豬德爾塔冠狀病毒抗體間接ELISA檢測方法的建立及初步應用

錢炳旭，白雪雁，張成成，郭夢嬌，李夢嬌，廖 凱，薛 峰，吳艷濤，張小榮*

(1.揚州大學 獸醫學院 江蘇高校動物重要疫病與人獸共患病防控協同創新中心，江蘇 揚州 225000；2.南京農業大學 動物健康與食品安全國際合作實驗室，江蘇 南京 210095)

豬德爾塔冠狀病毒(porcine Deltacoronavirus，PDCoV)是2012年首次在中國香港發現的腸道致病性冠狀病毒[1]，可感染各個年齡段的豬，對新生仔豬有較強的致病性，表現為水樣腹瀉、嘔吐，嚴重時會因脫水致死，發病率和病死率較高[2-5]。2014年，美國首次出現PDCoV的大規模流行，俄亥俄州、愛荷華州、伊利諾斯州等多地相繼暴發了仔豬腹瀉，研究人員在發生腹瀉的豬場檢測到PDCoV，并采集病料進行了病毒分離[6-7]。隨后，PDCoV在泰國[8]、加拿大[9]、韓國[10]、中國[11]等地均有出現和報道，呈現全球流行的趨勢，逐漸成為威脅世界養豬業的重要腹瀉病原之一。

PDCoV屬于冠狀病毒科、德爾塔(δ)冠狀病毒屬，是有囊膜的單股正鏈RNA病毒，病毒粒子呈多形性，內部基因組RNA和核衣殼蛋白組成了核蛋白核芯。病毒外膜上有大量棒狀結構突起，直徑為60～180 nm，呈典型的“皇冠”狀冠狀病毒形態[12]。PDCoV的基因組約為25.4 kb，是目前已知的冠狀病毒中基因組最小的，GC含量約為43%。基因組組成、排列順序為：5′非翻譯區(untranslated region，UTR)、開放閱讀框(open reading frame，ORF)1a/1b、棘突蛋白(spike，S)、小膜蛋白(envelope，E)、膜蛋白(membrane，M)、核衣殼蛋白(nucleocapsid，N)、輔助蛋白NS6、輔助蛋白NS7以及3′端非翻譯區[13]。

PDCoV感染后的病理變化與豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)和豬傳染性胃腸炎病毒(transmissible gastroenteritis virus，TGEV)十分相似，主要表現為腸壁變薄、透明(遠端空腸至結腸)，腸腔內有大量淡黃色的液體；……