酶聯免疫吸附試驗對梅毒螺旋體感染的診斷價值

姚金坊

(郟縣人民醫院 檢驗科，河南 平頂山 467100)

梅毒屬于一類具有較強傳染性的性疾病，主要有2種傳染途徑，即性傳染與胎傳染，主要病原體為梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)，檢測特點為透明狀與不易著色，其發生率隨近年來人口流動量持續性增加而升高[1]。臨床常用檢測方式為血清學檢測，一般用甲苯胺紅不加熱血清試驗(tolulized red unheated serum test，TRUST)，其特異性較差，具有一定假陽性及假陰性，多用于大樣本初步篩選[2]。因此臨床仍需尋找更為準確的檢測方式。酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)是臨床新型診斷TP感染方式，具有操作簡單、自動化度高等特點，在大樣本檢測中具有較高應用效果，而在小樣本檢測中應用效果需做進一步研究。本研究選取84例疑似TP感染患者作為研究對象，旨在分析ELISA的價值，現報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料選取2018年3月至2020年3月郟縣人民醫院收治的84例疑似TP感染者接受ELISA與TRUST檢測，其中男44例，女40例，年齡22～58歲，平均(40.11±8.93)歲，體質量指數18.5～26.9 kg·m-2，平均(22.87±2.11)kg·m-2。本研究經醫院醫學倫理委員會審核通過。

1.2 選取標準(1)納入標準：①滿足梅毒感染臨床表現，即不同程度硬下疳、陰莖/陰道周邊丘疹或斑塊，腹股溝淋巴結腫大。②自愿參與本研究，且簽署知情同意書；③無血液系統疾病。(2)排除標準：①惡性腫瘤；②內分泌系統病變；③合并代謝系統疾病；④重要器官器質性病變嚴重；⑤伴有嚴重認知障礙或者精神疾病而不配合檢查。

1.3 檢測方法(1)儀器：全自動酶標儀、ELISA試劑盒、美國BIO-RAD恒溫水浴箱及洗板機、TRUST試劑盒、ELISA試劑盒；(2)步驟：取靜脈血3～5 mL，以3 000 r·min-1轉速離心15 min，取血清，分別采用ELISA、TRUST檢測，操作嚴格按照試劑盒說明書步驟進行。

1.4 觀察指標(1)臨床檢查結果。(2)ELISA檢測、TRUST檢測結果。(3)ELISA檢測、TRUST檢測的準確率、特異性、敏感性、陰性預測值、陽性預測值。(4)ELISA、TRUST檢測的分期診斷結果。(5)ELISA、TRUST檢測的分期符合率與一致性。

1.5 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件處理數據，計數資料(準確率、敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、分期符合率)以頻數(n)和百分比(%)表示，采用χ2檢驗； ELISA檢測、TRUST檢測與梅毒臨床分期的一致性采用Kappa檢驗，其中Kappa指數>0.75表示一致性極好，Kappa指數在0.4～0.75之間表示一致性較好，Kappa指數<0.4表示一致性差。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床檢查84例疑似TP感染者中，臨床檢查結果為：陽性67例(Ⅰ期25例、Ⅱ期23例、Ⅲ期19例)，陰性17例。

2.2 ELISA檢測、TRUST檢測ELISA檢測結果為真陽性66例，真陰性16例；TRUST檢測結果為真陽性58例，真陰性7例。見表1。

表1 ELISA檢測、TRUST檢測

2.3 ELISA檢測、TRUST檢測的診斷價值ELISA檢測TP感染準確率、敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值較TRUST檢測高(P<0.05)。見表2。

表2 ELISA檢測和TRUST檢測的診斷價值比較[%(n/N)]

2.4 分期診斷結果ELISA檢測結果中，無17例、Ⅰ期 24例、Ⅱ期23例、Ⅲ期20例；TRUST檢測結果中，無16例、Ⅰ 期27例、Ⅱ 期23例、Ⅲ 期18例。見表3。

表3 ELISA檢測和TRUST檢測的分期診斷結果

2.5 分期符合率與一致性ELISA檢測的分期符合率較TRUST檢測高，且Kappa指數較TRUST檢測高(P<0.05)。見表4。

表4 ELISA檢測和TRUST檢測的分期符合率與一致性比較

3 討論

梅毒多由TP感染所致，屬于較為常見的性傳播疾病之一，具有較高發病率，分為Ⅰ～Ⅲ期，其中Ⅰ期、Ⅱ期為早期，此時傳染性較低，且對患者機體破壞較少，Ⅲ期為晚期梅毒，傳染性較高，且病程較長，對機體破壞程度較大[3-4]。目前關于梅毒發病機制并未明確，一旦發生TP感染，嚴重影響生存質量，甚至增加心理負擔，導致患者產生自殺傾向。因此，早期診斷TP感染極具意義。臨床常用檢測方式包括TP血球凝集試驗、TP明膠凝集試驗、熒光TP吸收試驗等，其中TP明膠凝集試驗是基于TP血球凝集試驗發展形成，可減少TP血球凝集試驗產生的假陽性與假陰性情況，結果更為準確、可靠，并具有特異性強、操作簡便的特點，但價格昂貴，無法大范圍推廣。因此，仍需尋找更為有效的檢測方式。

臨床常用血清檢測方式為TRUST，在臨床梅毒篩查以及療效判斷中應用廣泛，屬于非TP抗原血清的檢測方式，但其檢測無特異性抗原，在臨床實際應用中特異性較差，極易發生漏診、誤診狀況。因此仍需尋找更為有效檢測手段[5-6]。近年來，ELISA已逐漸成為臨床較為廣泛的檢測方式。本研究結果顯示，ELISA檢測TP感染準確率、敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值較TRUST檢測高，ELISA檢測的分期符合率較TRUST檢測高，且Kappa指數較TRUST高，說明與TRUST檢測相比，ELISA檢測的準確率、特異性、敏感性、陰性預測值、陽性預測值較高，與臨床分期檢測結果一致性較高，可作為臨床首選檢測方式。ELISA是隨近年來基于TP基因工程所研發的一種新型血清學檢測方式，在固相載體表面吸附的抗原或抗體，經酶對抗原抗體反應進行標記，通過洗滌將液相內游離成分有效清除，觀察底物顏色變化狀況，對免疫反應狀況進行判斷。ELISA檢測是酶化學反應的敏感性與抗原抗體結合產生的高敏感性與高特異性的一類臨床檢測方式，此外，ELISA具有檢測范圍廣、無需特殊設備及操作簡單等特點，進一步提高了TP感染的臨床診斷價值[7-8]。

綜上所述，ELISA在TP感染診斷中應用價值較高，可作為臨床診斷首選檢測方式，為臨床治療方案的制定提供參照。ELISA在臨床應用時需嚴格依據試劑盒說明書中操作步驟進行，以免操作失誤而對最終檢測結果造成偏差，影響臨床治療效果。