馬皰疹病毒1型gp2基因缺失株的構建及生長特性分析

胡 月，賈欽瑞，吳桂靈，車傳忠，劉建華，加爾肯，冉多良

(新疆農業大學 動物醫學學院，新疆 烏魯木齊 830052)

馬皰疹病毒1型(equine herpesvirus-1，EHV-1)曾被列為馬鼻肺炎的病原體之一，2012年5月世界衛生組織將其所致疾病稱為馬皰疹病毒-1型感染(infection with equine herpesvirus-1)，2020年7月我國農業農村部將該病列為二類動物傳染病[1]。該病毒可引起馬屬動物呼吸系統疾病、孕馬流產、新生馬駒死亡和神經系統疾病，給馬產業造成嚴重的威脅[2]。歷年來，我國的流行病學調查顯示，全國各地區均有EHV-1的流行[3]。2015-2019年，新疆地區該病的平均陽性率為30.47%，成為當前需要重點防控的病毒性傳染病之一[4-5]。

EHV-1具有很強的傳染性，潛伏期長且無特效藥治療，免疫接種是預防該病最有效的手段。目前，我國尚無防控該病的商品化疫苗，主要依賴進口，價格昂貴，故急需一種適用于我國流行毒株的、自主研發的疫苗。FRYMUS等[6]研究表明,EHV-1減毒活疫苗能誘導機體產生體液免疫和細胞免疫應答，其免疫保護效果高于滅活疫苗。EHV-1的gp2蛋白含有817個氨基酸，是病毒復制過程中非必需糖蛋白，與病毒的毒力直接相關。與HSV-1和α亞科其他的病毒相比，gp2是EHV-1編碼的特有的糖蛋白，富含絲氨酸和蘇氨酸，具有很高的免疫原性[7]。因此,本試驗擬以我國流行毒株EHV-1 XJ2015株為親本毒株，采用同源重組方法篩選出gp2基因缺失毒株，為后續EHV-1毒力基因缺失疫苗的研制奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 毒株與細胞EHV-1 XJ2015株、RK-13細胞系、載體pEGFP-C1和pUC19均由新疆農業大學動物醫學學院傳染病實驗室保存。

1.2 主要試劑2×PrimerSTAR Max購自于北京全式金生物技術有限公司；……