合率為77.6%，ROC曲線分析結果顯示，CMIA檢測抗TP抗體S/CO最佳截斷值為0.22。根據本研究結果，建議將CMIA檢測孕婦抗TP抗體S/CO的復檢范圍設置為0.22～2.31，在此范圍的孕婦標本均需執行灰區處理程序，應采用WB進行確認，以盡可能減少假陽性或假陰性所造成的后果。

綜上所述，雖然CMIA檢測孕婦抗TP抗體具有較高的靈敏度和特異度，但由于孕婦是關乎下一代健康的特殊群體，無論是假陽性還是假陰性都會造成嚴重后果，所以需要檢測結果盡可能做到100%準確，故實驗室在采用CMIA篩查孕婦抗TP抗體時，需確定進行驗證試驗的S/CO復檢范圍。