鸚鵡源禽博爾納病毒的鑒定及全基因序列分析

翟俊瓊，單 芬，李婉萍，周 妞，羅滿林，陳 武*

(1.廣州動物園 廣州市野生動物研究中心，廣東 廣州 510070；2.華南農業大學 獸醫學院，廣東 廣州 510642)

禽博爾納病毒(avian Borna virus，ABV)是單股、不分節段的負鏈RNA病毒[1]，基因組全長8.9 kb，病毒粒子呈球形，直徑約90 nm[2]，基因組編碼6種蛋白：核蛋白(N)、磷蛋白(P)、與磷蛋白重疊的小蛋白(X)、基質蛋白(M)、包膜蛋白(G)和RNA依賴的RNA聚合酶(L)[3]。2008年，ABV首次被鑒定為引起一種致命的鸚鵡神經疾病-腺胃性擴張癥(proventricular dilatanon disease,PDD)的病原體[4-5]；隨后，在水禽和鳴禽中也發現該病毒[6-10]。到目前為止，已經從超過80種鳥類、50種鸚鵡上檢測到8種不同基因型ABV[11-15]。ABV主要引起患病鳥類出現腹部腫大、體質量減輕、消化不良、共濟失調等癥狀，病死率很高，導致大量圈養鳥類包括瀕危物種的死亡，對養殖業以及供觀賞類的服務業造成極大威脅[16-17]。目前，還沒有有效的方法來治療ABV感染，只能進行對癥治療和管理[12,18]。

國內對鸚鵡源禽博爾納病毒(parrot Bornavirus，PaBV)的相關報道甚少[19]，本試驗通過觀察疑似感染ABV的鸚鵡生前體征、死后剖檢、病理切片以及RT-PCR檢測PaBV核酸，最終證實鸚鵡感染PaBV；選取1份陽性樣本擴增全基因組序列，通過分析其遺傳進化關系和核苷酸同源性，了解該毒株的親緣關系及流行趨勢，為我國PaBV的防控提供一定的理論基礎和參考。

1 材料與方法

1.1 病料收集于上海、成都、廣州、佛山等養殖場的死亡鸚鵡,其中太陽錐尾鸚鵡4只、琉璃金剛鸚鵡1只、藍眼巴丹鸚鵡2只、黃頭亞馬遜鸚鵡1只、紅綠金剛鸚鵡1只和灰鸚鵡1只。

1.2 主要試劑病毒RNA抽提試劑盒購自AXYGEN，反轉錄試劑盒、pMD19-T載體、E.coliDH5α感受態細胞購自TaKaRa，膠回收試劑盒購自OMEGA，PCR反應酶購自Thermo Fisher。……