羅氏Cobas 8000 e602檢測性激素6項的性能驗證

張洪艷，王紅英

江蘇省蘇州市吳江區兒童醫院檢驗科,江蘇蘇州 215129

根據ISO15189 CNAS-CL03:2012《醫學實驗室質量和能力認可準則》的規定，在開展新的檢測項目，更換檢測系統或改變檢測試劑盒廠商時，實驗室需對其相關方法學分析性能進行驗證，對廠商提供的評價資料主要性能進行確認，并每年定期對儀器進行性能驗證[1]。

Cobas 8000檢測系統為生化免疫分析一體的檢測設備，具有高效的分析能力。本室采用羅氏Cobas 8000 e602電化學發光免疫分析儀進行性激素6項檢測。為評估該檢測系統是否滿足臨床診療的需求，本文按照美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)的標準及相關參考文獻[2]對檢測項目進行性能驗證，包括正確度、精密度、參考區間、線性范圍的驗證。現將孕酮(PROG)、雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、泌乳素(PRL)及睪酮(T)的性能驗證結果報道如下。

1 材料與方法

1.1標本來源 本院門診、住院或健康體檢者的新鮮血清，標本要求無溶血、脂血及黃疸。

1.2儀器與試劑 德國羅氏公司Cobas 8000 全自動免疫分析模組中e602電化學發光免疫分析模塊。羅氏原裝試劑PROG批號：45262154，E2批號：56325120，LH批號：26542527，FSH批號：56215201，PRL批號：22562542，T批號：25621058，用同時期配套羅氏質控品及校準品。

1.3方法

1.3.1儀器使用方法 按操作說明書的要求進行系統維護保養，室內質控在控，然后再進行驗證實驗。

1.3.2精密度驗證 將正常水平質控、病理水平質控每天各檢測3次，連續檢測5 d，各得15個檢測結果。收集實驗數據，計算均值、標準差、變異系數(CV)。判斷標準：批內精密度CV值<1/4允許總誤差(TEa)，批間精密度CV值<1/3TEa(25%)，TEa為25%，為通過。

1.3.3正確度驗證 用國家衛生健康委臨床檢驗中心的室間質評物，5個水平，均測3次，收集實驗數據，求均值后與室間質評的回報靶值比較計算其偏移[3]。判斷標準：偏倚值<1/2TEa，TEa為25%，能力驗證實驗(PT)≥80%,表示正確度合格,為通過。

1.3.4線性范圍驗證 依據NCCLS EP6-A2對線性范圍進行驗證。選擇足量的濃度盡量達到線性上限及線性下限的標本各1例，高值標本可用通用稀釋液或低值標本稀釋成系列不同濃度的評價標本；最好有6個或以上系列濃度的實驗標本，數據點數不得低于5個，濃度范圍遍布整個預期可報告范圍。將高值標本(H)與低值標本(L)以L、1H∶4L、2H∶3L、3H∶2L、4H∶1L，H的體積比例混合，每個濃度重復檢測3次，記錄結果。盡量在同一批次內完成所有樣品的檢測，所有樣品應當以隨機的順序進行檢測。

以直接測定結果計算得出的相應濃度為Y，以通過稀釋測定的結果為X，經回歸方法學統計，得到R2值。評判標準：以預期濃度為Y，測定均值為X，進行線性回歸，求得方程Y=aX+b。a在0.9～1.1且R2≥0.95，b接近于0，所有數據在范圍內則線性范圍通過驗證。

1.3.5參考區間驗證 收集20例健康人血清標本及時檢測，要求其年齡、性別等均勻分布，對參考范圍進行驗證，只允許10%的數據超過所驗證的參考范圍，否則需重新建立參考范圍。檢測前質量控制要求：(1)體檢中心篩選合格候選個體；(2)標本無肉眼可見溶血；(3)乙型肝炎表面抗原陰性，且于到達實驗室后立即檢測。統計方式：通過率=測定結果在參考范圍內的例數/總測定例數×100%，通過率≥90%為合格。

2 結 果

2.1精密度驗證 精密度驗證通過，見表1。

表1 批內、批間精密度驗證結果

2.2正確度驗證 正確度驗證通過，見表2。

表2 正確度驗證統計結果

2.3線性范圍驗證 線性范圍驗證通過，見表3。

2.4參考區間驗證結果 所選20例體檢健康者，檢測結果有19例或20例在參考區間內，即95%以上的結果在參考區間內，參考區間的通過率在不同項目不同性別中均為100%，均符合≥90%的判斷驗證標準，該參考區間符合對健康人群的篩選，參考區間驗證通過。

3 討 論

檢查性激素6項能夠大致判斷患者是否存在激素分泌異常，激素分泌異常可影響患者的生育能力、性生活能力。目前，在社會壓力非常大的狀態下，女性月經紊亂及不孕不育的患者數量呈明顯上升趨勢，故性激素6項檢查顯得尤為重要，而精確可靠的檢查結果能夠更好地滿足臨床醫生對疾病的診斷和治療要求。

檢測系統的驗證項目通常包括正確度、精密度、線性范圍、參考區間等性能指標。本研究結果表明，本實驗室的各項指標性能均驗證通過，說明本實驗室性激素6項檢測項目能為臨床提供準確的檢測結果。據相關要求，醫學實驗室每年必須對所有檢測項目進行1次驗證，以保證檢測結果的準確性。在實際工作中，本實驗室已對目前所開展的18個電化學發光檢測項目進行驗證，以保證檢測結果達到質量目標要求。

精密度是在一定條件下所獲得的獨立的測定結果之間的一致性程度，以不精密度來間接表示，體現隨機誤差。本實驗中各項批內精密度及批間精密度均符合公認的質量標準要求[4-5]，能夠滿足臨床需求。

正確度是待測物的測定值與其真值的一致性程度，以偏倚來反映。筆者利用國家衛生健康委臨床檢驗中心的室間質評物測量，將實驗數據均值與室間質評的回報靶值比較計算其偏移。結果顯示，本實驗室性激素6項正確度均符合要求。

線性范圍就是同時檢測待檢項目上下限之間的不同濃度，看是否成線性關系，從而保證在該濃度范圍內檢測結果的準確性。以上線性范圍的驗證可見，回歸方程a值均在0.9～1.1，且R2≥0.95,表明本儀器線性范圍良好，在線性范圍內的檢測結果準確可靠。不足之處在于，驗證過程中缺乏極限的濃度要求，所以以后工作中仍需定期評審。

參考區間是指依據所有參考值的分布特性及臨床使用要求，選擇合適的統計學方法進行歸納分析后確定的限值，包括參考上限和參考下限，90%以上的健康人群檢測結果在參考區間范圍內，說明該參考區間符合對健康人群的篩選[6]。本研究中，參考區間驗證均通過，說明本實驗室的參考區間適用于健康人群篩查，符合臨床要求。

綜上所述，本實驗室羅氏Cobas 8000 e602電化學發光免疫分析儀檢測性激素6項的性能驗證均能達到相關的標準，能夠滿足臨床診斷和治療的需求[7]。